本标准规定了献血者体格检查和血液检查的项目和要求。本标准适用于全国各级血站(血库)，并用于该机构的管理和评审。 GB 18467-2001 献血者健康检查要求 GB18467-2001 标准下载解压密码：www.bzxz.net

1范围
中华人民共和国国家标准
献血者健康检查要求
Health examination criteria of bluod donors本标准规定了献血者体格检查和血液检验的项目和要求。木标准适用全国各级血站（血库)，并用于该机构的管埋和评审。2定义
本标推采用下列定义，
2. 1 须检献血者 blood donors who need previous blood test要求经体检，检验合格后再献血的献血者：2.2 非预检献血者 hlood rlonnrs who ncedn't previous blood tes预先只进行体检，而不要求进行检验即可献血的献血名。3总则
GB 18467 2001
3. 1为保证献血者的身体健康和受血者的输血安全,对预检献血者每次献血前必须进行体格检查、血液检验(初检),合格后采血,采出的血液必须经复检合格后，方可供临床应用，3.2对非预检献血者经健康情况征询和休格检查合格后即可采血。来出的血液必须进行初检和复检：合格后方可供临床应用。
3.3献血者血液初检和复检不得用同试剂厂生产的试剂,同一标本的初检利复检不得由间一人进行操作。
3.4本标准中的献血健康征谢项目,适用了不具备血液检验条件的采血车和来血点的无偿献血活动。3. 5 献血者体格检查和血液检验应以血站结果为准,有效期为两调,3.6本标准是血站实施献血者体检、检验技术操作现利进行质量审核的重要依据。4献血者健康检查要求
4.1献血若体格检查标推
4.1.1年龄：18～55周岁。
4.1.2体重：男2.50kg，女45kg
4. 1. 3 血压:90 mtniHg~~140 mmIIg/60 mmHg~-90 mmHg,脉压:30 mmllg或:12. 0 kPa~~18. 7 kPa/8. 0 kPa~-12.0 kPa,脉压:=24. [ kPH4.1.4脉搏：节律规整，60次~-100改/m1n.高度耐力的运动员250饮/min4.1.5体溢正常。
4.1.6皮肤无黄染，无创面感染，无大面积皮肽病，浅衣淋巴结无明显肿大。4. 1. 7 五宦无严重疾病,巩膜无黄染,甲状腺不肿大,4.1.8四肢尤严重残疾.无严重功能性障碍及关节无红肿。双臂静脉穿刺部位无皮肤损伤+无静脉注射中华人民共和国国象质量监督检验检疫总局2001-10-22批准2002-03-01 实施
药物痕迹。
GB18467-2001
4.7.9胸部：心肺正常，无病理性呼吸音及病理性心脏杂音，心率60～100次/min。4.1.10腹部：腹平软、无肿块、无压痛、肝脾不肿大，4. 2 献血者血波检验要求
4.2. 1血型检测
4.2.1.1AB0)血型(正、反定型法）。4.2.1.2RhD血型（在有条件的地区以及Rh阴性率高的地区作测定）。4.2.2血红蛋白测定：硫酸铜法：男1.0520，女≥1.0500；相当于男≥120g/L，女2110g/L4.2.3丙氮酸氨基转移酶（AL.T）:酮体粉法（只限于初检使用);阴性;速率法：≤40单位；赖氏法≤25单位。
