This standard specifies the general principles for the sampling and analysis of bioaerosols with different characteristics such as bacteria, viruses, fungi and toxins in the ambient air environment. This standard is applicable to the sampling and analysis of bioaerosols in the ambient air environment.

ICS.19.120
中华人民共和国国家标准國
GB/T38517—2020
生物气溶胶采样和分析
ParticulateBioaerosols sampling and analysisGeneral principles2020-03-06发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2020-06-01实施
搬/38517—2020
规范性引用文件
术语和定义
生物气溶胶采样
生物气溶胶采样方法
生物气溶胶采样方法的选择
生物气溶胶采样器的选择
采样辅助器材
采样程序
生物气溶胶分析
生物气溶胶的定性分析
生物气溶胶的定量分析
附录A（资料性附录）
附录B（资料性附录）
参考文献
生物气溶胶采样器的性能和选择原则生物气溶胶采样和定量分析（培养分析法）记录8
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。搬/辙38517-2020
本标准由全国颗粒表征与分检及筛网标准化技术委员会（SAC/TC168)提出并归口。本标准起草单位：军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所、青岛众瑞智能仪器有限公司、中国科学院过程工程研究所、中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所、中国检验检疫科学研究院、山东农业大学、复旦大学、安徽宾肯电气股份有限公司、北京拓普天成科技发展有限公司、天津市春信净化制冷设备有限公司。
本标准主要起草人：李劲松、李娜、何春雷、李兆军、周兰、胡凌飞、杨文慧、刘凡、胡孔星、柴同杰、隋国栋、张柯、靳爱军、叶佳、王洋、李秋实。H
搬/38517-2020
本标准为环境空气中细菌、病毒、真菌和毒素等不同特性的生物气溶胶（也称之为空气微生物）的采样提供了采样方法和生物气溶胶的分析，其中，采样方法包括采样原理、采样器的选择和采样过程中应关注的问题；分析方法包括分析方法的类型、方法的适用性、分析结果的表达方式。在附录A中提供采样器性能和选择的原则；在附录B中提供生物气溶胶采样全过程的记录表格。H
颗粒生物气溶胶采样和分析通则搬/38517—2020
警示一在使用本标准过程中可能涉及有危害性的生物成分、操作和设备。本标准没有包含使用本标准时应注意的生物安全问题，使用者在使用本标准前应当根据采样目的和采样环境的生物危害风险，采取适当的生物安全防护措施。1范围
本标准规定了环境空气中细菌，病毒、真菌和毒素等不同特性的生物气溶胶的采样和分析方法的通用原则。
本标准适用于环境空气中的生物气溶胶的采样和分析。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T16293
GB/T16294
GB/T18203
医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法室内空气中溶血性链球菌卫生标准GB/T18204.3
GB50591www.bzxz.net
3术语和定义
公共场所卫生检验方法第3部分：空气微生物洁净室施工及验收规范
下列术语和定义适用于本文件。3.1
学牛物
犹特书探红狂狂行模代往自狗
