本标准规定了苏云金芽胞杆菌原粉的要求、试验方法以及标志、标签、包装、贮运。本标准适用于防治鳞翅目害虫的苏云金芽胞杆菌原粉。 GB/T 19567.1-2004 苏云金芽胞杆菌原粉 GB/T19567.1-2004 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS 65. 100. 10
中华人民共和国国家标准
GB/T19567.1—2004
苏云金芽胞杆菌原粉
Bacillus thuringgiensis technical2004-06-22发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标淮化管理委员会
2004-12-01实施
GB/T19567.1—2004
苏云金芽胞杆菌(Bacitlus thuringiensis,B.t.)是目前应用最广泛的一种微生物杀虫剂，它的主要杀虫成分是伴胞晶体中的毒索蛋户，其中，本标谁所检测的对鳞翅且害虫有毒力的毒素蛋白的相对分子量为130kDa。生物测定中甜菜夜用干检测对鳞翅目贪夜蛾属声虫有特性的苏云金芽胞杆菌原粉的毒力，小菜蛾和棉铃虫用于检测对苏云金芽胞杆菌鳞翅目寡虫有活性的苏云金芽跑杆菌原粉的毒力。本标推是根据我国以往制定的苏云金芽胞杆菌行业和全业标准等有关材料，结含我国的实际情况制定的。
本标推对苏云金芽胞杆菌原粉的要求、试验方法、抽样以及包装、运输等作了具体要求和规定，从而为苏云金芽胞杆菌生产提供了统一的技术依据。本标罹的附录A是资料性附录.晰录B是规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准起草单位：农业部农药检定所、华中农业大学微生物农药国家工程研究中心，潮北省生物农药工程研究中心。
本标推王要起草人：姜辉、喻子牛陈守文、主开梅、工晓军、昊新平,顾宝根。本标摊由农业部裁药检是所负责解释。范围
苏云金芽胞杆菌原粉
GB/T19567.1—2004
本标准规定了苏云金芽胞杆菌原粉的要求、试验方法以及标志、标签、包装、贮运。本标准适用于防治鳞翅自害虫的苏云金芽胞杆菌原粉。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标推的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标推。GB/T1250极限数值的表示方法和判定方法GB/T1600—2001农药水分测定方法GB/T1601农药pH值的测定方法
GR/T1604商品农药验收规则
GB/T1605—2001商品农药采样方法GB3796农药包装通测
GB/T16150-1995农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法3要求
3.1外观：灰白色或棕褐色粉末。3.2苏云金芽胞杆菌原粉应符合表1要求。表1苏云金芽胞杆菌原粉控制项目指标指
毒素蛋白（130kDa)/(%）
毒力效价(P.x.+H.a. )/(IU/mg)毒力效价(.S. e.)/(IEJ/mg)
水分《%)
網度(75 μm)/(%）
一等品
合格品
50 000
.等品
50 000
合格品
注1：P.z，H.a.和S.e.分剃为小菜蛾注2：B.1.a为苏云金芽胞杆菌站泽亚种；B.t.为苏云金芽胞杆菌库斯塔克亚种，试验方法
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，所述溶液均为水溶液。GB/T 19567.1—2004
4.1抽样
按照（B/T1.605一20G1中“商品席药采样\进行，用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样壁不少于100g：
