GB/T 37628-2019
基本信息
标准号： GB/T 37628-2019
中文名称：化妆品中黄芪甲苷、芍药苷、连翘苷和连翘酯苷A的测定高效液相色谱法
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
GB/T 37628-2019.Determination of astragaloside , paeoniflorin , forsythin and forsythoside A in cosmetics- High performance liquid chromatography.
GB/T 37628规定了化妆品中黄芪甲苷、芍药苷、连翘苷和连翘酯苷A含量的高效液相色谱的定性定量检测方法的原理、设备和材料、分析步骤、结果计算、回收率和精密度、允许差等内容。
GB/T 37628适用于水剂、乳液,膏霜中黄芪甲苷、芍药苷、连翘苷和连翘酯苷A含量的测定。
GB/T 37628方法对于黄民甲苷的检出限为15 mg/kg,定量限为45 mg/ kg;芍药背的检出限为3 mg/ kg.定量限为8mg/kg;连翘苷和连翘酯苷A的检出限为20mg/kg.定量限为60mg/kg.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3黄芪甲苷
3.1 原理
黄芪甲苷用热水溶解后经水饱和的正丁醇提取,氨试液洗涤,C18固相萃取柱净化,高效液相色谱仪分离,燕发光散射检测器测定,外标法定量。
3.2试剂和材料
除另有规定外,所用试剂均为色谱纯,水为GB/T 6682规定的- - .级水。
3.2.1甲醇。
3.2.2 20% 甲醇溶液:量取甲醇(3.2.1)20 ml与80 mL水混合。
3.2.3正丁醇:分析纯。
3.2.4乙腈 。
3.2.5氨水 。
3.2.6氨试液 :取氨水(3.2.5)400 mL,用去离子水定容至1 L。
3.2.7黄 芪甲苷标准物质:纯度不小于96%。黄芪甲苷的中英文名称.CAS号、分子式、相对分子质量:和结构式参见附录A中表A.1。
3.2.8黄芪甲 苷标准工作溶液:准确称取100 mg黄芪甲苷标准物质(3.2.7)(精确到0.1 mg)置于100 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,配制成浓度为1 000 mg/L的黄芪甲苷标准储备溶液,于4 C避光保存,有效期2个月。分别精确移取黄芪甲苷标准储备溶液2 mL.3 mL.4 mL.5 mL.10 mL.50 mL.于100 ml棕色容量瓶后,用甲醇定容至刻度,配制质量浓度分别为20 mg/L.30 mg/L. 40 mg/L.50 mg/L、100 mg/L.500 mg/L的黄芪甲苷标准工作溶液,于4 C避光保存,可使用一周。
GB/T 37628规定了化妆品中黄芪甲苷、芍药苷、连翘苷和连翘酯苷A含量的高效液相色谱的定性定量检测方法的原理、设备和材料、分析步骤、结果计算、回收率和精密度、允许差等内容。
GB/T 37628适用于水剂、乳液,膏霜中黄芪甲苷、芍药苷、连翘苷和连翘酯苷A含量的测定。
GB/T 37628方法对于黄民甲苷的检出限为15 mg/kg,定量限为45 mg/ kg;芍药背的检出限为3 mg/ kg.定量限为8mg/kg;连翘苷和连翘酯苷A的检出限为20mg/kg.定量限为60mg/kg.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3黄芪甲苷
3.1 原理
黄芪甲苷用热水溶解后经水饱和的正丁醇提取,氨试液洗涤,C18固相萃取柱净化,高效液相色谱仪分离,燕发光散射检测器测定,外标法定量。
3.2试剂和材料
除另有规定外,所用试剂均为色谱纯,水为GB/T 6682规定的- - .级水。
3.2.1甲醇。
3.2.2 20% 甲醇溶液:量取甲醇(3.2.1)20 ml与80 mL水混合。
3.2.3正丁醇:分析纯。
3.2.4乙腈 。
3.2.5氨水 。
3.2.6氨试液 :取氨水(3.2.5)400 mL,用去离子水定容至1 L。
3.2.7黄 芪甲苷标准物质:纯度不小于96%。黄芪甲苷的中英文名称.CAS号、分子式、相对分子质量:和结构式参见附录A中表A.1。