微生物狮发孙狂狂拯挖摄状狮臭个体难以用肉眼观察的一切微小生物的统称。注1：引自全国科学技术名词审定委员会公布的《微生物学名词》（第二版）。注2：本标准所指微生物仅包括细菌、真菌、病毒细菌擎发示才市楼
以细胞壁含胞壁酸，膜脂为酯键脂、RNA聚合酶无 I型启动子等为主要特征的原核生物的总称。以细起壁名起
夜，膜脂为晶健脂
注：引自全国科学技术名词审定委员会公布的《微生物学名词》（第二版）。病毒孢还往臭
由RNA或DNA及蛋白质等组成的，专营细胞内感染和复制的一大类结构简单的微生物。注：引自全国科学技术名词审定委员会公布的《微生物学名词》（第二版）。真菌。豹状沛。
免叶绿繁、有细胞壁、营吸收营养的真核生物。普遍以有性和无性两种方式产生孢子进行繁殖，通1
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常为丝状且有分枝的体细胞结构，一般都有细胞壁。注：引自全国科学技术名词审定委员会公布的《微生物学名词》（第二版），3.5
孢子，昊独狂环材
真菌或细菌中能直接发育成新个体的微小繁殖单元。注：引自全国科学技术名词审定委员会公布的《微生物学名词》（第二版）。3.6
毒素绿狂皱状
生物产生的、对他种生物体有毒性的产物。注1：改写自全国科学技术名词审定委员会公布的《微生物学名词》（第二版）。注2：毒素从来源分有微生物毒素、植物毒素和动物毒素三类。3.7
生物气溶胶擎狂鞭才狂昊狂状
含有生物性成分的固体或液体微粒悬浮于气体介质中形成的稳定分散系。注：生物性成分包括细菌、病毒、真菌、孢子、毒素等。生物气溶胶粒子粒径在 0.01 μm~100 μm之间或
径独搏不标怖发状材薄材还狂独狠状携术肺发救猜携独才标材还粒子空气动力学粒径
禁一种学
无化真形软“美
关“美和密度姑滑，在空气牢的沉降速度与一种密度为1 g/cm3的球形粒子的沉降速度一致时的该粒子的直径，3.9
采样介质发狂获状才发邪狂状猴才樓用来捕获、承载生物气溶胶粒子的物质。注：采样介质一般具有稳定性、粘附性、无毒性、抗蒸发、水溶性等基本性能。3.10
专狂壮红业狗
发狂获狂获症
在固体基质裹面或内部形成的紧密生活在一起肉眼可见的同一微生物物种的群体，或来源于同一细胞的一群细胞。
注：引自全国科学技术名词审定委员会公布的《微生物学名词》（第二版）：3.11
菌落形成单位发狂犹狂状猴豹狂环孜猜状状猜病：辅婷撞发狂获狂肤癌豹狂拯打状挖狂状柿拯；植得律洛形成生！
根据固体培养基上形成的菌落数，测定样品中活菌浓度的单位。注1：引自全国科学技术名词审定委员会公布的《微生物学名词》（第二版）注2：一个菌落形成单位能从单个微生物形成，也可以是多个微生物的聚集体或者是一个或者多个微生物黏附在一个粒子上。
注3：生长出的菌落数量跟培养条件有关。3.12
菌落总数发狂状狂状市豺昊状辈材还菌落生长总数
在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）单位质量或单位体积样本所生长出（如需氧元、营乔杀件、
工定东件
来的、能被肉眼识别的微生物生长物数量。3.13
独状镶沐挂材
病毒感染人工培养的单层细胞后由单个病毒粒子所产生的细胞裂解区。注：引自全国科学技术名词审定委员会公布的《微生物学名词》（第二版），3.14
噬斑形成单位_独状镶狱驻材豹狂市状汽驻状违标；摩停撞AA
每革位体积或董量的病毒悬液所能形成的噬斑数。注：引自全国科学技术名词审定委员会公布的《微生物学名词》（第二版）。4生物气溶胶采样
4.1概述
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生物气溶胶的浓度、粒径、活性等具有不确定性和不稳定性，不同的生物成分对采样过程的耐受力差异很大，生物成分的分析方法也不相同。因此，在充分考虑生物气溶胶上述特点外，结合采样环境和采样目的，决定采样方法和选用采样器种类。生物气溶胶采样器的性能和选择原则参见附录A。4.2生物气溶胶采样方法
4.2.1撞击式采样