4.2毒素蛋白含量
用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SES-PAGE)凝胶图像处理法进行测定。4.2.1方法提要
用碱性溶液处理苏云金芽胞杆菌源粉中的伴胞晶体，使其降解为毒索蛋白，然后通过SDS-PAGE依蛋白质相刘分子质量的差异，使毒紫蛋自与苏云金朱胞杆菌杂蛋自分离，之后用电泳图像扫描蛋自区带面积，进行定鼠。
4.2.2仪器、设备
a）电泳议；
b）双垂直式电泳槽（1.5mm凹形带槽橡胶模框），凝胶板面积170mm×170mn(1.5mm、20孔样品槽模具）：
电泳凝胶成像系统；
离心机：10000r/min;
e）分析天平：精确至0.0001g~
4.2.3试剂和溶液
4.2.3.1过硫酸铵(APS)。
4. 2. 3.2
2十二烷基硫酸钠（SDS）。
4.2.3.3四甲基乙二胺（TEMED）4.2.3.4氢氧化钠。
4.2.3.530%丙烯酰胺爱胶母液：称取丙烯酰胺30B，亚甲双丙烯酰胺（原称：用叉双丙烯酰胺）0. 8 g,溶于 100 mL 蒸馏水中,过滤，于 4℃暗处贮存备用。4.2.3.6分离胶绥冲波：称取三羟基甲基氨基甲烷(Tris)18.17g和SDS0.4g溶于蒸馏水中，用浓盐酸调余 pH8.8,用蒸增水定容室 100 ml.,4.2.3.7浓缩胶缓冲液：称取Tris6.06名和SDS0.4g溶于裁馏水中，用浓盐酸调至pH6.8.用蒸馏水定容系100mlL
4.2.3.8电极缓冲液：称敏Tris3.036g，甘氨酸14.42g，SDS1g，用水溶解并定容至1000mL，4.2.3.93×样品稀释被：lmiol/L.-pH6.8Tris-HCl18.75mL.SDS6g，甘油30ml,雍基乙醇15mI.,少许澳酚蓝，用蒸馏水定容至10mL。4.2.3.10调定液：量取95%乙醇500ml..冰乙酸160mL，用蒸谪水定容至1000mL。4.2.3.11染色液：称取考马斯亮蓝（CBB)R-250【g加人95%艺醇250mL，冰乙酸80mI.，蒸瘤水容至1000mL，溶解过滤后使用。4.2.3.12脱色液：取95%乙醇250mL.冰乙酸80ml.用蒸缩水定容节1000ml4.2.3.13毒索蛋白标样：毒素蛋白（相对分子量为130kDa)含量为8.0%的原粉。4.2. 4样品处理
称取标样、试样各20.0mg（精确到0.1ng），移至1.5mL离心管中，加1.mL水充分忌浮，取100μL加入另1.5mL离心管.加人0.5mo1/L氢氧化钠溶液25uL（使氧化钠溶液的终浓度为0.1mol/1.）放置约5min，再加人3×样品稀释液75μL，使最终体积为200uL，手100℃游水中煮沸6min，离心（2000r/min）10min后取上层清液，以备电泳.E样，4.2.5SDS-PAGE分离毒素蛋白
4. 2.5. 1制备8% ~10%聚丙烯酰胺凝胶采用不连续缓冲系统，制胶方法参见附录A（资料性附录）。4.2.5.2上样
GB/T 19567.1—2004
取1.述标样溶解液上层清液，于聚闪烯酰胺凝胶的上样孔中分别上样6.8.10、12、14ul.（毒素蛋白含量约为3g~7），作为标准曲线，再取一定体积的试样溶液1层清液（毒素蛋白含量约为5g）.加人到上样孔中，注人电极缓冲液后，接通电源。4.2.5.3电泳
电泳初期电压控制在100V左右，待试样进人分离胶后，加大电压到170V，继续电泳，当指示剂前沿到达距底端1cm左右时停止宽泳，取出胶板，在7.5%（体积分数）乙酸中浸泡30min4.2.5.4染色
将分离胶部分取下，用考马斯亮蓝（CBB)R·250染色液染色过夜，4. 2. 5. 5脱色
倒去染色液，先用漂洗液洗涤凝胶，然后加人脱色液，37℃保温脱色，更换几次脱色液，至背景清晰为止。
4. 2.6测定