3.2.8黄芪甲 苷标准工作溶液:准确称取100 mg黄芪甲苷标准物质(3.2.7)(精确到0.1 mg)置于100 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,配制成浓度为1 000 mg/L的黄芪甲苷标准储备溶液,于4 C避光保存,有效期2个月。分别精确移取黄芪甲苷标准储备溶液2 mL.3 mL.4 mL.5 mL.10 mL.50 mL.于100 ml棕色容量瓶后,用甲醇定容至刻度,配制质量浓度分别为20 mg/L.30 mg/L. 40 mg/L.50 mg/L、100 mg/L.500 mg/L的黄芪甲苷标准工作溶液,于4 C避光保存,可使用一周。
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标准内容
ICS71.100.70
中华人民共和国国家标准
GB/T37628—2019
化妆品中黄芪甲、芍药蓉、莲翘苷和连翘酯苷A的测定高效液相色谱法Determination of astragaloside,paeoniflorin,forsythin and forsythoside A incosmetics-Highperformanceliquidchromatography2019-06-04发布
国家市场监督管理总局
中国国家标准化管理委员会
2020-01-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257)归口。GB/T37628—2019
本标准起草单位：河北省食品检验研究院（国家果类及农副加工产品质量监督检验中心）苏州世谱检测技术有限公司、上海市日用化学工业研究所。本标准主要起草人：张岩、李挥、曹梅荣、孙文毅、吴春敏、赵晓雅、刘亮、刘红冉、孟志娟、王娟、王岩、张春林、代丹。
1范围
化妆品中黄芪甲蓉、芍药蓉、莲翘蓉和连翘酯着A的测定高效液相色谱法GB/T37628—2019
本标准规定了化妆品中黄芪甲营节药营、连翘苷和连翘酯苷A含量的高效液相色谱的定性定量检测方法的原理、设备和材料、分析步骤、结果计算、回收率和精密度、允许差等内容本标准适用于水剂、乳液、膏霜中黄芪甲苷、为药、连翘苷和连翘酯苷A含量的测定。本标准方法对于黄芪甲苷的检出限为15mg/kg，定量限为45mg/kg；芍药苷的检出限为3mg/kg，定量限为8mg/kg；连翘苷和连翘酯苷A的检出限为20mg/kg，定量限为60mg/kg规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3黄芪甲苷
3.1原理
黄芪甲苷用热水溶解后经水饱和的正丁醇提取，氨试液洗涤，C固相萃取柱净化，高效液相色谱仪分离，蒸发光散射检测器测定，外标法定量。2试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.2.1甲醇。
3.2.220%甲醇溶液：量取甲醇（3.2.1)20mL与80mL水混合。3.2.3正丁醇：分析纯
3.2.4乙睛。
3.2.5氨水。
3.2.6氨试液：取氨水（3.2.5)400mL，用去离子水定容至1L。3.2.7黄芪甲昔标准物质：纯度不小于96%。黄芪甲昔的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见附录A中表A.1。
3.2.8黄芪甲苷标准工作溶液：准确称取100mg黄芪甲苷标准物质（3.2.7)（精确到0.1mg）置于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成浓度为1000mg/L的黄芪甲苷标准储备溶液，于4℃避光保存.有效期2个月。分别精确移取黄芪甲苷标准储备溶液2mL3mL、4mL、5mL、10mL、50mL于100mL棕色容量瓶后，用甲醇定容至刻度，配制质量浓度分别为20mg/L、30mg/L、40mg/L、50mg/L、100mg/L、500mg/L的黄芪甲苷标准工作溶液，于4C避光保存，可使用一周。3.2.9Cls固相萃取柱：200mg，3mL。1
GB/T37628-—2019
微孔滤膜：0.45um，有机相。
仪器和设备
高效液相色谱仪：配蒸发光散射检测器。3.3.2
分析天平：感量0.001g和0.0001g。3.3.3
高速冷冻离心机。
3.3.4具塞锥形瓶：250mL。
分析步骤
样品处理
3.4.1.1提取
称取2.5g样品（准确至0.001g）置于具塞锥形瓶（3.3.4）中，加入50mL热水（50℃土5℃）振摇使之最大化分散，分别以60mL、40mL、40mL、40mL用水饱和的正丁醇振摇4次，合并正丁醇液，用氨试液（3.2.6）洗涤3次（加人氨试液是为除去含酚羟基的成分和其他酸性干扰物质），每次40ml.弃去氨液，回收正丁醇至干（减压浓缩至干），残渣加水10mL复溶。3.4.1.2净化