4.2.4乙型肝炭病毒表面抗原（HBsAg）：阴性（酶联免疫法，快速诊断法仅限F非固定采血点的初检使用)。
4.2.5丙型肝炎病毒抗体(HCV抗体）:阴性（酶联免疫法）：4.2.6艾滋病病毒抗体(HIV抗体):阴性（酶联免疫法）4.2.7
梅毒试验：阴性（RPR法，TRUST法或酶联免疫法）。4. 2. 8复检 4. 2. 1,4. 2. 3,4. 2. 4,4. 2. 5,4.2. 6,4. 2, 7(其中 4. 2. 3 必须用赖氏法或速率法)。4.2.9中型肝炎临床治愈一年后连续三次每次间隔一个月检验正常可参加献血（以临床检验报告为准)。
4.2.10疮疾高发地区检测疮原虫。4.3免疫接种后献血的规定
4.3.1接受麻疹、腿腺炎、黄热病、脊髓灰质炎等活疫苗最后饮免疫接种二周后，或风疹活疫苗、狂犬病疫苗最后一-次免疫接种四周后可献血;被狂犬咬伤后经狂犬病疫苗最后一·次免疫接种一年后方可献血。
4. 3. 2 接受动物血清者于最后--次注射四调后方可献血。4.3.3健康者接受乙型肝炎疫苗，甲型肝炎疫苗免疫接种后不需要推迟献血。4. 3. 4 接变乙型肝炎免胺球蛋白注射者一华后方可献血4.4有下列情况之一者暂不能献血4.4. 1拔牙或其他小手术后未满半个月;阑尾切除术、疝修补术及扇桃体手术未满三个月;较大手术后未满半年者。
4.4.2妇女月经期前后三天，妊娠期及流产后未满六个月，分娩皮哺乳期未满一年者。4.4. 3感骨、急性胃肠炎病愈末满一周者;急性泌尿道感染病愈未满一个月者,肺炎病愈未满二个月者。
4. 4.4某些传染病：如痫疾病愈未满半年,伤寒病愈末满一年者，布氏杆菌病病愈末满一年者,疙疾病愈末满三年者。
4.4.5皮肤局限性炎症愈合后未满·-周者,广泛性炎症愈合后末满两周者4.4.6口服抑制或损害血小板功能的药物（如含阿司匹标或阿司匹林类药物)停药后不满五天者。4.4.7近五年内输注个血及血液成分者4.4.8被血液或红织液污染的器材致伤或污染伤口以及施行纹身术后未满-年者。4. 4. 9与传染病患者有密切接触史者，自接触之H起至该病最长潜伏期，4. 5有下列情况之一者不能献血；4. 5. 1病毒性肝炎患者、乙型肝炎表面抗原阳性、内型肝炎病毒抗体阳性者。4.5.2获得性免疫缺陷综合征（AIDS,双滋病）患者及人免疫缺陷病毒(HHIV)感染者4.5.3易感染人免疫缺陷病的高危人群，如吸毒史者,同性恋者。多个性伴侣者。GB 18467--2001
4.5.4麻风病及性传播疾病患者，如梅毒、淋病等，4. 5. 5该献血者的血液曾使受血者发生与输血相关的传染病者。4. 5. 6过敏性疾病及反复发作的过敏患者，如经常性尊麻疹、支气管嗪喘、药物过敏(单纯性尊麻疹不在急性发作期间可献血）。
