本文件规定了洗涤用脂肪酶的产品分类、要求、试验方法、检验规则，以及标志、包装、运输、贮存和保质期。 本文件适用于经微生物发酵、提纯等工艺制得的用于洗涤剂工业的脂肪酶。

ICS71.100.40
CCSY43
中华人民共和国国家标准
GB/T42239.2—2022
洗涤用酶制剂
第2部分：脂肪酶
Enzymes for detergent-Part 2:Lipase2022-12-30发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2022-12-30实施
GB/T42239.2—2022
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件是GB/T42239《洗涤用酶制剂》的第2部分，GB/T42239已经发布了以下部分：第1部分：碱性蛋白酶：
第2部分：脂肪酶。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任本文件由中国轻工业联合会提出。本文件由全国表面活性剂和洗涤用品标准化技术委员会（SAC/TC272）归口本文件起草单位：中国日用化学研究院有限公司、诺维信（中国）投资有限公司、深圳市芭格美生物科技有限公司、杰能科（中国）生物工程有限公司、英联酶制剂贸易（上海）有限公司、广东溢多利生物科技股份有限公司、福建省梦娇兰日用化学品有限公司、广东中联邦精细化工有限公司、黄河三角洲京博化工研究院有限公司、中国皮革制鞋研究院有限公司、大连洁仕清洁用品有限公司、中轻日用化学检验认证有限公司，
本文件主要起草人：刘奕彤、郑海蜂、陈娟、郭宏涛、宗李燕、袁琳、曹振宇、王俊、姚晨之、何智勇、周火生、蔡颗辉、桑军、李秋梅、王杰、李晓辉。GB/T42239.2—2022
洗涤用品行业是酶制剂重要的应用领域之一，制定GB/T42239(洗涤用酶制剂》，对于我国洗涤用品行业规范含酶类洗涤用品细分领域的市场·指导行业内企业创新开发新产品·杜绝不良企业欺骗消费者，促进洗涤用品行业快速、良性发展具有重要的意义GB/T42239《洗涤用酶制剂》拟由以下2个部分构成：第1部分：碱性蛋白酶，目的在于确立洗涤用碱性蛋白酶的分类和技术要求；一第2部分：脂肪酶，目的在于确立洗涤用脂肪酶的分类和技术要求。1范围
洗涤用酶制剂第2部分：脂肪酶
GB/T42239.2—2022
本文件规定了洗涤用脂肪酶的产品分类、要求、试验方法、检验规则，以及标志、包装、运输、贮存和保质期。
本文件适用于经微生物发酵、提纯等工艺制得的用于洗涤剂工业的脂肪酶。2
规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T191
包装储运图示标志
GB/T6003.1
GB/T6005
GB/T6682
GB/T13174
GB15258
QB/T2739
JJF1070
术语和定义
试验筛技术要求和检验第1部分：金属丝编织网试验筛试验筛金属丝编织网、穿孔板和电成型薄板筛孔的基本尺寸分析实验室用水规格和试验方法衣料用洗涤剂去污力及循环洗涤性能的测定化学品安全标签编写规定
洗涤用品常用试验方法滴定分析（容量分析）用试验溶液的制备定量包装商品净含量计量检验规则下列术语和定义适用于本文件。3.1
脂肪酶
lipase
可将甘油三酯（油脂）水解·在不同阶段可释放出脂肪酸、甘油二酯、甘油单酯及甘油，同时也能催化酯合成和酯交换反应的酶。
lipaseactivity
脂肪酶酶活力
脂肪酶催化脂肪水解的能力。
注：胎肪静幕活力以脂肪静酶活力单位表示，1g周体腾粉（或1mL液体）.在一定温度和pH条件下1min内水解底物产生1μmol的可滴定脂肪酸，即为1个酶活力单位，用U/g表示。符号和缩略语
下列符号和缩略语适用于本文件。JB-04：胡萝卜素猪油污布
F+：洗前白度值。
GB/T42239.2—2022
F.：洗后白度值。
R：去污值。
P：去污比值，
产品分类
按产品形态分为液体剂型和固体剂型。要求
外观和理化性能要求
产品的外观和理化性能指标应符合表1的规定。表1
酶活力（U/g）
粒度（<150μm）/%
去污力比值JB-04污布）
外观和理化性能指标
液体剂型
浅黄色至棕褐色液体
固体剂型
白色、灰白色、黄色或其他
颜色可自由流动的巢粒
标示值
试验溶液浓度：GB/T13174规定的标准洗衣粉为0.2%，脂肪制剂加人量为0.4%（相对于标准粉质量计）6.2
