本标准适用于以甜叶菊叶为原料，经提取、精制而得的食品添加剂甜菊糖苷。已知糖苷包括甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷E、瑞鲍迪苷F、瑞鲍迪苷M、瑞鲍迪苷N、瑞鲍迪苷O、杜克苷A、甜茶苷及甜菊双糖苷。
本标准代替GB 8270-2014《食品安全国家标准 食品添加剂 甜菊糖苷》。
本标准与GB 8270-2014相比，主要变化如下：
——修改了标准范围；
——修改了分子式、结构式和相对分子质量等相关内容；
——修改了甜菊糖苷含量（以干基计）的指标要求和检验方法；
——修改了“灼烧残渣”指标名称为“灰分”；
——修改了“总砷（以As计）”指标名称为“砷（As）”；
——增加了铅（Pb）、砷（As）的检验方法；
——将鉴别试验中pH的要求放入理化指标。

中华人民共和国国家标准
GB1886.355—2022
食品安全国家标准
食品添加剂
2022-06-30 发布
甜菊糖苷
2022-12-30 实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局免费标准bzxz.net
本标准代替GB8270一2014《食品安全国家标准本标准与GB8270—一2014相比，主要变化如下：一修改了标准范围；
食品添加剂
一修改了分子式、结构式和相对分子质量等相关内容一修改了甜菊糖苷含量（以干基计）的指标要求和检验方法；一修改了“灼烧残渣”指标名称为“灰分”Ao
一修改了“总砷（以AS计）”指标名称为“砷（As）；一增加了铅（Pb)、砷(AS）的检验方法一将鉴别试验中pH的要求放入理化指标。甜菊糖苷》。
GB1886.355—2022
1范围
食品安全国家标准
食品添加剂甜菊糖苷
GB 1886.355—2022
本标准适用于以甜叶菊（ ste℃iaRebaudianaBertoni)叶为原料，经提取、精制而得的食品添加剂甜菊糖苷。已知糖苷包括甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷E、瑞鲍迪苷F、瑞鲍迪苷M、瑞鲍迪苷N、瑞鲍迪苷O、杜克苷A、甜茶苷及甜菊双糖苷。2分子式、结构式和相对分子质量2.113种糖苷的分子式
甜菌苷：C38H60018
瑞鲍迪苷A:C44H70023
瑞迪苷B:C38H60O18
瑞鲍迪苷C:C44H70O22
瑞迪苷D:C50H80O28
瑞包迪苷E:C44H70O23
瑞鲍迪苷F:C43H68O22
瑞包迪苷M:C56H90O33
瑞迪苷N:C56H90O32
瑞迪苷O:C62H100037
杜克苷AC38H60O17
甜茶苷：C32H50O13
甜菊双糖苷：C32H50O13
213种糖苷的结构式
CH3COO-R
13 种糖苷的化合物名称、R1 位取代基和 R2 位取代基见表 1。 甜菊醇(R1 =R2 =H)为甜菊糖苷配基。
甜菊苷
瑞鲍迪苷A
瑞鲍迪苷B
瑞鲍迪苷C
瑞鲍迪苷D
瑞鲍迪苷E
瑞鲍迪昔F
瑞鲍迪苷M
瑞鲍迪苷N
瑞鲍迪苷
杜克苷A
甜茶苷
甜菊双糖苷
表113种糖苷的化合物名称、R1位取代基和R2位取代基化合物名称
Stevioside
Rebaudioside A
RebaudiosideB
Rebaudioside C
Rebaudioside D
Rebaudioside E
Rebaudioside F
RebaudiosideM
Rebaudioside N
Rebaudioside O
Dulcoside A
Rubusoside
Steviolbioside
R1位取代基
β-Glc
β-Glc
β-Glc-β-Glc(2→ 1)
B-Glc-B-Glc(2→ 1)
β-Glc
β-Glc-β-Glc(2 → 1)
-Gle(3 → 1)
β-Glc-α-Rha(2 → 1)
-Gle(3 → 1)
β-Glc-β-Glc(3 → 1)-α-Rha(2 → 1)-Gle(3 → 1)
注: Glc、Rha Xy分别代表葡萄糖、鼠李糖、木糖。2.313种糖苷的相对分子质量
甜菊苷：804.87（按2018年国际相对原子质量）瑞鲍迪苷A:967.01（按2018年国际相对原子质量）瑞鲍迪苷B:804.87（按2018年国际相对原子质量）瑞鲍迪苷C:951.01（按2018年国际相对原子质量）瑞鲍迪苷D：1129.15（按2018年国际相对原子质量）瑞鲍迪苷E:967.01（按2018年国际相对原子质量）GB1886.355—2022