4.5.7符种结核病崽者，如肺结核、肾维核,淋巴结核及骨结核等。4.5.8心血管疾病患者，如各种心脏病、高血压、低血压，心肌炎以及血栓性静脉炎等。4.5.9呼吸系统疾病患者,如慢性支气管炎、肺气肿、支气管扩张以及肺功能不全等。4.5. 10消化系统疾病患者，如较严重的胃及十二指肠溃疡,慢性胃肠炎、慢性麒腺炎等。4.5.11泌尿系统疾病想者，如急慢性肾炎、慢性泌尿道感染、肾病综合征以及急慢性肾功能不全等。4. 5. 12血液病患者,如贫血、白血病、真性红细胞增多症及各种出、凝血性疾病。4.5.13内分密疾病或代谢障碍性疾病患者，如脑垂体及肾上腺疾病、甲状腺机能亢进、肢端肥大症、尿前症及糖尿病等,
4. 5. 14器质性神经系统疾病或精神病患者,如脑炎,脑外伤后遗症,癫痛、精神分裂症,瘾病及严重神经衰弱等，
4. 5. 15寄4虫及地方病患若,如黑热病,血吸虫病、丝虫病、钩虫病、囊虫病,肺吸虫病及克山病和大骨节病等，
4. 5. 16各种恶性肿瘤及影响键康的良性肿瘤患者,4. 5. 17做过切除胃、肾,脾、肺等重要内脏器官手术者。4.5.18慢性皮肤病患者，特别是传染性、过敏性及炎症性全身皮肤病,如黄癣,广泛性凝疹及全身性牛皮癣等，
4. 5. 19眼科疾病患者，如角膜炎、视神经炎及眼底有变化的高度近视等。4. 5.20自身免疫性疾病及胶原性疾病,如系统性红斑疮、皮肌炎,硬皮病等。4.5.21克-雅(Creutzleldt-Jakob)病患者及有家族病史者，或接受可能是来源于克-雅病原体感染的组织或组织衍生物(如硬脑膜、角膜、人垂体生长激素等)治疗者。4.5.22某些职业病患者，如放射性疾病、尘肺及有害气体、有毒物质所致的急、慢性中毒等。4. 5. 23体检医生认为不能献血的其他疾病患者。4.6献血鼠及献血时间间
4.6.1献血：凡符合《献血者健康检查标准》的献血者，一次可献血200mL或400mL。4.6.2献血时间问陷
4.6.2.1献全血：六个月以上。
4.6.2.2机采血小板：每隔4周采集一次，如间陷时间少于4周时，则采集前血小板计数应≥150×10/1.以E。
4.6.2.3机采小板后，垃间隔4周以上方可献仑血，以后再献全而应按献全血的时间间隔。GB18467—2001
附景A
（标准的附录）
献血者健康情况征询表
您是否有下列情说：（有在内打√：否在口内打×）1.是否患有艾滋病或感染艾滋病病毒？2．是否有吸毒史、同性恋史及有多个性伴侣？
3.否曾患梅、淋病或其他性传播疾病?
4. 近一年内是否与 [:述 1 ~-3 项条,文中的人员发生性行为?
5. 近三个月来是否有原因不明的消瘦、口
持续性发热，腹泻不止，淋巴结肿人？.是否患过麻风病？
7、是否曾患肝炎或肝炎检验阳性？8.五年内是否曾经输血或血被成分？9.近·-年内是否纹身？
10．是否患任何癌症？
11. 是患有结核病?
12、足否患有心脏病、肺病,肾病、肝病或血液病?
13. 是否患有高血压病,高脂血症！1.4.是否患有甲亢、糖尿病？
15.是否患有严重的胃及十一指肠球部溃疡病？
16. 是否患有过敏性疾病?
17．近半年内是否患过炯疾？
18．近－年内是否患过伤塞？
19.近三年内是否患过症疾？
20近五大内是否口服阿司匹林类药物？21.半月内是否披牙或做过其他手术？22.是否曾做过较大手术？如果做过：是在何时：
柯种手术：
23.一内是否患感胃急性胃肠炎？口
24.近一个月内是否患急性泌尿道感染？25. 近三个月内是否患过肺炎?