胶板经脱色后，可清晰地看到分子量为130kDa蛋由区带，用凝胶成像系统对凝胶进行分析。样品中毒素蛋白的百分含量（)接式(1)进行计算。X-M
X×1005
M-~一由标准蛋白回归曲线计算得到的蛋白量：样品的浓度
V—样品的加样体积；
—…样品的释倍数。
4. 2. 7允许差
取其算术平均值为测定结果。两次平行测定结果相对偏差小于等于5%。4.3避力效价的测定
按晰录B(规范性附录)进行,
4, 4 pII 值的测定
按 GB/T 1601测定
4.5细度的谢定
按GB/T 16150—1995中2.2进行测定。4. 6水分的测定
按GB/T1600-~2001中“共沸蒸馏法”进行测定。5检验规则
需符合GB/T1604有关规定。极限值按接GB/T1250处理6标志、标签、包装、勉运
6.1产品包装应符合GB3796规定，向时注明所用标准编号及检测所用试虫6.2原粉主要采用塑料包装，密封。6.3些存时严防日晒，勿受压、置丁阴凉干燥处。6.4运输时，注意轻放，防止损坏，(1)
6.5保证期，在正常延运条件下，原粉质景保证期从生产日期算起为两年，产品出厂时力效价和毒素蛋自的含量不低于3.2指标，两年内产品毒力效价和毒素蛋白的含量不低于3.2指标的70%。GB/T19567.1-2004
A.1制板
附淼A
（资料性附录）
电泳凝胶的制备
本实验选用双垂直电泳携，具体操作根据实验室条件面定，基本操作是根据电泳植高矮大小，选择两块大小--样的玻璃板，其中一块端部带有2cm～3cm高的凹槽。两块玻璃板洗净于燥后，在无凹槽的玻璃板两边各放一条“间隙条”（塑料条、胶条都可以，其宽度、厚度根据需要而定），然后放上带凹槽的玻璃板，用夹子将两快玻璃板固定，这样两块玻璃板之间就形成了一定的间隙。形成的间下端应该封闭，以防灌人的胶液漏出，一般用胶纸条封闭，待灌人的胶凝固后，再斯去胶纸：或用1%～1.5%浓度的琼脂封闭，方法是：在琬脂中加人电极缓冲液或蒸馏水，在沸水浴中加热辩解，将带有间隙的玻璃板装置垂直放在个高3 cm、宽 3 cm、比玻璃板宽而长的一个小内（商品电泳槽有配套装置）,趁热将溶解的琼脂胶灌入小槽内，待冷却后取出，玻璃板装置下端即封严，可进行灌注骤丙烯酰胺胶液。A.2制备分离胶
从冰箱中取出制胶试剂，平衡室室温。按表A.1配方配制分离胶。本试验中分离胶浓度为7.5%。按衰A.1配方将胶液配好,混勾后，迅速注入两块玻璃的间隙中，至胶液面离玻璃叛槽3cm左右。然后在胶面上轻轻铺1crm高的蒸馏水，加蒸馏水时通常沿玻璃板慢慢加人，勿扰乱胶面。垂直放置胶板于室温，1 h左右使之凝聚。此时在避胶和蒸馏水之间可以看到很清晰的一条界面。然后倒掉胶面土的蒸馏水。
A,3制备浓缩胶
用量根据实际情况而定，制备方法按表A.1配方配制。按表A,1配方将胶液混合，取少量灌人玻璃板间既中,冲洗分离凝胶面,而后倒出。将余下的胶液注人玻璃板问隙间，使胶液液面与玻璃板凹槽处平齐，面后插人“梳子\（样品糟模板），在室温放置20 main～30 min,浓缩胶即可避骤。固后,慢慢取出“梳子\,取时应防止把胶孔弄破,取出\梳子\后在形成的胶孔中加人蒸馏水，冲洗末凝桑的丙烯酰胺等，倒出礼中蒸馏水，再加人电极缓冲羧。将灌好胶的玻璃板垂直固定在电泳槽上，带凹模的玻璃板与电泳槽紧贴在一起，形成一个贮液槽，向其中加入电极缓冲液，使其与胶孔中的缓冲液相接触。在电泳槽下端的贮液槽中也加入电极缓冲液。表A.1SES-PACE胶的配方
性存綫
30%丙烯酰胺母液
分离胶缓冲液
浓缩胶缓冲液
双蒸水
10%过硫酸胺(APS)
四甲基乙胺(TEMED)
分离胶
浓缩胶
附录B
(规范性附录）
毒力效价的测定
B.1害力效价的测定方法——用小菜蛾(Piutetla rylostela)作试虫的测定方法B.1.1试剂或材料
标准品:CS-1995,H3at20 000 IU/mg.小菜蛾幼虫：Piutetiaylastella。食用萍籽油。