C18固相萃取柱（3.2.9）依次用5mL甲醇（3.2.1）和5mL水预处理，取黄芪甲苷水复溶液过固相萃取柱，先用3mL去离子水洗涤，然后用20%甲醇溶液（3.2.2）5mL洗涤，弃去洗涤液。用甲醇（3.2.1）20mL洗脱，收集洗脱液，洗脱液挥干溶剂，用甲醇（3.2.1）定容至5ml，取1ml过微孔滤膜（3.2.10）待测。
3.4.2测定条件
高效液相色谱条件如下：
色谱柱：ODSCls（150mm×4.6mm，5μm）：或相当者：b)
流动相：乙睛（3.2.4）-水（32+68，体积比）；c
柱温：30℃；
流速：1mL/min；
进样量：20L：
蒸发光散射检测条件：漂移管温度：60℃，载气流量：1.8mL/min；放大系数：2。标准曲线的绘制
黄芪甲苷标准工作溶液（3.2.8）按照浓度由低到高顺序进行测定。以进样质量的常用对数值为横坐标，峰面积的常用对数值为纵坐标进行线性回归，得到标准曲线。3.4.4测定
按照3.4.2的测定条件对待测物进行测定，用外标法定量。待测液中黄芪甲苷的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样测定。根据保留时间定性，根据峰面积进行定量。黄芪甲替标准物质的液相色谱图参见附录B中图B.13.4.5空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行2
5结果计算
分析结果按式(1)计算：
式中：
化妆品中黄芪甲苷的含量，单位为毫克每于克（mg/kg）；C
测定成分黄芪甲苷质量浓度，单位为毫克每升（mg/L.)：样品定容体积，单位为毫升（ml）；样品取样量，单位为克（g）。
回收率和精密度
GB/T37628—2019
（1）
添加水平50mg/kg~500mg/kg范围时，黄芪甲昔的回收率在80.8%~98.2%之间，相对标准偏差小于10%。
3.7允许差
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。药药苷
4.1原理
芍药苷经甲醇超声提取，高效液相色谱仪分离，紫外检测器检测，外标法定量。4.2
试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水，4.2.1甲醇。
4.2.2乙睛。
4.2.30.1%磷酸水溶液：取1mlL磷酸（分析纯）于1L容量瓶中.用去离子水定容至刻度，过0.45um滤膜。
4.2.4苟药苷标准物质：纯度不小于96%。芍药苷的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见表A.1。
4.2.5苟药苷标准工作溶液：准确称取100mg苟药苷标准物质（4.2.4）（精确到0.1mg）置于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成浓度为1000mg/1的苟药苷标准储备溶液，于4℃避光保存，有效期2个月。分别精确移取标准储备溶液0.1mL.0.3mL1.2mL、3mL、6mL12mL于100mL棕色容量瓶后，用甲醇定容至刻度，配制成浓度分别为1mg/L3mg/L、12mg/L、30mg/L、60mg/L和120mg/L的芍药苷标准工作溶液，于4℃避光保存，可使用一周。4.2.6微孔滤膜：0.45μm，有机相。4.3
仪器和设备
4.3.1高效液相色谱仪：配紫外检测器（或等效检测器）。4.3.2分析天平：感量0.001g和0.0001g。4.3.3超声波清洗器。
4.3.4具塞离心管：50ml
GB/T37628—2019
分析步骤
样品处理
准确称取1.00g（准确至0.001g）化妆品样品（保湿水、保湿乳液和保湿霜）于50mL具塞离心管中（4.3.4），加入15mL甲醇（4.2.1）振荡、摇勾，在超声波清洗器（4.3.3）中超声提取30min，放置室温用甲醇定容25mL，摇匀，过0.45μm滤膜（4.2.6），待测。4.4.2
测定条件
高效液相色谱条件如下：
色谱柱：ODSCls，（150mm×4.6mm，5um）：或相当者。流动相：0.1%磷酸水溶液（4.2.3）-乙（4.2.2）（85+15，体积比），等度洗脱。流速：1.0mL/min。
检测波长：232nm。
进样量：10uL。
柱温：25℃。
标准曲线的绘制
药药苷标准工作溶液（4.2.5），按4.4.2的测定条件浓度由低到高进样测定，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。
4.4.4测定