R2位取代基
B-Glc-B-Glc(2→ 1)
β-Glc-β-Glc(2 → 1)
μ-Gle(3 → 1)
β-Glc-β-Glc(2 → 1)
-Gle(3 →+ 1)
B-Glc-α-Rha(2 → 1)
-Gle(3 →+ 1)
B-Glc-B-Glc(2 → 1)
(Gle(3 → 1)
B-Glc-B-Glc(2→ 1)
β-Glc-β-Xy(2 → 1)
-Gle(3 → 1)
β-Glc-β-Glc(2 → 1)
-Gte(3 - 1)
β-Glc-β-Glc(2 → 1)
μ-Gle(3 →+ 1)
B-Glc-β-Glc(2 → 1)
IGle(3 → 1)
B-Glc-α-Rha(2- 1)
B-Glc-B-Glc(2- 1)
瑞鲍迪苷F:936.99（按2018年国际相对原子质量）瑞鲍迪昔M：1291.29（按2018年国际相对原子质量）瑞鲍迪苷N：1275.29（按2018年国际相对原子质量）瑞鲍迪苷0：1437.44（按2018年国际相对原子质量）杜克苷A:788.87（按2018年国际相对原子质量）甜茶苷：642.73（按2018年国际相对原子质量）甜菊双糖苷：642.73（按2018年国际相对原子质量）技术要求
感官要求
感官要求应符合表2的规定。
理化指标
白色至浅黄色
粉末、晶体、颗粒或片状
理化指标应符合表3的规定。
甜菊糖苷含量（以干基计）a，o/%灰分，80/%
干燥减量，80/%
铅(Pb)/(ma/ka)
碘 (As)/(ma/ka)
用醇/(ma/ka)
Z酶/(ma/ka)
感官要求
理化指标
GB1886.355—2022
检验方法
取适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下观察其色泽和状态
检验方法
附录A中A.3
GB5009 4
GB5009.3直接干燥法b
附录A中A.4
GB5009.75或GB5009.12
GB 5009.76或GB 5009.11
附录A中A.5
注：商品化的甜菊糖苷产品应以符合本标准的甜菊糖苷为原料，可添加用于标准化目的的淀粉等食品原料。a商品化的甜菊糖苷产品应符合标识值。b 干燥温度和时间分别为 105 ℃±2 ℃和 2 h。m
A.1一般规定
附录A
检验方法
GB1886.355—2022
本标准所用试剂和水在未注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品在未注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2鉴别试验
A.2.1甜菊糖苷色谱试验
在甜菊糖苷含量试验中，试样溶液色谱图中13种糖苷的色谱峰应与混合标准品溶液相对应甜菊糖苷含量（以干基计）的测定A.3
试剂和材料
乙睛：色谱纯。
A.3.1.2磷酸二氢钠：色谱纯。
磷酸：色谱纯。
A.3.1.4水：GB/T6682规定的—级水。A.3.1.5乙睛水溶液：乙睛和水的体积比为30：70。A3.1.6 磷酸钠缓冲液(pH 26):称取 120 g磷酸二氢钠(NaH:PO:),溶于 800 mL水中 ,用磷酸调节pH 至 2.6。
A.3.1.7瑞鲍迪苷A标准品：瑞鲍迪苷A含量（质量分数，以干基计）≥99.0%。A.3.1.8瑞鲍迪苷D标准品：瑞鲍迪苷D含量（质量分数，以干基计）≥95.0%。A.3.1.9其他11种糖苷标准品：甜菊苷、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷E、瑞鲍迪苷F、瑞鲍迪苷M、瑞鲍迪苷N、瑞鲍迪苷O、杜克苷A、甜茶苷和甜菊双糖苷，或使用13种糖苷混合标准品。A.3.2仪器和设备
高效液相色谱仪：配备紫外检测器，或其他等效的检测器。A.3.3参考色谱条件
A3.3.1 色谱柱:G8 反相色谱柱,250 mmx46 mm粒径,5,jm或其他等效的色谱柱。A.3.3.2流动相梯度洗脱条件（比例可根据实际情况调节）：见表A.14
时间/min
流动相梯度洗脱条件（比例可根据实际情况调节）表A.1
磷酸钠缓冲液/%