利用惯性作用，通过喷嘴、喷口或裂隙的加速作用把生物气溶胶粒子采集到固体介质表面的气溶胶采集方式。
4.2.2冲击式采样
能够使具有足够大惯性的生物气溶胶粒子撞击液体并进入液体介质中的气溶胶采集方式。4.2.3滤膜采样
生物气溶胶粒子通过各种滤材时，滤材小孔对粒子的阻留或／和滤材对粒子的静电吸引阻留作用，将粒子捕获在滤材上的采集方式。4.2.4离心式采样
一种让气体以高速旋转所产生的离心力将生物气溶胶粒子与气流分开并撞击到固体介质表面上或富集到液体介质里的采集方式。注：液体介质的离心采样也称之为气旋式采样。4.2.5大流量采样
以200 L/min 以上的采样流量把生物气溶胶采集到液体里或固体介质上的采样方式小床性流单记生物
勿成浴胶术果到
4.2.6静电吸附采样
用多种方法使生物气溶胶粒子带上电荷，在电场的作用下通过静电吸附收集生物气溶胶粒子的采集方法。
4.2.7自然沉降采样
生物气溶胶粒子在重力作用下自然下沉降落到采样面（即微生物营养琼脂平血表面）的采集方式。3
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4.3生物气溶胶采样方法的选择
4.3.1细菌气溶胶采样方法
4.3.1.1细菌气溶胶定性分析采样方法细菌气溶胶的定性分析，即细菌生物学特性分析。可选择撞击式采样、冲击式采样、滤膜采样、离心式采样、静电吸附采样等方法。4.3.1.2细菌气溶胶定量分析采样方法细菌气溶胶的定量分析，即细菌气溶胶的细菌总数分析。可逆可选择撞击式采样、冲击式采样、离心式细菌气溶胶的宝
性技→
采样、静电吸附采样、自然沉降采样等方法。其中，自然沉降采样法仅限于洁净环境或外界干扰小的环境采样。
4.3.2真菌气溶胶采样方法
真菌气溶胶定性分析采样方法
真菌气溶胶的定性分析，即真菌生物学特性分析。可选择撞击式采样、冲击式采样、滤膜采样、离心式采样等方法。
真菌气溶胶定量分析采样方法
真菌气溶胶的定量分析，即真菌总数分析。可选择撞击式采样、冲击式采样、滤膜采样、离心式采样、自然沉降采样等方法。
4.3.3病毒气溶胶采样方法
病毒气溶胶定性分析采样方法
病毒气溶胶的定性分析，即病毒生物学特性分析。可选择冲击式采样、滤膜采样、离心式采样（液体介质）、静电吸附采样、撞击式采样等方法。选择撞击式采样时，应在琼脂表面涂抹一层薄的水溶性粘质层。
4.3.3.2病毒气溶胶定量分析采样方法病毒气溶胶的定量分析，即病毒总数分析。可选择冲击式采样、滤膜采样、离心式采样（液体介质）静电吸附采样、撞击式采样等方法。选择撞击式采样时，应在琼脂表面涂抹一层薄的水溶性粘质层。4.3.4毒素气溶胶采样方法
4.3.4.1毒素气溶胶定性分析采样方法毒素气溶胶的定性分析，即毒素生物学特性分析。可选择冲击式采样、离心式采样（液体介质）、滤膜采样等方法。选择撞击式采样时，应在琼脂表面涂抹一层薄的水溶性粘质层。4.3.4.2毒素气溶胶定量分析采样方法毒素气溶胶的定量分析，即毒素质量分析。可选择冲击式采样、离心式采样（液体介质）、滤膜采样撞击式采样等方法。选择撞击式采样时，应在琼脂表面涂抹一层薄的水溶性粘质层。4
4.4生物气溶胶采样器的选择
4.4.1采样器的要求
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采样器应有明确的物理采样效率、生物采样效率，以及采集生物气溶胶的粒子空气动力学粒径范围，应说明采样介质类型及其对微生物存活的影响。4.4.2采样器类型
4.4.2.1撞击式采样器
通过喷嘴、喷口或裂隙的加速作用把生物气溶胶粒子采集到固体或半固体介质表面的采样器。通常分为筛孔式、狭缝式的撞击式采样器。测量生物气溶胶粒径分布宜选择六级撞击式采样器等。4.4.2.2冲击式采样器
基于用气流对液体的冲击、清洗或雾化等原理，经空气中的生物气溶胶粒子捕获在液体介质中的采样器。通常可以选择全玻璃液体冲击式采样器、气旋冲击式采样器等。这类采样器采样流量小，适用于高浓度的生物气溶胶采样；对浓度特别低的生物气溶胶还可以选择大流量采样器。4.4.2.3过滤式采样器