26i.是否患慢性皮肤病或皮肤感染？27．是否有过晕殿、癫痫、意识丧失？28、妇女月经期妊娠期？
29．妇女流产未满六个月，哺乳期未满年？
30.近一年内是否接受动物血清免疫注射或其他预防接种？
31.是否曾用过人类生长激素治疗疾病？32.是否有除_上述以外的其他疾病或情说？
再次感谢您的爱心和奉献，谢谢您的合作！献血者声明
我自愿献血给
血站。血液的使用出血站决定。我保证对“献血者键康情说征谢表”中所提的问题回容全部属实。我同意血站提取我的血样并按规定的项目进行检验，并将上述检验结果储存于献血档案内。本人埋解献血检验结果只是安全输血的需要,不能用于保险、疾病的诊断或其他的：
本人理解如果我对上述“征询表所提供的任何签案不瞩实，或上逆声明是虚假的，所引起的划后果由我负贡任。特此声明。
献血者签名：
身份证/护照号码：
月期：免费标准下载网bzxz
T作单位
通讯地址
户口所在地
证件类别
献血次避
血液样本的采集
GB18467-2001
附录B
（标推的附录）
献血受记表
证辞号码
上.次献血时间
附录C
（标推的附录）
献血者血液检验的操作规程
献血证号码：
文化程度
C1.1采集血样必须认真核对献血者的姓名和血样编号。血样在试管架上应按编号顺序排放。C1.2采集血样必须使用有生产批准文号的一次性注射器,并在有效期内使用：一次性注射器(包括针简和针头)用后应装入密封袋焚烧或消毒灭菌后做形处理，严禁回收重复使用。C2血红蛋白(Hh)测定
C2.1鼠化高铁血红蛋白（heniglobin cyanide,HiCN)法（第-法）C2.1.1原理
血红蛋白被高铁氰化钾氧化成高铁血红萤白，再与氰离子结合·生成稳定的氰化高铁面红蛋白。乱化高铁血红蛋白在波长510 nm处有最高吸收蜂，可用分光光度计直接定量测定，或用鼠化高铁血红蛋白参考液进行比色法测定。
C2.1.2器材
C2.1.2.1氰化高铁血红蛋白试剂配方：氰化钾
高铁氰化钾
无水磷酸二氢钾
Trita X-loo
蒸馏水
C2.1.2.2分光光度计
C2. 1. 3实验步骤
垒1 000m
7. 0-~7. 4
C2. 1. 3. 1取全血 20 μL,加到 5 mL HiCN 试剂中混合·静置 5 min，C2.1.3.2用分光光度讨在540 nm 波长处,以HiCN 试剂或蒸馏水调零,测定吸光度C2.1.3.3计算，见式(C1)。
GB 18467—2001
×251 = A×367. 7
64 458
44 000
式中：H
—血红蛋白浓度·g/L
A一—测定算吸光度；
血红蛋白的平均分子量；
64 458-—
44000—血红蛋白摩尔吸光度；
251-—稀释倍数。
..(C1)
C2. 1. 3. 4用HiCN 参考液绘制标准曲线以血红蛋白参考值为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
C2.1.4结果判断
男,125～160 g/L
女: 115~150 g/t,
C2.1.5注意事项
C2.1.5.1HiCN试剂不能贮存于塑料瓶中，否则会使离子丢失，测定值偏低。C2.1.5.2氟化钾是毒品，配试剂时要按剧毒品管理程序操作。C2.2全血酸锅比重法(本法为Hb 含量测定的替代方法)(第法)。C2.2.1原理
将全血滴入已知标准硫酸铜溶液中，即可形成一层蛋白质铜盐，包围在全血滴外层。观察全血在不同相对窈度（比重的硫酸铜溶液中沉浮或停留不动情况，即可测得其相对密度（比重）。C2.2.2器材
硫酸铜溶綫，韦氏比重计。
C2.2.3实验步骤