酵粉:工业用，
维生素心:医用,分析纯。
琼脂：凝胶强度大于 300 g/cm\。磷酸氢二钾：分析纯。
磷酸二氮钾;分析纯。
臻山梨酯-80:粘度 3.5×10-4 m\/s~5.5×10-1 m/s。菜叶粉甘蓝型油菜吋，80℃烘下，磨碎，过80目筛。虚糖：分析纯
纤维素粉 CF-11 。
氢氧化钾分析纯。
氯化钠：分析纯。
15%尼泊金：对羟基萃甲酸甲酯(化学纯)溶于95%酒精，10%甲醛溶液：甲酵(分析纯)溶于蒸馏水。GB/T19567.12004
干酪素溶液:干酪素(BR 生物试剂)2 &,加 0. 01 mnl/L 氢氧化钾 2 mL,8 mL蒸馏水,灭菌。磷酸缓冲液：氯化钠8.5g，磷酸氢二钾6.0g,磷酸二氢钾3.0g,聚11I梨酯-80溶液0.1mL,蒸馏水1 000 mLs
B.1.2仪器、设备
磨口三角瓶：250 mL，具塞。
分析天平,精确到 0. 1 mg。
电动搅拌器：无级调速，100z/min~6000 r/mim。医用术汀。
微波炉或电炉。
振荡器，
水裕锅。
养虫管.9cmX2.5cm
小烧杯：50ml..
大烧杯：500tml.。
试管:18 mmx180 mms
玻璃珠：直径5m
移液管：10mI.5mI.,2ml.,1mL。B.1.3测定步骤
B.1.3.1感染液的配制
GB/T 19567.1--2004
B.1.3.1.1标准品
用分析天平准确称取标准品100.0mg~150.0mg（精确到0.1ng），放人250nl.装有10粒玻璃珠的磨口三角瓶中，加人100ml磷酸缓冲液，没泡10min，在振荡器上振荡3mi，得到浓度为1 1ng/mL的标准品母液(该母液在4℃冰箱中可存放10天)。然后将标准品母液稀释成浓度为1.000、0.500.0.250.0.125、0.0625.0.0313mg/ml.六个稀释感染液。B.1.3.1.2原粉样品
称取相当于标准品毒力效价的样品适量（精确到0.2mg),加100 mL磷酸缓冲被，然后参照标准品的配制方法配制样品感染液，
对有些效价过高或过低的样品，在测定前需先以3个距离相差较大的浓度做预备试验，估计致死中浓度(LC.值)的范围,据此设计稀释浓度，B. 1. 3. 2感染饲料的配制
饲料配方;维尘素 C0. 5 g-于酪素溶液 10 mL,莱叶粉 3. 0 多+酵母粉 1. 5 ,纤维素粉 1. 0 g,琼脂粉2.0g煎糖6,0g，菜籽油0.2mL，10%甲醛游液0.5mL，15%尼泊金1.0mL，蒸馏水100mL。将蔗糖,酵母粉、于酵素溶液、琼脂粉加人治ml.的蒸馏水中调勾。搅拌煮沸，使琼脂完全溶化，加人尼泊金搅勾。将苏云金芽胞杆菌戒分用剩余的10nL蒸馏水调成糊状。当琼脂冷却至75℃左右时与之充分混合，搅勾，置55℃水浴锅中保温备用。取50mL烧杯7只，写好标签，置55℃水浴中预热，分别间每个烧杯中加人1mL对应浓度的感染液，以缓冲液作空白对照。每个烧杯中加人9mL辫化的感染饲料，用电动搅拌器批拌20≤，使每个烧杯中的感染液与饲料充分混勾。将烧杯静置，持冷却凝固后，用医用手术刀将感染侗料切成 1cm×1cm的间料块。每个浓度取 4个饲料块分别放人1支养虫管中，管放人一块，写好标签。B.1.3.3接虫感染
随机取已放置饲料的养虫管。每管投入10头小菜蛾三龄初幼虫，每浓度4管，塞上棉塞，写好标签，在相同何养条件下何养。
B,1.4结果检查及计算
感染48h后捡查试出的死亡情况。判断死虫的标准是以细签轻轻触动虫体，无狂何反应者判为死亡。
计算标准品和样品各浓度的供试昆出死方率,查Abboll 表或计算校正死亡率（X,)。空白对点死亡率10%以下需要校正，大于10%测试验结果无效。较作死率按式（B.1)计算：
T-C、
武中：
T——药剂处现死亡率；
C空白对照死亡率。
...f B. I ?