流动相流速 : 0.8 mL/min。
检测波长=210mm
进样量32,L~10μL。
A3.3.6桂温:40℃
A.3.4分析步骤
混合标准品溶液的制备
GB1886.355—2022
乙腈/%
分别称取适量瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪D、甜菊苷、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷E、瑞鲍迪苷F，瑞鲍迪苷M、瑞鲍迪苷N、瑞鲍迪苷O、杜克苷A、甜茶苷和甜菊双糖苷标准品（或13种糖苷混合标准品），置于同一个容量瓶中，用乙睛水溶液完全溶解后定容，得到混合标准品溶液。混合标准品溶液用于确定13种糖苷的相对保留时间。A.3.4.2标准溶液的制备
50.mg.100mg、200 mg.250 mg的瑞鲍迪A标准品积2.5mg.50mg/100mg分别称取5
12.5°mg°的瑞鲍迪D标准品，精确室.1mg,汾剃置手25mL的蓉量瓶中，用艺腈永溶液溶解后稀释1 分测得到浓度为200,mg/400mg/L、800mglL、1000 mg/L 瑞鲍迪苷 A 标准溶液和全刻度
100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L*500 mg/L的瑞鲍迪苷”D标准溶液。A.3.4.3试样溶液的制备
称取25.0mg±5.0mg试样（干基），精确至0.1mg,置于50mL的容量瓶中，用乙水溶液溶解后稀释至刻度，得到试样溶液。
A.3.5测定
标准曲线的绘制
在,A33参考色谱条件下,分别对 200 mgL。400mg/L. 800 mg/L,1000 mg/l的端购迪其A标准溶液和100mg/、200mg/L、400mg/L、500mg/L~的瑞鲍迪苷~b标准溶液进行色谱分析，记录各浓度标准溶液对应的峰面积值。以标准溶液色谱图中瑞鲍迪苷A或瑞鲍迪苷D的峰面积值为Y轴，以对应溶液浓度(mg/L)为X轴，绘制标准曲线，分别得到瑞鲍迪苷A标准曲线和瑞鲍迪苷D标准曲线（强制过原点），从标准曲线上分别获得瑞鲍迪苷A线性函数斜率（Ka）和瑞鲍迪苷D线性函数斜率（Kd）。5
A.3.5.2含量测定
GB1886.355—2022
在A.3.3参考色谱条件下，分别对混合标准品溶液和试样溶液进行色谱分析。将试样溶液的色谱图与混合标准品溶液的色谱图（见附录B）相比较，以确定试样溶液色谱图中各组分对应的峰。记录试样溶液色谱图中瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷D、甜菊苷、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷E、瑞鲍迪苷F、瑞鲍迪苷M、瑞鲍迪苷N、瑞鲍迪苷O、杜克苷A、甜茶苷和甜菊双糖苷的峰面积。A.3.6结果计算
8种糖昔含量（以干基计）的质量分数8o按式（A.1）计算。J.×A. ×100%
武中：
（A.1）
i-S、a、b、C、f、da、ru、sb,分别对应甜菊苷、瑞鲍迪苷 A、瑞鲍迪苷 B、瑞鲍迪苷 C、瑞鲍迪苷 F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷；fi
组分与瑞鲍迪苷A的式量比值：1.00（瑞鲍迪苷A）、0.83（甜菊苷）、0.83（瑞鲍迪苷B）、0.98（瑞包迪苷C）、0.97（瑞迪苷F）、0.82（杜克苷A）、0.66（甜茶苷）、0.66（甜菊双糖苷）；A试样溶液色谱图中／组分的峰面积值Ka一A.3.5.1中瑞鲍迪苷A线性函数斜率；C—试样溶液的浓度，单位为毫克每升（mg / L）。5种糖苷含量（以干基计）的质量分数o胺式（A.2）计算。J:×A:×100%
....A.2)
i一d、e、m、n、O,分别对应瑞鲍迪苷 D、瑞鲍迪苷 E、瑞鲍迪苷 M、瑞鲍迪苷 N、瑞鲍迪苷 O;fi
组分与瑞鲍迪苷D的式量比值：1.00（瑞鲍迪苷D）、0.86（瑞鲍迪苷E）、1.14（瑞鲍迪苷M）、1.13（瑞包迪昔N）、1.27（瑞包迪昔O）：A/试样溶液色谱图中／组分的峰面积值；Kd一A.3.5.1中瑞鲍迪苷D线性函数斜率C—试样溶液的浓度，单位为毫克每升（mg / L)。由式（A 1）和式（A. 2）计算得到 13 种组分的含量os、ca、ob、cc、oaf、coda、aqru、oosb、ood、cce、cgm、n和800，取各组分含量之和即为试样中甜菊糖苷含量。A.4 PH的测定