将相对密度（比重）为1.0500,1.0520的硫酸铜应用液分别倒人两个100mL量杯内,贴上密度标签(比重标签)。将男献血员血液 1 滴滴于 1. 052 ( 量杯内。 女献血员血被 1 滴滴于 [. 050 0 量杯内。滴血时血滴距硫酸铜液面1cm，15s内观察血滴下沉情况。C2.2.4结果判断
待检样品相对案度(比重)若大于硫酸铜溶液相对密度(比重),则血滴很快沉于杯底。待检样品相对密度（比重)若等于硫酸铜溶液相对密度（比重）,则血滴在液面中段悬浮10～15 s后下泥。
待检样品相对密度（比重)若小于硫酸铜溶液相对密度（比重),则血滴上浮，15 内不下沉。男：全血相对密度（比重)1.052 0(相当于血红蛋白含量≥125 g/1.）,为合格。女全血相对密度（比重）1.0500相当手血红蛋白含量115g/L），为合格。C2.2.5注意事项
C2.2.5.1所用器材必须清洁。
C2.2.5.2硫酸铜应用获必须现用现配，便用前必须用书氏比重计校正。C2. 2. 5. 3血滴不能含有气泡。C2. 2. 5. 4每 100 mL 硫酸铜溶被测庭血滴不能多于 80滴。C3血型检测
C3.1ABO血型检验
本标准要求必须使用卫生部批准的血型检测试剂盒：在有效期内使用。c3. 1. 1 方法
玻片法(第：-法)，试管法(第二法)。C3.1.2原理
GB 184672001
根据红细胞上有或无A 抗原或/和 B抗原,将血型分为 A 型、B型、AB 型及 O 型四种。可利用红细胞疑集试验,通过正(血清试验)反(细胞试验)定型准确鉴定 AB() 血型。所调正定型是用已知抗 A 或抗B血型试剂来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原，所谓反定型是用已知A，型细胞和B型细胞来测定血清有无相应的抗A或抗 3。C3.1.3器材
C3. 1. 3. 1抗A(B型)、抗B(A型)、及抗A,B(O 型)血型试剂,效价 1 : 128。C3. 1. 3. 2 3% ~5% A,,B 及 0 型试剂红细胞盐水悬液。C3.1.3.3变检者血清。
C3.1.3.4受检者3%~5%红细胞盐水悬液。C3.1.4 实验步骤
C3.1.4.1玻片法
C3.1.4.1.1取清洁玻片一张（或白瓷板一快）。标明抗A、抗B和抗A.B，分别用滴管滴加抗A、抗B和抗A、I3血型试剂 1滴,再加受检者 3%~5%红细胞悬液 1滴,混合。C3. 1. 4. 1. 2 另取清洁玻片一张(或白瓷板一块)。标明 A,细胞、B细胞和0 细胞,用滴普各加受检者血清一滴,再分别用滴管滴加 A1,B和 0 型试剂红细胞悬液 1 滴。3.1.4.1.3将玻片（白瓷板)不断轻轻转动（在室温18C~22C）使血清与细胞充分混钉连续约2 min，以肉限观察有无凝集(溶血)反应。如以玻片试验时，也可用低镜观察结果。L3.1.4.2试管法
C3. 1. 4. 2. 1 取洁净小试管(内径 10 mm× 60 mm)3 支,分别标明抗 A,抗 B 和抗 A、B,用滴管分别加抗 A、抗 B和抗 A,B 血型试剂各 2 滴于试管底部再以滴管分别加人受检者 3% ~5%红细胞盐水悬被 1滴，混合。