将感染液各浓度换算成对数值，校正死亡率转换成死亡几率值，带最小三乘法分别求出标准品I值和待测样品ECsr.值，计算待测样品的毒力效价（X：)。毒力效价式(B,2)计算：
式中：Www.bzxZ.net
S-标推品 LCs值
P—标品效价：
Y.样品I.C值。
Xa=SXP
+-( B. 2)
B.1.5允许差
GB/T 19567.1—2004
力测定法允许相对偏差，但每个样品3次重复测定结果最大相对偏差不得超过20%。毒力测定制剂各浓度所引起的死亡率应在10%~90%之间，在50%死亡率1:下至少各有两个浓度。B,2毒力效份测定方法一一以棉铃虫(Heliuthis armigera)作试虫的测定方法B.2, 1试剂和材料
标准品：cS1995.H，20000L/mg，棉铃虫幼虫：Heliothisarmigera。黄豆粉：黄豆炒熟后磨碎过60目筛，大麦粉;过60 目筛。
酵母粉 T.业用。
36乙酸溶液：乙酸(化学纯），溶于蒸馏水，萃甲酸钠：分析纯。
甲醛：分析纯。
维生素℃:医用,分析纯。
琼脂粉;凝胶强度大于 300 g/cm。磷酸缓冲液;同B,1. 1。
B, 2. 2器、设备
分析天平：精确到3.1ng。
电动搅拌器，无缀调速，1001/min~6000r/min。微波炉或电炉。
振荡器。
水浴锅。
组织培养盘：24孔。
携瓷盘:30 cmX20 cm。
磨山兰角瓶：250mL.具塞。
大烧杯：1000ml。
小烧杯：50mL。
试管：18mm×180mm。
玻璃珠：直径5mn。
注射器：50ml.。
标本缸。
恒温培养箱。
B. 2, 3测定步骤
B.2.3.1简料准备
饲料配方：酵母粉12g，黄豆粉24名，维生素心上.5多，苯甲酸钠0.42g，36%乙酸3.9mL，蒸馏水300ml。
将黄豆,粉、酵母粉、维生素 C,苯甲酸钠和 36%乙酸放人大烧杯内,如 100 ml. 蒸馏水湿润备用。将余下200L蒸馏水加琼脂粉内，在微波炉上加热垒沸腾，使琼脂完全溶化，取出冷却至70℃，与苏云金芳胞杆菌成分混合，在电动搅拌器内高速搅拌1min，迅速移至60℃水浴锅中加盖保温。B.2.3.2感染液的配制
称300.0mg~150.0mg（精确到0.1mg）源粉样品、至盛有玻珠的磨口具塞三角瓶中，加磷酸缓冲液100ml.,浸泡30mim，在摄荡器上振荡！min即成母液，于分析天平t:称敢150.0mg~300.0mgGB/T 19567.1--2004
标准品（精确到0.11mg），如上法制成母液，将样品和标推品母液用磷酸缓冲液以一定的倍数等比稀群，每个样品和标推品至少各稀释5个浓度，并设一缓冲液作对照，每一浓度感染液吸取3tml.至50mL小烧杯内待用。对照吸取3mL磷酸缓冲液。H.2.3.3饲料和感染液的混合及分装用注射器吸取27mL饲料，注人上述已有样品或标催品感染液的烧杯内，以电动搅拌器商速觉拌.：mil，迅速倒人组织培养盘上各小孔中（倒人录不要求：一致，以铺满孔底为推）。凝固待用。B.2.3.4接虫感染
