本标准给出了青鱼(Mylopharyngodon piceus)的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗传学特性，以及检测方法。本标准适用于青鱼的种质鉴定。 GB 17716-1999 青鱼 GB17716-1999 标准下载解压密码：www.bzxz.net

GB17716—1999
为了鉴定青鱼，保护和保存青鱼原种优良的性状及种质，避免苗种生产过程中种质混杂和退化，开展青鱼种质的有效监测，特制定本标准。本标准主要是“八五”科技攻关成果，并吸取了“六五”“七五”科技攻关及前人的有关成果本标准的附录A和附录B是标准的附录。本标准的附录C是提示的附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位：上海水产大学、中国水产科学研究院长江水产研究所。本标准主要起草人；李思发、赵金良、蔡完其、周碧云、吕国庆、范兆廷、徐忠法。本标准从1999年7月1日起实施。83
1范围
中华人民共和国国家标准
Black carp
GB17716—1999
本标准给出了青鱼（Mylopharyngodonpiceus）的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗传学特性，以及检测方法。
本标准适用于青鱼的种质鉴定。名称与分类
2.1学名
青鱼（Mylopharyngodonpiceus）。2.2分类位置
属鲤形目（Cypriniformes），鲤科（Cyprinidae），雅罗鱼亚科（Leuciscinae），青鱼属（Mylophuryngodom)。
3主要形态构造特征
3.1外部形态特征
3.1.1外形
体延长，呈梭形。腹圆，无腹棱。口端位，上颌呈弧形。吻尖.眼中侧位。体被较大的圆鳞，侧线完全。鳃耙稀而短小。尾鳍深叉，上下叶等长。体青黑色，背部深黑，腹部灰白色，各鳍均为灰黑色。青鱼的外部形态见图1。
图1青鱼外形
国家质量技术监督局1999-04-05批准84
1999-07-01实施
3.1.2可数性状
3.1.2.1背鳍鳍式：D3.7。
3.1.2.2臀鳍鳍式：A3.7~9。
3.1.2.3侧线鳞鳞式：40
3.1.2.4第--鳃弓外侧鳃粑数：15～21。3.1.3可量性状
GB 17716—1999
对于体长17.2～53.4cm，体重110.0～2250.0g的个体，实测性状比例值见表1。表1实测可量性状比例值
全长/体长
体长/体高
体长/头长
头长/吻长
头长/眼径
头长/眼间距
1.159±0.0321.050±0.3504.318±0.2953.318±0.5806.619±0.7982.290±0.3963.2内部构造特征
室，后室比较细长。
3.2.2下咽齿
1行，日齿状，齿式4/5。
3.2.3脊椎骨
脊椎骨总数：39~~42。
3.2.4腹膜
黑色。
4生长与繁殖
4.1生长
体长/尾柄长
7.657±0.624
尾柄长/尾柄高
1.059±0.100
不同年龄组的鱼体长、体重的实测值见表2。与表2对应的不同年龄组的鱼体长、体重平均退算值、生长方程、体长体重关系式见附录C（提示的附录）。表2不同年龄组鱼的体长、体重实测值年龄
实测体长
实测体重
实测体长
实测体重
3100～
1）年龄主要依据鳞片上的年龄数鉴定。4.2繁殖
4.2.1性戒熟年龄：雌鱼5~7龄，雄鱼4~～6龄。性成熟个体性腺每年成熟一次，一次产卵。4. 2. 2
3怀卵量：不同年龄组个体怀卵量见表3。5+
11 100～
12900~
15900~
15900~
22900~
17 400~
20 250~
20250~
年龄，龄
体重g
绝对怀卵量,粒
相对怀卵量，粒/g
遗传学特性
5.1细胞遗传学特性
5.1.1染色体数
体细胞染色体2倍数，2n一48
5.1.2核型
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不同年龄组个体怀卵量，
中部着丝粒染色体（m组）14对；亚中部着丝粒染色体（sm组）4对；亚端部着丝粒染色体（st组）6对，染色体臂数（NF)84（见图2）。x X xX Xx xx r
XA ax n K xu x
其场 其北x
x xxnAx 1nr
图2青鱼染色体组型
5.2生化遗传学特性
5.2.1肌肉中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶5.2.1.1肌肉中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶酶谱见图 3。2肌肉中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶酶带扫描图见图4。5. 2. 1. 2
LDH4LDHs
3青鱼肌肉 LDH同工酶电泳酶谱
图4青鱼肌肉ILDH同工酶酶带扫描图5. 2. 1. 3
肌肉中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶酶带的活性强度见表4。表4青鱼肌肉LDH同工酶酶带活性强度酶带
活性强度
群体变异范围：长江中、下游青鱼群体的多态座位比例为5.9%~～11.8%，平均杂合度为0. 001 0~0. 035 0。
6检测方法
6.1年龄的鉴定
6.1.1鳞片选取部位
GB 17716—1999
体侧背鳍基部下方与侧线鳞上方之间。6.1.2操作步骤
a）取下背侧鳞片，保存在鳞片袋中；b）将保存在鳞片袋中的鳞片取出，放在培养血中，清洗于净；c）将清洗好的鳞片按在鱼体的位置夹在两块玻片之间，贴上标签，两端用透明胶带封好；d）在显微镜或投影仪下观察鳞片的年轮，确定鱼的年龄。注：再生鳞不得用作年龄鉴定。6.1.3取胸鳍第一根鳍条基部磨片（厚度为0.20~～0.25mm)作为对照。6.2繁殖力的测定