按照4.4.2的测定条件对待测物进行测定，用外标法定量。待测液中芍药苷的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样测定。根据保留时间定性，根据峰面积进行定量。芍药苷标准物质的液相色谱图参见图B.2。4.4.5空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。4.5下载标准就来标准下载网
结果计算
分析结果按式（2)计算：
式中：
化妆品中芍药苷的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；测定成分药药苷质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；V
样品定容体积，单位为毫升（mL）；样品取样量，单位为克（g）。
回收率和精密度
·（2）
添加水平8mg/kg~50mg/kg范围时，芍药昔的回收率在87.3%~102.9%之间，相对标准偏差小于10%。
4.7允许差
GB/T37628—2019
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。连翘苷和连翘酯苷A
5.1原理
连翘苷和连翘酯苷A经甲醇超声提取，高效液相色谱仪分离，紫外检测器检测，外标法定量。5.2试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。5.2.1甲醇。
5.2.250%甲醇溶液：量取甲醇（5.2.1)50mL和50mL水，混合。5.2.31%乙酸溶液：量取乙酸1mL和99ml.水，混合。5.2.4连翘苷和连翘酯苷A标准物质：纯度不小于96%。连翘苷和连翘酯苷A的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见表A.1。5.2.5连翘苷和连翘酯苷A标准工作溶液：准确称取100mg连翘苷标准品（精确到0.1mg）.用50%甲醇（5.2.2）溶解并定容于100mL容量瓶中，制得浓度为1000mg/L的连翘标准储备溶液（于4℃避光保存，有效期2个月）。准确称取准确称取100mg连翘酯A标准品（精确到0.1mg），用50%甲醇（5.2.2）溶解并定容于100mL容量瓶中，制得浓度为1000mg/L的连翘酯A标准储备溶液（于4℃避光保存，有效期2个月）。分别精确移取连翘苷标准储备溶液和连翘酯苷A标准储备溶液0.2mL0.5mL、1mL、1.2mL、1.5mL2mL于100mL棕色容量瓶中，用50%甲醇（5.2.2）定容至刻度，制得浓度为2mg/L、5mg/L、10mg/L、12mg/L15mg/L和20mg/L标准工作溶液（于4℃避光保存，可使用一周）。
5.2.6微孔滤膜0.45μm，有机相。5.3
仪器和设备
5.3.1高效液相色谱仪：配紫外检测器（或等效检测器）。5.3.2分析天平：感量0.001g和0.0001g。5.3.3超声波清洗仪
5.3.4高速冷冻离心机
氮吹仪。
分析步骤
5.4.1样品处理
精确称取1.0g（准确至0.001g）试样于50mL容量瓶中，用50%甲醇（5.2.2）定容至刻度，超声波清洗仪（5.3.3）超声提取10min，取上清液10ml于10000r/min离心5min，取5mL上层清液氮吹至小于1mL，用甲醇（5.2.1）定容至1mL，过微孔滤膜（5.2.6）后待测5.4.2测定条件
高效液相色谱条件如下：
色谱柱：ODSC柱，250mm×4.6mm（内径），5μm；或相当者；a）
GB/T37628-—2019
流动相：甲醇（5.2.1）-1%乙酸溶液（5.2.3）（70十30，体积比），等度洗脱；c)
流速：1.0mL/min：
检测波长：280nm；
柱温：30℃；
进样量：20L
标准曲线的绘制
■连翘苷和连翘酯苷A标准工作溶液（5.2.5），按5.4.2的测定条件浓度由低到高进样测定，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。5.4.4测定
按照5.4.2的测定条件对待测物进行测定，用外标法定量。待测液中连翘苷和连翘酯昔A的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样测定。根据保留时间定性，根据峰面积进行定量。连翘苷和连翘酯苷A标准物质的液相色谱图参见图B.3。5.4.5空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行5.5
结果计算
分析结果按式(3)计算：
式中：
化妆品中连翘甘和连翘酯昔A的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C