把生物气溶胶粒子捕获在滤膜上的采样器。根据后续样本分析方法的需要选择滤膜。4.4.2.4离心式采样器
通过气体高速旋转所产生的离心力将生物气溶胶粒子与气流分开并撞击到固体介质表面上或富集到液体介质量的采集装置。
4.4.2.5大流量采样器
用较大采样流量将目标粒子分离、浓缩到采样介质中的采样装置。这种采样器适用于环境空气中低浓度目标生物气溶胶的采集。4.4.2.6静电吸附采样器
用多种方法使生物气溶胶粒子带上电荷，利用静电吸附原理，在电场的作用下收集生物气溶胶粒子的采样装置。这类采样器适用于病毒气溶胶的采集，对病毒气溶胶存活力无明显降低：大流量静电吸附采样器适用于低浓度病毒气溶胶的采集。4.4.2.7自然沉降采样
粗略测量空气微生物粒子沉降量的方法，测量细菌总数一般用营养琼脂平血采集，测量真菌总数一般用沙氏培养基平血采集。
4.5采样辅助器材
4.5.1概述
采样辅助器材包括采样过程中所需的无菌采样介质、容器、器材等。4.5.2采样介质
在生物气溶胶采样过程中使用无菌采样介质。4.5.2.11
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固体采样介质包括各种固体营养琼脂、半固体营养琼脂和各种滤膜4.5.2.3、液体采样介质包括生理盐水、磷酸缓冲液、营养液等各种液体。4.5.2.4采样时，考虑生物气溶胶粒子中生物成分的活性，采用介质应选固体或半固体培养基、含有营养成分的液体、中性液体等。
采样时，不考虑生物气溶胶粒子中生物成分的活性，仅考虑生物气溶胶粒子采样效率，可选择多种采样介质，如固体或半固体培养基、含有营养成分的液体、中性液体、滤膜等。4.5.3样品包装器材
4.5.3.1普通生物气溶胶采集样品包装器材应满足防污染、防破碎、防溢酒的要求。4.5.3.2生物气溶胶样品含有病原微生物，采集样品包装（器材）应符合国家或部委有关病原微生物样品的包装要求。
4.5.4人员防护装备
采集含有病原微生物的生物气溶胶时，采样人员应按照国家或部委的病原微生物危害等级的4.5.4.1
防护要求穿戴相应防护等级的个人防护装备4.5.4.2普通环境的生物气溶胶采样时，采样人员应穿戴一般个人防护用品。4.5.4.3特定环境（如洁净环境）的生物气溶胶采样，采样人员应按照GB/T16293、GB/T16294等国家相关标准或采样环境要求穿戴个人防护装备。4.5.5消毒与灭菌器材
4.5.5．1消毒剂应选用符合卫生消毒技术规范要求的方法与技术，应有时效性。采样前，采样器的采样头、相关器材等应进行灭菌处理，操作人员手应进行消毒4.5.5.2
采样后，采样器的采样头、样品包装容器等应进行灭菌处理，操作人员手等应进行消毒。4.5.5.3
4.6采样程序
采样前准备
根据采样任务和采样计划确定采样器类型、配件、辅助器材及其相应的数量。4.6.1.1
4.6.1.2生物气溶胶采样使用器材应是无菌状态。4.6.1.3采样前应考虑环境湿度、环境温度，以及所采菌落类型等影响因素，确定采样时间。注：影响生物采样效率的主要因素是环境因素。4.6.2采样器核查
应根据使用说明书对采样器进行检查与维护。4.6.2.1
使用前应检查采样器运行正常，保证采样流量在充许的误差范围内。4.6.3采样点设置
室外环境普通生物气溶胶采样，应根据生物气溶胶的来源位置、风向、风速和周边环境特点设置相应的采样点和采样点数量。4.6.3.2特定环境（如洁净环境）应按照GB/T16293、GB/T16294、GB/T18203、GB/T18204.3、GB50591等国家或其他相关标准要求进行设置采样点。4.6.3.3采集病原微生物的生物气溶胶时，应根据采样的目的和现场环境特点，设置采样点位置和数量。
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4.6.34一般环境监测时，生物气溶胶采样器的采样入胶采样器的采样入口安装高度宜为 1.2 m~1.6 m。生物气演