定量包装要求
每批产品的销售包装净含量应符合JJF1070的要求试验方法
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682中规定的三级或以上的水外观
取适量样品，置于干燥洁净的透明实验器皿内，在非直射光条件下进行观察。酶活力
按附录A进行
采用不同于附录A的方法测定时，应提供所应用的酶活力单位与本文件确定的酶活力单位的转换系数。
按附录B进行。
7.5去污力比值
按附录C进行。
7.6净含量
按JJF1070的规定进行。
检验规则
检验分类
出厂检验
出厂检验项目为表1规定的外观、酶活力。8.1.2
型式检验
型式检验为表1规定的全部项目，在下列情况下应进行型式检验：a)
正常生产时，定期进行型式检验，一般情况每年一次：GB/T42239.2—2022
生产工艺、生产设备、原材料、催化剂等变化或不正常，以及生产管理要索（包括人员素质）的变化可能影响产品质量和性能时：长期停产后再恢复生产时：
出厂检验结果与上次的型式检验有较大差异时；市场监督管理机构、使用单位提出型式检验要求时。组批与抽样原则
产品按批交付和抽样验收，一次交付的同一类型、规格、批号的产品组成交付批8.2.2
产品应经生产厂的质量检验部门按本文件规定的检验方法检验合格，并出具产品质量检验合格证方可出厂，收货单位应在到货一个月内，凭合格证验收，必要时可按8.2.3抽样验收8.2.3
3抽样
根据批量大小·按表2确定样本大小，从批中随机抽取样本单位，取样前应将选定的样本包装中的样品混合均匀，在保证均匀的前提下方可取样。表2
样本大小
判定规则与复检
批量和样本大小
单位为桶/箱/袋
51~500
外观指标检验不合格，可重新抽样进行复检，复检结果仍不合格则判该批产品不合格。3
GB/T42239.2—2022
理化指标检验结果按修约值比较法修约后与指标比较判定合格与否，如有一项指标不合格，可重新取两倍箱样本采取样品，对不合格项进行复检，复检结果仍不合格，则判该批产品不合格交收双方因检验结果不同，不能取得协议时，可商请仲裁检验，仲裁检验结果为最后依据。产品质量监督检验及仲裁机构抽查检验时不进行二次抽样8.4仲裁
收货单位如发现产品质量不符合本文件规定的要求，应在到货1个月内向生产者交涉。若因检验结果不同，不能取得协议时，双方应按8.2.3取样。取样总量不应少于450g，将选取的试样仔细混匀后，分别装人3个洁净干燥的样品瓶中，签封。标签上应注明产品名称、规格、批号、生产者名称、取样日期、取样人。交收双方各执一份，第三份签封后，备仲裁检验用，样品存放于略暗处，接照建议贮存温度赔存，保存期1个月。仲裁检验结果为最后依据。标志、包装、运输、购存和保质期9
9.1标志
产品的外包装使用符合GB/T191要求的标志。产品的包装上应贴有牢固的标签。标签内容应包括产品名称、净含量、生产者和（或）经销者的名称、地址和联系方式、生产日期和保质期、贮存条件、批号及其他需要标示的内容。化学品安全标签内容应符合GB15258的要求
9.2包装
产品的内包装和（或）包装容器的内涂料应符合相关规定。9.3运输
产品在运输过程中应轻拿轻放，不应倒置，严防雨淋和暴晒，不应在箱上踏和堆放重物。运输工具应清洁、无毒、无污染，不应与有毒、有害、有腐蚀性的物质混装混运9.4购存
产品应贮存在阴凉干燥的环境下。不应与有毒、有害、有腐蚀性的物质同存堆垛要采取必要的防护措施，堆垛高度要适当，避免损坏运输包装。9.5
保质期
保质期由生产企业自定。
在规定的运输和包装贮存条件下，保质期内的酶活力不应低于标示酶活力。注：超过保质期的产品仍具有使用价值，使用时重新测定活力。4
A.1方法概要
附录A
《规范性）
酶活力的测定
GB/T42239.2—2022
脂肪酶在一定条件下，能使甘油三酯水解成脂肪酸、甘油二酯、甘油单酯和甘油，所释放的脂肪酸可用标准碱溶液进行中和滴定，用酚献指示剂或自动滴定仪指示反应终点，根据消耗的碱量，计算其酶活力。反应式为：
RCOOH+NaOHRCOONa+H,O
注1：洗涤剂的存在会严重影响本方法，依不同洗涤剂的类型和浓度不同，这种影响表现为从完全押制到激活。注2：酶会附着在塑料上，因此实验中用玻璃器具，避免使用塑料材质器具（移液枪头除外），A.2试剂
聚乙烯醇（PVA），聚合度1750士50不同来源或批号的PVA对实验结果有影响，结果报告应标明聚乙烯醇（PVA）厂家及生产批号。A.2.2
号）。