测定成分连翘苷和连翘酯苷A质量浓度，单位为毫克每升（mg/L)：样品定容体积，单位为毫升（mL）；样品取样量，单位为克（g）。
回收率和精密度
（3）
添加水平100mg/kg~500mg/kg范围时，连翘苷的回收率在81.6%~103%之间.连翘酯苷A的回收率在87.7%~109.2%之间，相对标准偏差小于10%。5.7
充许差
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。附录A
（资料性附录）
GB/T376282019
黄芪甲苷、芍药昔、连翘苷和连翘酯昔A的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式黄芪甲昔、芍药昔、连翘昔和连翘酯苷A的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式见表A.1。
中文名称
黄芪甲苷
药药苷
连翘酯苷A
黄芪甲苷、药药苷、连翘苷和连翘酯苷A的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式
英文名称
astragaloside
paeoniflorin
forsythin
forsythasideA
CAS号
84687-43-4
分子式
CnHaOra
23180-57-6
487-41-2
79916-77-1
CaHaO1s
相对分子质量
结构式
GB/T37628-—2019
色谱B
（法效高色谱）
化妆品中、黄芪中、甲苷中甲昔药中A液相围范连酯的测定规料精化妆本标测的出质量中规构英名构B.1。品单妆本标测的出质量中规构英名构B.2。检验妆果检验工妆A本标测的出质量中规构英名构B.3。1000.00
料精化妆准称号式谱13.34min。6.00
化妆品中液相围范连酯的测定规16.00
0.000.501001.502.002.503.003.504.004.505.005,506.006.507.007.508.008.509.009.5010.0010.5011.0011.5012.0012.5013.0013.5014.0014.5015.00min
品单妆准称号式谱8.67min。
黄芪中液相围范连翘和酯的测定规0.08
按照准标峰时间则6.38min，按照的准A标峰时间则5.78min。计B.3
GB/T37628—2019
苟药苷和芍药原苷A设备果结理试剂材料仪器计13.00
14.0015.00
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中华人民共和国国家标准
GB/T37628—2019
化妆品中黄芪甲、芍药蓉、莲翘苷和连翘酯苷A的测定高效液相色谱法Determination of astragaloside,paeoniflorin,forsythin and forsythoside A incosmetics-Highperformanceliquidchromatography2019-06-04发布
国家市场监督管理总局
中国国家标准化管理委员会
2020-01-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257)归口。GB/T37628—2019
本标准起草单位：河北省食品检验研究院（国家果类及农副加工产品质量监督检验中心）苏州世谱检测技术有限公司、上海市日用化学工业研究所。本标准主要起草人：张岩、李挥、曹梅荣、孙文毅、吴春敏、赵晓雅、刘亮、刘红冉、孟志娟、王娟、王岩、张春林、代丹。
1范围
化妆品中黄芪甲蓉、芍药蓉、莲翘蓉和连翘酯着A的测定高效液相色谱法GB/T37628—2019
本标准规定了化妆品中黄芪甲营节药营、连翘苷和连翘酯苷A含量的高效液相色谱的定性定量检测方法的原理、设备和材料、分析步骤、结果计算、回收率和精密度、允许差等内容本标准适用于水剂、乳液、膏霜中黄芪甲苷、为药、连翘苷和连翘酯苷A含量的测定。本标准方法对于黄芪甲苷的检出限为15mg/kg，定量限为45mg/kg；芍药苷的检出限为3mg/kg，定量限为8mg/kg；连翘苷和连翘酯苷A的检出限为20mg/kg，定量限为60mg/kg规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3黄芪甲苷
3.1原理
黄芪甲苷用热水溶解后经水饱和的正丁醇提取，氨试液洗涤，C固相萃取柱净化，高效液相色谱仪分离，蒸发光散射检测器测定，外标法定量。2试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.2.1甲醇。