注：疑似出现人为故意施放生物危害或意外泄露现场，可直接选择疑似生物气溶胶危害源最靠近的位置安装采样器。
4.6.4采样时间设定
采样时间设定一般要求
设定采样时间时应充分考虑采集的生物气溶胶类型、采样方法、采样器类型、采样介质类型、采样环境因素、后续分析方法等，设定合理的采样时间，4.6.4.2固体采样介质
撞击式采样器采样时间宜<15 mi, 离心式采样器采样时间≤8 min。4.6.4.3液体采样介质
冲击式采样器采样时间宜≤30 min,干燥环境采样时间<20 min。4.6.4.4滤膜采样介质
过滤式采样器采样时间宜≤10 min,若采集样本仅用核酸方法进行分析，采样时间不限。4.6.4.5沉降采样
般室内采样时间宜<30 min洁净环境采样时间宜<24 h。4.6.4.6按生物气溶胶类型设定采样时间通常细菌气溶胶一次采样时间为 5 min~15 min病毒气溶胶一次采样时间为 15 min~30 min,真菌及孢子气溶胶一次采样时间为 0.5 h~24 h。4.6.5对照设置
4.6.5.1概述
设置相应分析空白对照样本和现场空白对照样本。4.6.5.2分析空白对照
为在全部分析过程中不会有显著的污染出现，应设置一个覆盖分析全过程的阴性对照样品，阴性样品包含分析步骤，包括高压、平板制备、悬浮和提取、稀释、培养、计数等过程4.6.5.3现场空白对照
为在全部测试步骤中不会出现显著污染，应以核查操作者能够承担任务的量化水准，由一个空白样品决定，空白样品包含全部测试步骤，包括准备、采样、运输和分析。注：现场空白样品是在采样过程中同时采样，但不通过采样器吸取空气。现场空白对照结果代表在采样过程中通过操作采样介质进入样本中微生物的数量。现场空白对照值不用来校正测试结果，但用于检查采样误差。4.6.6采样过程
4.6.6.1将采用介质装入采样器，操作应避免污染。4.6.6.2启动采样器，避免采样器周围有人为因素的气流干扰。7
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4.6.6.3采样完毕后，取回采样介质时，应检查其完整状态，之后将其密封，以避免二次污染。4.6.7样本包装和运输
采集的样本应在10h
在 o内送到分析实验室。
4.6.7.2“当保护采集释本免受客种宇扰（如光照、潮湿、干燥、受热、沾尘等）。一次性平血采集样本在运输过程中应保持采样面朝下，液体采集样本在运输过程中应保持容器口朝上，滤膜采集样本在运输过程中应保持采样面朝上。
注：不同的采集样本在密封容器内的放置状态也不相同。4673包装好样态应在0~℃~10℃条件下保存。应记暴存条件任Ee
4.74运过程年的盒度<10~℃。应选录运输过程的各馈参数（温度、湿度、持续时间）。4.6.8采样记录
4，6，8，1在采样之前和采样过程中，应填写采样记录，记录应对测试地点的环境应有相应的描述（采样报告的范例参见附录B）。
采用记录包括但不限于以下内容：4.6.8.2
每个样本的唯一标识。
甘期骂时简。
老样人贯好
释点位置（地理坐标），
素默馨素活情况/(断交通是终荷硬引腹场尘等)0
教子精为辅瘦况人婚维家烫
具斑得起扬尘等）。
温、相对湿度、然阳辐射、速、斑及气压。集唇效
样本保管欠员姓名。
5生物气溶胶分析
生物气溶胶的定性分析
注：生物气溶胶的定性分析是指通过微生物的形态学、生化反应、血清学、PCR和基因序列测序等分析方法对采集的生物气溶胶样本中的微生物种类进行分析。形态学分析
通过染色和显微镜观察，确定细菌和真菌的形态特征对其进行归类。形态学分析适用于生物气溶胶颗粒中培养出来的细菌和真菌的定性分析。参照国家或行业标准执行。5.1.2生化反应分析
生化反应分析适用于生物气溶胶颗粒中培养出来的各种细菌鉴定分析。参照国家、行业标准或现行有效的成熟方法执行。
5.1.3血清学分析
血清学分析适用于生物气溶胶颗粒中培养出来的各种细菌和病毒的定性分析。参照国家、行业标准或现行有效的成熟方法执行。8
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