橄榄油（不同来源或批号的橄榄油对实验结果有影响，结果报告应标明橄榄油厂家及生产批95%乙醇。
磷酸二氢钾（KHPO,）。
十二水磷酸氢二钠(NaHPO12HO)
氢氧化钠。
盐酸。
酚酸。
恒温水浴：精度为士0.2℃。
高速匀浆机。
pH计：精度为0.01pH单位。
自动电位滴定仪。
自动移液器。
电磁加热搅拌器。
电磁搅拌器。
微量滴定管：10mL，分刻度<0.05ml分析天平：精度为0.0001g
2%PVA溶液
称取聚乙烯醇（PVA）10g（精确至0.lg）到500ml.烧杯中，加水400mL.放人合适的转子·在电磁加热搅拌器上边加热边搅拌，搅拌速度以能把所有的PVA搅拌起来为宜，在微沸状态下加热搅拌约1h，直至全部溶解，在搅拌状态下逐渐冷却至室温，定容到500mL，该溶液室温下有效期为2d，密封5
GB/T42239.2—2022
保存。
注：不能使用如冰块等快速冷却方式。A.4.2
橄榄油底物溶液
称取2%PVA溶液150g.加橄榄油50g用高速匀浆机在7000r/min（当乳化效果不好时可加大转速）下处理3min，即成乳白色PVA乳化液，放人转子，在电磁搅拌器上搅拌约20min，密封保存，该溶液室温下有效期为2d。若底物溶液在保存期内出现底部分层现象，应重新配制，若重新配制依然有底部分层现象或者在水浴中反应时有明显沉淀产生，更换其他来源的聚乙烯醇（PVA）。注：每次使用前需要搅择并在搅拌的状态下移取该溶液，每次使用完毕及时密封保存。A.4.3
盐酸溶液（1mol/L）
氢氧化钠溶液（0.5mol/L）
磷酸缓冲液（pH为7.5）
称取磷酸二氢钾（KHPO)19.6g：十二水磷酸氢二钠（NaHPO,·12HO)396.2g：加水约4.5L，搅拌至溶解均匀.用0.5mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调整pH至7.50士0.05.定容到5L。
氢氧化钠标准溶液（0.05mol/L)按QB/T2739配制与标定0.5mol/L的氢氧化钠标准溶液使用时，准确稀释10倍。A.4.7
酚献指示液（10g/L）
样品溶液的制备
称取约1g样品（称准至0.001g），用磷酸缓冲液溶解并稀释。样品称量定容后放人转子，在电磁搅拌器上搅拌15min
稀释时控制酶液浓度，推荐稀释倍数参考表A.1，例如，当样品酶活力约为100000U/g时称量约1g样品到100mL容量瓶中，再稀释200倍。样品与空白消耗碱量之差在1.4mL~1.6mL范围内.若最终滴定结果超出该范围，重新稀释直至该范围内。表A.1
待测酶活力
100:000
150000
试验步骤
脂肪酶样品稀释表
推荐稀释借数
按照表A.2所列程序分别进行空白和样品试验，选择自动电位滴定法或酚酥指示剂滴定法进行滴定。
100ml烧杯A（空白）
试验步骤
GB/T42239.2—2022
100mL烧杯B（样品）
烧杯中敏人转子.加人底物溶液4.00mL和磷酸缓冲液5.00mL，磁力搅拌加95%乙醇15.00ml..搅拌混匀
（40土0.2）水浴中预热5min
加样品1.00ml.混匀计时，搅拌混匀时间约15（40土0.2)℃水浴中准确反应15min取出直接取出
加25mL水，立即开始滴定
注：若使用酚酸指示剂滴定法，用100mL兰角瓶代替烧杯A.6.2
自动电位滴定法
直接进行水浴
加95%乙醇15.00ml混匀取出
对自动电位滴定仪进行仪器校正，用0.05mol/L的NaOH标准溶液即刻滴定，以突跃为滴定终点，最终溶液pH在30s内保持不变，记录消耗0.05mol/L的NaOH标准溶液的体积。A.6.2.2
酚酷指示剂滴定法
加酚酷指示剂两滴，用0.05mol/L的NaOH标准溶液即刻滴定，滴定至微红色并保持在30s内不退色为滴定终点，记录消耗0.05mol/L的NaOH标准溶液的体积。A.7
结果计算
产品的酶活力X以U/g表示，按公式（A.1）计算：(Vi-V)XeX50xn
式中：
产品的酶活力，单位为酶活力单位（U/g）：15
滴定样品时消耗0.05mol/L.氢氧化钠标准溶液的体积，单位为毫升（mL）：滴定空白时消耗0.05mol/L氢氧化钠标准溶液的体积，单位为毫升（mL）；氢氧化钠标准溶液浓度，单位为摩尔每升（mol/L）：氢氧化钠标准溶液浓度换算系数；试样的稀释倍数：
0.05mol/L氢氧化钠溶液1.00mL相当于脂肪酸50mmol；试样的质量，单位为克（g）：
反应时间15min，以1min计。