c3. 1. 4.2.2另取洁净小试普(内径 10 mmX16 mm)3 支分别标明A,、B和0 型细胞,用滴管分别加人受检者血清 1～2 滴于试管底部,再分别以滴管加人 A,,B 和 0 型 3%试剂红细胞悬液 1 滴混。C3. 1. 4. 2. 3 以 120 g 离心 1 min 或 1 300 g 离心 15 s 。C3.1.4.2.4将试管轻轻摇动使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集(溶血)现象，如肉眼不见凝集，应将反应物倒在玻片上，再以低镜检查。C3. 1. 4. 2. 5观察结果时既要看有无摄集,更要注意凝集强度,此有助于 A,B 业型、类 B,或 cisAB 的发现：
结果判断
见表Cl
表 C1AB0血型检测结果
标雄血清一待检红细胞
注，“十”表示凝集，\一”表示不凝集。C3. 2 RhD 血型检测
C3.2. 1方法
血型结果
待检血清十试剂红细胞
A,细胞
酵试验法。
C3.2.2原理
GB 18467 .--2001
Rh 血型系统主要有五种抗血清,即抗 C、抗 c.抗 D,抗 E,抗 e。 在临床输血中,一般只做 D 抗原的 鉴定,凡受检红细胞利抗 D 血清发生凝集者为 Rh 阳性，不凝集者为 Rh 阴性。本试验必须做阴、阳对照。
C3.2.3器材
C3.2.3.15%受检者红细胞悬液，C3. 2. 3. 2 抗 D 血清。
C3. 2. 3. 31%木瓜酶(或菠萝酶)溶液;称取木瓜酶 1, 0 多溶解于 100 mL pH5. 5磷酸盐缓冲液内C3. 2. 3. 4 jH5. 5 磷酸盐缓冲液:67 mmo1/L 磷酸氢二钠 5 mL 加 67 mmol/I 磷酸二氢钾 95 mL 混合而成。
C3.2.3.5E.知Rh阴性和阳性5%红细胞悬液。C3.2.4实验步骤
C3. 2. 4. 1 取小试管 1 支做好标记,依次加抗 D 血清,5%受检者红细胞盐水悬液和 1%本瓜酶(或菠要酶）试剂各1滴混勾，置37℃水浴30min。C3.2.5结果判定
阴性对照管不凝集，阳性对照管凝集，受检者凝集：Rh阳性；阴性对照管不凝集,阳性对照管凝巢,受检者不凝巢,Rh 阴性。C3.2. 6注意事项
C3. 2. 6. 1 Rh ,而型检测应严格控制温度与时间。C3.2.6.2观察反应结果时，应轻轻摇动试管，不可用力振摇。C3. 2. 6. 3发现 Rh 阴性时必须排除 Rh 弱 D 型。C3. 3 Rh 弱 D 型检测
C3.3.1方法
问接抗人球蛋白法。
C3.3.2原理
正常的 RhD 抗原是由 A,B,C 和 D 等部分组成的嵌合体。以 RhABCD表示,如果缺乏 A,,C 和D 中的一种或一种以上的因下时，称为Rh弱D型。RI弱D型红细胞与各批或几批抗D血清在盐水介质及酶试验中不发生凝集，但在间接抗人球蛋白试验中发生凝集反应，C3.3.3器材
C3. 3.3. 1抗D血清：不同牛产家或批号的抗D血清 3～5批。C3.3.3.2抗人球蛋白血清。
C3.3.3.31%木瓜酶溶液。
C3.3.3.45%受检者红细胞悬液。C3.3.4实验步骤
C3.3.4.1将受检者红细胞分别与各批抗D血清做间接抗人球蛋白试验。C3.3.4.2将受检者红细胞分别与各批抗D血清做酶试验。C3.3.5结果判断
受捡红细胞与各批抗血清在醇试验中都不凝集或只与其中 1批或数批抗D血清避集，但在间接抗球蛋白试验中都凝集者或凝集强度低于抗球蛋口试验(AGT)者,都属Rh 弱D 型细胞。C3.3.6注意事项
Rh弱D型人输注D阳性红细胞后可产生抗D抗体。所以病人是Rh弱D型应视为Rh阴性，输Rh阴性血液；供血者是Rh弱D型应视为Rh阳性，不能输血给Rh阴性的病人。GB 18467—2001
C4血清丙氨酸氨基转移（换）酶（alanineaminotransfeaseALT）检测用酮体粉法作初检，如结果为阴性则可判为合格；如结果为阳性应用赖氏法或速率法复查：采血后的复检必须使用赖氏法或速率法。C4. 1方法:速率法(第---法）