A.4.1仪器和设备
酸度计。
A.4.2试剂和材料
称取 1 9试样，溶于 100 mL 除去二氧化碳的水中，用酸度计测定试样溶液的 pH。A.5甲醇和乙醇的测定
A.5.1试剂和材料
甲醇：色谱纯。
A.5.1.2乙醇：色谱纯。
A.5.1.3水：GB/T6682规定的—级水。A.5.2仪器和设备
气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器（FID)和顶空进样器。A.5.3
参考色谱条件
GB1886.355—2022
色谱柱：键合聚乙二醇熔融石英毛细管柱（柱长为30m,柱内径为0.25mm,膜厚度为0.25μm），或其他等效的色谱柱。
载气 氮气(纯度≥99.99%)。
载气流量5.0mL/min。
柱温:40℃保持 5 min,以 10 ℃/min 升温至 120 ℃ 保持 2 min,最后以 16℃/min 升温至5 min
进样口温度：）
检测器温度：
进样体积:1 mL。
3分流比:5
参考顶空条件
A5.4. 1 顶空瓶温度 : 80 ℃。A.5.4.2
：顶空瓶平衡时间 : 30 min
A.5.5分析步骤
空白溶液的制备
移取2mL水，置于顶空瓶中，迅速压紧瓶盖，备用。A.5.5.2标准溶液的制备
A.5.5.2.1
甲醇标准溶液的制备
称取0.1g甲醇，精确至0.001g,用水稀释后转移至一个1000mL的容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得100mg/L的甲醇标准储备溶液。将该溶液配制成一系列浓度为2.5mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L和50mg/L的甲醇标准溶液。移取上述系列浓度溶液各2mL,分别置于顶空瓶中，迅速压紧瓶盖，备用。
A.5.5.2.2乙醇标准溶液的制备
称取0.1g乙醇，精确至0.001g,用水稀释后转移至一个100mL的容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得1000mg/L的乙醇标准储备溶液。将该溶液配制成一系列浓度为50mg/L、100mg/L、200mg/L、500mg/L和750mg/L的乙醇标准溶液。移取上述系列浓度溶液各2mL,分别置于顶空瓶中，迅速压紧瓶盖，备用。
A.5.5.3试样溶液的制备
称取1.0g试样，精确至0.001g.用水溶解后转移至一个10mL的容量瓶中，在室温下超声处理约3min,加水稀释至刻度，摇匀。移取该溶液2mL置于顶空瓶中，迅速压紧瓶盖，备用。7
A.5.6测定
GB1886.355—2022
在参考操作条件A.5.3和A.5.4下，分别对空白溶液、标准系列溶液和试样溶液进行测定，记录甲醇或乙醇的峰面积值。以标准系列溶液色谱图中甲醇或乙醇的峰面积值为Y轴，以对应溶剂浓度(mg/L)为X轴，绘制标准曲线，得到甲醇标准曲线或乙醇标准曲线。根据试样溶液色谱图中甲醇或乙醇的峰面积值，从标准曲线求得试样溶液中甲醇或乙醇的浓度(mg/L)。A.5.7结果计算
试样中甲醇或乙醇的含量o,单位为毫克每干克(mg/kg),按式(A.3)计算。CXV
（A3）
式中：
—从标准曲线求得的试样溶液中甲醇或乙醇的浓度，单位为毫克每升(mg/L）；试样溶液的体积，单位为毫升(mL);m一试样的质量，单位为克(g)。8
附录B
混合标准品溶液的参考色谱图
混合标准品溶液的参考色谱图见图B.1。AU0.150
说明：
一瑞鲍迪苷E；
一瑞鲍迪苷○；
一瑞鲍迪苷D；
一瑞鲍迪苷N；
一瑞鲍迪苷M；
一瑞鲍迪苷A；
一甜菊苷；
一瑞鲍迪苷F；
一瑞鲍迪苷C；
10一杜克苷A；
11－甜茶苷；
12一瑞鲍迪苷B；
13一甜菊双糖苷。
混合标准品溶液参考色谱示意图GB1886.355—2022
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33.6036.40
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