3.2.220%甲醇溶液：量取甲醇（3.2.1)20mL与80mL水混合。3.2.3正丁醇：分析纯
3.2.4乙睛。
3.2.5氨水。
3.2.6氨试液：取氨水（3.2.5)400mL，用去离子水定容至1L。3.2.7黄芪甲昔标准物质：纯度不小于96%。黄芪甲昔的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见附录A中表A.1。
3.2.8黄芪甲苷标准工作溶液：准确称取100mg黄芪甲苷标准物质（3.2.7)（精确到0.1mg）置于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成浓度为1000mg/L的黄芪甲苷标准储备溶液，于4℃避光保存.有效期2个月。分别精确移取黄芪甲苷标准储备溶液2mL3mL、4mL、5mL、10mL、50mL于100mL棕色容量瓶后，用甲醇定容至刻度，配制质量浓度分别为20mg/L、30mg/L、40mg/L、50mg/L、100mg/L、500mg/L的黄芪甲苷标准工作溶液，于4C避光保存，可使用一周。3.2.9Cls固相萃取柱：200mg，3mL。1
GB/T37628-—2019
微孔滤膜：0.45um，有机相。
仪器和设备
高效液相色谱仪：配蒸发光散射检测器。3.3.2
分析天平：感量0.001g和0.0001g。3.3.3
高速冷冻离心机。
3.3.4具塞锥形瓶：250mL。
分析步骤
样品处理
3.4.1.1提取
称取2.5g样品（准确至0.001g）置于具塞锥形瓶（3.3.4）中，加入50mL热水（50℃土5℃）振摇使之最大化分散，分别以60mL、40mL、40mL、40mL用水饱和的正丁醇振摇4次，合并正丁醇液，用氨试液（3.2.6）洗涤3次（加人氨试液是为除去含酚羟基的成分和其他酸性干扰物质），每次40ml.弃去氨液，回收正丁醇至干（减压浓缩至干），残渣加水10mL复溶。3.4.1.2净化
C18固相萃取柱（3.2.9）依次用5mL甲醇（3.2.1）和5mL水预处理，取黄芪甲苷水复溶液过固相萃取柱，先用3mL去离子水洗涤，然后用20%甲醇溶液（3.2.2）5mL洗涤，弃去洗涤液。用甲醇（3.2.1）20mL洗脱，收集洗脱液，洗脱液挥干溶剂，用甲醇（3.2.1）定容至5ml，取1ml过微孔滤膜（3.2.10）待测。
3.4.2测定条件
高效液相色谱条件如下：
色谱柱：ODSCls（150mm×4.6mm，5μm）：或相当者：b)
流动相：乙睛（3.2.4）-水（32+68，体积比）；c
柱温：30℃；
流速：1mL/min；
进样量：20L：
蒸发光散射检测条件：漂移管温度：60℃，载气流量：1.8mL/min；放大系数：2。标准曲线的绘制
黄芪甲苷标准工作溶液（3.2.8）按照浓度由低到高顺序进行测定。以进样质量的常用对数值为横坐标，峰面积的常用对数值为纵坐标进行线性回归，得到标准曲线。3.4.4测定
按照3.4.2的测定条件对待测物进行测定，用外标法定量。待测液中黄芪甲苷的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样测定。根据保留时间定性，根据峰面积进行定量。黄芪甲替标准物质的液相色谱图参见附录B中图B.13.4.5空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行2
5结果计算
分析结果按式(1)计算：
式中：
化妆品中黄芪甲苷的含量，单位为毫克每于克（mg/kg）；C
测定成分黄芪甲苷质量浓度，单位为毫克每升（mg/L.)：样品定容体积，单位为毫升（ml）；样品取样量，单位为克（g）。
回收率和精密度
GB/T37628—2019
（1）
添加水平50mg/kg~500mg/kg范围时，黄芪甲昔的回收率在80.8%~98.2%之间，相对标准偏差小于10%。
3.7允许差
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。药药苷
4.1原理
芍药苷经甲醇超声提取，高效液相色谱仪分离，紫外检测器检测，外标法定量。4.2
试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水，4.2.1甲醇。
4.2.2乙睛。
4.2.30.1%磷酸水溶液：取1mlL磷酸（分析纯）于1L容量瓶中.用去离子水定容至刻度，过0.45um滤膜。
4.2.4苟药苷标准物质：纯度不小于96%。芍药苷的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见表A.1。