结果按修约值表示，当结果大于或等于10，后三位取整：当结果大于或等于10°且小于10，后两位取整：当结果大于或等于10°且小于10，后一位取整，A.8
精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%，以大于10%的情况不超过5%为前提GB/T42239.2—2022
B.1方法概要
附录B
（规范性）
粒度的测定
筛分法
用规定孔径的标准试验筛，经振筛机筛分，测定筛子及底盘中试样的质量，计算其占试样总质量的百分数。
B.2分析仪器
标准试验筛：符合GB/T6005和GB/T6003.1的规定。按产品标准的要求选取筛孔尺寸0.150mm（100目）的筛子，配以底盘和筛盖。2天平：精度为0.1g。
振筛机：采用拍击式电动振筛机，筛体的运动方式为平行往复式.筛体振幅为30mm士10mm·振B.2.3
动频率为278次/min士10次/min.拍击次数为150次/min士10次/min。试验步骤
把按要求选取的清洁、干燥的筛孔尺寸0.150mm（100目）筛子置于底盘之上，一起装在电动振筛机上，称取试样100.0g，置于上层筛中，加筛盖。开启电动振筛机，振筛5min士30s。停止振荡后取下底盘和筛子，收集筛子及底盘中的试样质量。B.4结果计算bzxZ.net
产品的粒度P以质量分数表示·按公式（B1）计算：P,=m
式中：
P，—产品的粒度：
底筛上留存样品质量，单位为克（g）：m
试样的质量，单位为克（g）。
........(Bl
以两次平行测定结果的算术平均值表示至小数点后一位作为测定结果。B.5准确度和精密度
试样过筛的总质量损失不得超过1%。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的1.5%.以大手1.5%的情况不超过5%为前提8
C.1方法概要
附录C
（规范性）
去污力的测定
GB/T42239.2—2022
在去污试验机内于规定的温度和洗涤时间下，用一定硬度的水配制成确定浓度的标准洗衣粉溶液，在加人脂肪酶样品的情况下，对脂肪酶敏感的污渍试片进行洗涤。首先需用白度计在选定波长下测定试片洗涤前后的白度值，以白度差评价标准洗衣粉与脂肪酶整体的去污力，再将其与标准洗衣粉的去污力做比较，判定该脂肪酶产品是否合格C.2试剂与材料
C.2.1氟化钙(CaCl)。
注：也可用一定水合数的氯化钙·但在具体使用时需根据CaC用量进行折算。C.2.2氯化镁（MgCl·6H.O)。
注：也可用无水或其他水合数的氧化镁，但在具体使用时需根据MgCI·6H0用量进行折算C.2.3污布：JB-04（胡萝素猪油污布，按附录D制备），可由标准归口单位委托相关单位统一制作提供。
注：每张污布四周边缘不均匀处，可裁去。C.2.4标准洗衣粉：GB/T13174规定的标准洗衣粉。C.3
仪器和设备
普通实验室仪器及设备和符合GB/T13174中规定的立式去污机、白度计、漂洗器等。C.4试验步骤
C.4.1硬水配制
洗涤试验中配制洗涤剂溶液采用250mg/kg（以CaCO，表示，下同）硬水，Ca+与Mg+摩尔比为6：4.配制方法如下：称取16.70g氟化钙和20.37g氯化镁配制10.0L，即为2500mg/kg硬水。使用时取1.0L冲至10.0L即为250mg/kg硬水。配制用水建议用蒸馏水或去离子水或纯度相当的水。C.4.2
白度测量
JB-04试片每组应有6片，同时做好编号记录，每组试片用于一个样品的性能试验。洗前，将试片相叠，用白度计在457nm下逐一读取洗涤前的自度值。洗前百度以正面取两个点（两个点应中心对称），测量白度值，以两次测量的平均值为该试片的洗前白度F：洗后白度则以洗后试片正面取两个点（两个点应中心对称），测量白度值，以两次测量的平均值为该试片的洗后白度F注：由于胡要下素索对光较缴感，需将洗后试片在无光阴凉处平铺晾干，洗后21h统一测量白度值C.4.3去污洗涤
测试含脂肪酶洗涤剂去污力，每组试片为6片。洗涤试验在立式去污机（C.3）内进行，测定前先将搅拌叶轮、工作槽、去污浴缸一一编号固定组成一个*工作单元”，并预热仪器至（30士1）℃下稳定一段时间。试验时用250mg/kg硬水（事先预热至约30℃时使用）将标准洗衣粉（C.2.4）配制成0.2%的溶液每1L例人对应的去污浴缸内，然后浴缸放人所9
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