C4. 1. 1原理
在AL.T速率法测定中酶偶联反应式为：ALT
L-丙氨酸α-酮戊二酸芸
=内酮酸十1-谷氮酸
丙酮酸+NADH+H-LDH
-L-乳酸+NAD+
上述偶联反应中，NADH的氧化速率与标本中酶活性呈止比，在310nm波长处NADH呈现待征性吸收蜂，而NAD)则没有。因此，可在340nm监测吸光度的下降速率（AA/min），计算出ALT的活性单位。
C4.1.2器材
C4.1.2.1试剂配方
pH(37C)
Tris 缓冲液
α-丙氨酸
α-酮戊一酸
l00 mmol/1
500 nmol/L
15nul/L
0. 18 mmol/L
1 200 U/L
C4.1.2.2全白动生化分析仪或平自动生化分析仪C4.1.3实验步骤
具体实验步案根据分析仪型号及试剂说明书而定。C4. 1. 3. 7主要参数
血清：ALT 基猛液
延迟时间
监测时间
比色杯光径
C4. 1. 3. 2计算
式中·
血清丙氨酸氨基转移酶（ALT)浓度；吸光度的下降速率，AA/min
6300.-—NADH在340nm的摩尔吸光度。C4.1.4结果判定
在 37 C吋的参考值:10～40 U/L.C4.1.5注意事项
心4. 1. 5. 1抗凝剂能引起反应液轻度混浊。C4. 1. 5. 2血清不能反复冰冻保存。(C2
GB18467—2001
C4. 1. 5. 3速率法试剂复溶后,置 4 C保存-能稳定 2 ~4 天,若置 25 C室温中,只能稳定 4 ~～8 hC4-2方法：赖氏法（第二法）。C4.2.1原理
ALT 个化 L-丙氨酸利 L-谷氨酸之间的氨基转换,在此反应过程中相应的酸是 α-酮戊二酸和内酮酸：
L-丙氨酸十±-酮戊二酸
丙酮酸I谷氨酸
血清与基质经定时间反应后，加人2，4-二硝基苯肼后，与反应液中的二种α-葡酸生成相应的2,4二硝基苯踪,来终止反应。在碱性条件下,两种萃的吸收光谱曲线有区别,据此可以确定酶的活力强弱。
C4.2.2器材
C4. 2. 2. 1 0. 1 mo1/L 磷酸氢二钠(Na,HPO,)溶液 C4.2. 2. 20. 1 mo1/L 磷酸二氢钾(KH,PO4)溶液。C4.2.2.30. 1 mol/L 磷酸盐缓冲被(pII7. 4)。C4. 2. 2.4基质缓神液(DI. 丙氨酸 20o mmol/l.,α 酮戊二酸 2 mmol/L)。C4.2. 2. 5 1. 0 mmol/L 2,4-二硝基苯耕溶液。C4.2.2.60.4mol/L塑氧化钠(NaOH)溶液。C4.2.2.72mmol/L丙酮酸标准液。C4.2.2.8分光光度计。
C4.2.3实验步骤
C4.2.3.1标准曲线绘制：按表C2向各管加入相应试剂，赖氏法标准曲线绘制实验表
[(1. 1 mol/L 磷酸盐缓冲液 /mL2mmol/L丙翻酸标准被/mL
底物缓冲液/mL
2,4-二硝基苯胖/mL
0. 1 mo1/L氢氧化钠/mL
丙酮酸实际含量/mmol/[
相当于酶活力/卡门单位
混匀后,在 37 C水裕箱中保温 10 mIn0.50
混勾后,在 37 C 水浴箱中保温 2h min5. n
心，10
混勾放置 5～1 min后,用分光光度计在波长 505 nm 处,以蒸馏水调零点,读取各管吸光度。各管吸光度均减去空白管（\0\号管)吸光度，所得差值与相对应的卡门单位作图。（以吸光度为纵坐标，相应的卡门单位为横坐标）。
C4.2.3.2样本检测：按表C.3 向各管加人相应试剂。待检血清/ml.