4.2.5苟药苷标准工作溶液：准确称取100mg苟药苷标准物质（4.2.4）（精确到0.1mg）置于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成浓度为1000mg/1的苟药苷标准储备溶液，于4℃避光保存，有效期2个月。分别精确移取标准储备溶液0.1mL.0.3mL1.2mL、3mL、6mL12mL于100mL棕色容量瓶后，用甲醇定容至刻度，配制成浓度分别为1mg/L3mg/L、12mg/L、30mg/L、60mg/L和120mg/L的芍药苷标准工作溶液，于4℃避光保存，可使用一周。4.2.6微孔滤膜：0.45μm，有机相。4.3
仪器和设备
4.3.1高效液相色谱仪：配紫外检测器（或等效检测器）。4.3.2分析天平：感量0.001g和0.0001g。4.3.3超声波清洗器。
4.3.4具塞离心管：50ml
GB/T37628—2019
分析步骤
样品处理
准确称取1.00g（准确至0.001g）化妆品样品（保湿水、保湿乳液和保湿霜）于50mL具塞离心管中（4.3.4），加入15mL甲醇（4.2.1）振荡、摇勾，在超声波清洗器（4.3.3）中超声提取30min，放置室温用甲醇定容25mL，摇匀，过0.45μm滤膜（4.2.6），待测。4.4.2
测定条件
高效液相色谱条件如下：
色谱柱：ODSCls，（150mm×4.6mm，5um）：或相当者。流动相：0.1%磷酸水溶液（4.2.3）-乙（4.2.2）（85+15，体积比），等度洗脱。流速：1.0mL/min。
检测波长：232nm。
进样量：10uL。
柱温：25℃。
标准曲线的绘制
药药苷标准工作溶液（4.2.5），按4.4.2的测定条件浓度由低到高进样测定，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。
4.4.4测定
按照4.4.2的测定条件对待测物进行测定，用外标法定量。待测液中芍药苷的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样测定。根据保留时间定性，根据峰面积进行定量。芍药苷标准物质的液相色谱图参见图B.2。4.4.5空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。4.5下载标准就来标准下载网
结果计算
分析结果按式（2)计算：
式中：
化妆品中芍药苷的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；测定成分药药苷质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；V
样品定容体积，单位为毫升（mL）；样品取样量，单位为克（g）。
回收率和精密度
·（2）
添加水平8mg/kg~50mg/kg范围时，芍药昔的回收率在87.3%~102.9%之间，相对标准偏差小于10%。
4.7允许差
GB/T37628—2019
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。连翘苷和连翘酯苷A
5.1原理
连翘苷和连翘酯苷A经甲醇超声提取，高效液相色谱仪分离，紫外检测器检测，外标法定量。5.2试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。5.2.1甲醇。
5.2.250%甲醇溶液：量取甲醇（5.2.1)50mL和50mL水，混合。5.2.31%乙酸溶液：量取乙酸1mL和99ml.水，混合。5.2.4连翘苷和连翘酯苷A标准物质：纯度不小于96%。连翘苷和连翘酯苷A的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见表A.1。5.2.5连翘苷和连翘酯苷A标准工作溶液：准确称取100mg连翘苷标准品（精确到0.1mg）.用50%甲醇（5.2.2）溶解并定容于100mL容量瓶中，制得浓度为1000mg/L的连翘标准储备溶液（于4℃避光保存，有效期2个月）。准确称取准确称取100mg连翘酯A标准品（精确到0.1mg），用50%甲醇（5.2.2）溶解并定容于100mL容量瓶中，制得浓度为1000mg/L的连翘酯A标准储备溶液（于4℃避光保存，有效期2个月）。分别精确移取连翘苷标准储备溶液和连翘酯苷A标准储备溶液0.2mL0.5mL、1mL、1.2mL、1.5mL2mL于100mL棕色容量瓶中，用50%甲醇（5.2.2）定容至刻度，制得浓度为2mg/L、5mg/L、10mg/L、12mg/L15mg/L和20mg/L标准工作溶液（于4℃避光保存，可使用一周）。