青鱼的繁殖力可通过计数亲鱼实际产卵量来估算，避免杀死亲鱼。在繁殖季节，称量产卵前、后亲鱼（选取一次产空的亲鱼）的体重（精确到50g），前后两次称量之差即为产的卵重。用电子天平称1.0g卵，2个样品，在解剖镜下分别计数每克卵的平均卵粒数。卵巢中所含的全部卵粒数即为绝对怀卵量，单位体重(g)所含的卵粒数为相对怀卵量。6.3染色体的检测
6.3.1标本制备
采用体内注射植物血凝聚素（PHA），取肾细胞悬液滴片，空气干燥制片，吉姆萨（Giemsa）染色。吉姆萨染色液的配制见附录A（标准的附录）。6.3.2测定染色体数
在显微镜油镜下观察，计数100个以上清晰、分散良好的中期分裂相的染色体数目，测定染色体数。6.3.3组型分析
选择部分最佳中期分裂相，进行显微摄影，按放大照片剪贴配组，进行染色体组型分析。染色体的形态类别，按下列规定划分。即臂比1.0～1.7为中部着丝粒染色体(m组）;1.7~3.0为亚中部着丝粒染色体（sm组）;3.0～7.0为亚端部着丝粒染色体（st组）;7.0~~cc为端部着丝粒染色体（t组）。m组和sm组染色体臂数为2;st组和t组染色体臂数为1。6.4生化遗传分析
6.4.1样品的采集与保存
先剪断腹侧主动脉放血，活体解剖，取背部白肌，放人编号的小塑料袋中，液氮中保存。运回实验室后，置于一25C冰箱中保存。
6.4.2样品制备
样品加3%辅酶1液勾浆，低温离心，至上清液澄清。整个制备过程均在低温下操作。6.4.3电泳分离
用水平平板电泳仪及4.0%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。加样前，预电泳：50mA，30min。加样后，前电泳25mA，10min；正式电泳：275V.100min。电泳结束后，放入预先配好并在37C恒温箱中保温的同工酶染色液中染色。同工酶染色液的配制见附录B(标准的附录）。6.4.4扫描测定
用激光扫描仪对电泳图谱进行扫描。87
A1Giemsa染色母液的配制
GB17716 -1999
附录A
（标准的附录）
吉姆萨（Giemsa）染色液配制
称取0.5gGiemsa粉，量取甘油33mL，在研钵中先用少量甘油与Giemsa粉混合，研磨至无颗粒时再将剩余甘油加人，在56C条件下保温2h后，再加33mL甲醇，保存于棕色瓶内。A2磷酸缓冲液（0.2mol/L·pH7.2)配制磷酸缓冲液由A液和B液按比例混合而成。A2.1A液（0.2mol/L,NazHPO.)配制：取36.61g含1个结晶水的磷酸氢二钠（NazHPO4·H,O)定容于1000mL.蒸馏水中，或取71.64g含2个结晶水的磷酸氢二钠（NazHPO·H,O)定容于1000mL蒸馏水中，即成。
A2.2B液（0.2mol/LNaH,PO.)配制：取27.6g含1个结晶水的磷酸二氢钠(NaH,PO4·H,O)定容于1000mL蒸馏水中，或取31.21g含2个结晶水的磷酸二氢钠（NaHzPO.·2H,O)定容于1.000mL蒸馏水中，即成。
A2.3取A液720mL，加上B液28.0ml，混合即成所需的磷酸缓冲液。A3Giemsa工作染色液的配制
取100ml磷酸缓冲液，加人3mLGiemsa染色母液即成。附录B
（标准的附录）
同工酶染色液的配制
B1三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCI)染色缓冲液(1. 5 mol/L)的配制取Tris181.71g溶于900ml.蒸馏水中，用盐酸调节至pH9.5,再用蒸馏水稀释至1000mL。B2氟化硝基四氮唑蓝(NBT)液(mg/mL)的配制取250mg氯化硝基四氮唑蓝溶于250mL蒸馏水中。B3乳酸钠溶液（1mol/L)的配制
取203.76mL乳酸，加人700mL蒸馏水混合，用50%氢氧化钠溶液调节至pH7.0，再用蒸馏水稀释至1000 ml。
B4同工酶染色液的配制
所需同工酶染色液按表B1配制。88
Tris-HCl 染色缓冲液
辅酶1
GB 17716-1999
同工酶染色液配方
吩嗪甲酯硫酸盐
附录C
（提示的附录）
乳酸钠溶液
不同年龄组青鱼体长、体重退算值、生长方程、体长体重关系式C1
体长、体重退算值
与表2对应的不同年龄组鱼的体长、体重平均退算值见表C1。表C1
年龄、龄
退算体长
退算体重
退算体长
退算体重
生长方程
雌鱼：
雄鱼：
不同年龄组鱼的体长、体重平均退算值2+
L, - 220. 4E1 -- e-0. 078 9(r+0. 298 2)7W, =157 384. 0[1 - e-0. 078 9(++0. 298 2)73L, 198. 1[1 - e-0. 086 2(+0. 343 7)]W.122466.4[1e0.086 2+0.3437#式中：L-—t龄时鱼体体长，cm；W.-t龄时鱼体体重g;
e ---自然对数；
t——-鱼的年龄。
C3体长体重关系式
C3.1鱼种阶段
式中.·鱼体体重.
L…鱼体体长，cm。
食用商品鱼阶段
C3.3亲鱼阶段
W = 0. 022 2 X L2 953 4
蒸馏水
15 123. 1
·(C1）
.c0.rc .cg..( C2 )
·(C3)
+++**+...+*++*.+****o++++....+*.-( C5 )W 0. 026 5 × L2. 895 5
（C6)
雌鱼：
雄鱼：
17716-1999
W = 0. 017 8 × L2. 965 3
W 0. 001 4×L3.5191
..........( C7 )
中心中心
中中中心#心
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