基质资液/mL
2,4-二硝基苯肼/mL
基质溶液/mL
0.4mol/L氢氧化钠/ml
GB 18467---2001
表 C3赖氏法实验步骤表
测定管
混匀后，在37'C水浴箱中保温30min0. 5
锂匀后.在 37 亡:水裕箱中保溢 20 mILn5.0
对照管
混勾放置5～10m1n后，用分光光度计在波长505mm处，以蒸馏水调零点，读取各管吸光度。C4.2.4结果判定
测定管吸光度减去对照管吸光度后，从标准曲线查得ALT活力单位。正常参考值：≤25卡门单位，
C4.2.5注意事项
C4.2.5.1赖氏法成批测定ALT时各管加入血清后，试管架应置于37C水浴箱中操作。C4. 2. 5. 2溶血、脂血和黄疽血血清必须做自身对照，C4. 2. 5. 3基质液中的 α-酮戊二酸和 2,4-二硝基苯肼均为呈色物质,称量:必须准确。C4.2.5.4丙阴酸溶液不稳定，必须现用现配制C4.2.5.5赖氏法每换一批试剂应重新绘制标曲线。C4.3方法：酮体粉法（第三法）。C4.3.1原理
血清AIT能使底物中内氨酸的氢基与α-酮戊二酸的酮基互换，生成谷氨酸及丙菌酸。丙酮酸与显色粉中的亚硝基铁氰化钠在氮基存在下，于碱性环境中生成监绿色化合物，颤色深浅与丙酮酸的生成量成正比，据此可以定性測定ALT。C4.3.2器材
C4.3.2.1基质液
α-酮戊二酸
氨基丙酸
将以1两份置于1000trL烧杯内，加蒸馏水400ml..使其全部溶解，然后移人2000mL容量瓶内，用蒸馏水加至刻度（用时再稀释5倍）。C4. 3.2. 2显色粉
亚硝基铁氰化钢
无水碳酸钠
硫酸铵
先将亚硝基铁鼠化钠置乳体内磨细颗粒，然后再加人后两种试剂，于乳钵内略加研磨混句即可(不易太细，保存于密闭干燥瓶内，勿使受潮）。C4.3.2.3水浴箱
C4. 3-2. 4定重吸管。
C4.3.2.5多孔凹板。
C4.3.2.6小药勺。
C4-3.3实验步骤
C4. 3. 3. 取洁净多孔反应凹板,加人阴性,阳性对照和待检血消 0. 1 mL。c4. 3. 3. 2加人基质液 0. 05 mL .GB 18467—200
C4.3.3.3充分混勾，封板，放置37℃水浴箱中温育30min。C4. 3. 3. 4 加显色粉 0. 4 g(一小)。2 min~3 min 内肉眼观察结果。C4.3. 4结果判定
阴性：纯黄
阳性:黄绿-绿-蓝绿-蓝
C4. 3. 5注意事项
C4.3.5.1反应板应洁净，无酮类及羟基化合物污染。C4.3.5.2显色粉不得受潮，用量准确。C5乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)检测C5.1方法(第一法）
固相酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbentassay ELISA）。本标准要求用E1.ISA法检测HBsAg，本标准要求必须使用卫生部批准的检测试剂盒。在有效期内使用。使用试剂的灵敏度必须能检出≤1ng/mlL.。C5. 1.1 原理
以多位点的抗-HBs 包被反应板,使之固相化。 圳,人待测血清和酶标记抗-HBs,如待测血清中含有HBA，则在固相载体表面形戒双抗体夹心复合物，洗去未结合的酶标记抗体后，加人酶作用的底物，经酶的催化,产生有色产物。反之·如待测血清中不含有HBsAg，则不能产生复合物，加人底物后也不能产生颜色。
C5.1.2器材
C5. 1.2. 1 HBsAg 检测试剂盒,C5.1.2.2 酶标仪。
C5. 1. 2. 3洗板机。
C5. 1. 2. 4 恒温器。
C5.1.2.5可调微量加样器，
C5. 1. 2. 6 质控血清。
C5. 1. 2. 7待检血消,
C5. 1.3实验步骤参照试剂盒说明节，C5. 1. 4结果判断
临界值(C.0.)计算,参照试剂说明书。样本 A 值(S)/C.(. [,划为 IBsAg 阳性样本A值(S)/C.O.<1,判为HBsAg阴性。C5.1.5注意事项
C5.1.5.1试验器材应洁。
C5. 1. 5. 2严格按说明书操作。C5.2方法（第二法）
胶体金-免疫层析法（immunochromatographyassay）C5.2.1原理
本试验为双抗体夹心法，将氯金酸用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒，标记抗体。抗体包被在膜和胶体金上，合适的膜孔径能使血细胞和血清分离，并使血清有良好的肥升速度。血清中如有HBsAg，即与金标抗体结合,形成 Au-Ab-Ag结合物,当 Au-Ab-Ag 结合物调到膜上的抗体即形成 Au-Ab-AgAb，皇胶体金的紫红色（阳性）：反之，则无色（阴性）。
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