5.2.6微孔滤膜0.45μm，有机相。5.3
仪器和设备
5.3.1高效液相色谱仪：配紫外检测器（或等效检测器）。5.3.2分析天平：感量0.001g和0.0001g。5.3.3超声波清洗仪
5.3.4高速冷冻离心机
氮吹仪。
分析步骤
5.4.1样品处理
精确称取1.0g（准确至0.001g）试样于50mL容量瓶中，用50%甲醇（5.2.2）定容至刻度，超声波清洗仪（5.3.3）超声提取10min，取上清液10ml于10000r/min离心5min，取5mL上层清液氮吹至小于1mL，用甲醇（5.2.1）定容至1mL，过微孔滤膜（5.2.6）后待测5.4.2测定条件
高效液相色谱条件如下：
色谱柱：ODSC柱，250mm×4.6mm（内径），5μm；或相当者；a）
GB/T37628-—2019
流动相：甲醇（5.2.1）-1%乙酸溶液（5.2.3）（70十30，体积比），等度洗脱；c)
流速：1.0mL/min：
检测波长：280nm；
柱温：30℃；
进样量：20L
标准曲线的绘制
■连翘苷和连翘酯苷A标准工作溶液（5.2.5），按5.4.2的测定条件浓度由低到高进样测定，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。5.4.4测定
按照5.4.2的测定条件对待测物进行测定，用外标法定量。待测液中连翘苷和连翘酯昔A的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样测定。根据保留时间定性，根据峰面积进行定量。连翘苷和连翘酯苷A标准物质的液相色谱图参见图B.3。5.4.5空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行5.5
结果计算
分析结果按式(3)计算：
式中：
化妆品中连翘甘和连翘酯昔A的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C
测定成分连翘苷和连翘酯苷A质量浓度，单位为毫克每升（mg/L)：样品定容体积，单位为毫升（mL）；样品取样量，单位为克（g）。
回收率和精密度
（3）
添加水平100mg/kg~500mg/kg范围时，连翘苷的回收率在81.6%~103%之间.连翘酯苷A的回收率在87.7%~109.2%之间，相对标准偏差小于10%。5.7
充许差
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。附录A
（资料性附录）
GB/T376282019
黄芪甲苷、芍药昔、连翘苷和连翘酯昔A的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式黄芪甲昔、芍药昔、连翘昔和连翘酯苷A的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式见表A.1。
中文名称
黄芪甲苷
药药苷
连翘酯苷A
黄芪甲苷、药药苷、连翘苷和连翘酯苷A的中英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式
英文名称
astragaloside
paeoniflorin
forsythin
forsythasideA
CAS号
84687-43-4
分子式
CnHaOra
23180-57-6
487-41-2
79916-77-1
CaHaO1s
相对分子质量
结构式
GB/T37628-—2019
色谱B
（法效高色谱）
化妆品中、黄芪中、甲苷中甲昔药中A液相围范连酯的测定规料精化妆本标测的出质量中规构英名构B.1。品单妆本标测的出质量中规构英名构B.2。检验妆果检验工妆A本标测的出质量中规构英名构B.3。1000.00
料精化妆准称号式谱13.34min。6.00
化妆品中液相围范连酯的测定规16.00
0.000.501001.502.002.503.003.504.004.505.005,506.006.507.007.508.008.509.009.5010.0010.5011.0011.5012.0012.5013.0013.5014.0014.5015.00min
品单妆准称号式谱8.67min。
黄芪中液相围范连翘和酯的测定规0.08
按照准标峰时间则6.38min，按照的准A标峰时间则5.78min。计B.3
GB/T37628—2019
苟药苷和芍药原苷A设备果结理试剂材料仪器计13.00
14.0015.00
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