丁26%℃~30℃室温下，将未经取食的初孵幼虫（孵化后12h内）料人直径20cm的标本缸中，静待数分钟，选取爬上缸口的健康幼虫作供试虫，用毛笔轻轻地将它们移入已有感染何料的组织盘的小孔内，每孔一头虫。每个浓度和空白对照皆放48头虫，用塑料薄片盖往，然后将织织培养盘逐个叠起，拍橡皮筋捆紧，竖立放于30℃恒温培养箱内培养72haB.2.4结果检查和统计分析
用肉眼或放大镜检查死、活虫数。以细签触动虫体，完全无反应的为死出，计算死亡率。如对照有死亡，可查Abhott校正镇表或按式（B.1)计算校正死亡率。对照死亡率在6%以下不用校正，%~16头之间需校正，大于！3次测试验无效。将浓度换算成对数值·死产率或校正死亡率换算成几率值，游最小二乘法分别求出标准品和样品的LC值，按式（B.2)计算毒力效价。B. 2. 5允许差
毒力测定方法的允许相对偏差要求与3.1.5相用。B,3毒力效价测定方法—以甜莱夜趣（Spodopteraexigua）作试虫的测定方法B.3.1材料和试剂
标准品.CS.2002.Hz.2c000It/mg甜菜夜峨幼虫：Spodopteraeriguu。黄豆粉：黄豆炒熟后磨碎过60日筛。酵母粉（200月）：工业用。
维生素C医用.分析纯。
15弱尼泊金：对羟基苯甲酸甲酯（化学纯）溶于95%酒精。10%甲醛：甲醛（分析纯）溶于蒸馏水。琼脂：凝胶强度大于300g/cm
蒸馏水。
B.3.2仪器
分析天平：精确度0.1mg
电动揽拌器：无级谢速，100t/min--600cr/min。微波炉或电炉，
振荡器。
水裕锅：
组织培养盘：24孔。
糖瓷盘：30cm×20cm
鹿门—角瓶:250 ml. 具塞。
大烧杯：1000ml.
小烧杯：50 mL。
试管，18mm×180mm。
玻璃球：直径5mm。
注射器：tr:1.
标本缸。
恒温培养箱。
B. 3. 3测定步骤
B. 3.3. 1词料配方
GB/T 19567.1--2004
黄豆粉32g（60月），酵母粉16g（200口），琼脂6，维生素（2g，15%尼泊金5.7ml10%甲醛4 ml,水 400 ml-.
将黄豆粉、酵母粉、维素（、尼泊金和10%甲放人人烧杯中，加人150mI.水，混勾裔用。将余下的250ml水加人琼脂，在微波炉上:加热至沸游，使琼脂完全溶化，取出冷却至70℃，与苏云金芽胞杆菌成分混合，在电动搅拌器内高速搅拌1min，迅速移室60℃水济锅中加益保温，B, 3.3.2感染液的配制
称取（S6-2002标准品150.0m~300.Cg（精磅至0.mg）,置于250mL带有毁璃珠的=角瓶中,加人 100 mL磷酸缓冲被-浸泡 10 min,在漩涡振葛器上娠荡 1 min后即为标准品感染母羧。称取100.0mg~-150.0mg原粉样品，置于250mL找有玻璃珠的=角瓶中，加人100mL磷酸缓冲液，浸泡l0min，在滋涡摄荡器.上振荡1min配制成样品感染母液。以两倍稀释法将标准晶和样品母液稀释成一定浓度梯度，个样品至少各稀释5个浓度梯度，每一浓度感染液吸取3ml.至50mL小烧杯中待用。对照吸取3ml.磷酸缓冲液，B.3.3. 3饲料和感染液的混合及分装用注射器吸取27ml.饲料，注人上述已有样品或标准品感染液的烧杯内，以电动搅拌器搅拌n.5nin，迅速倒人组织培养盘上各小孔中（倒人量不要求一致，以铺满孔底对谁），凝固待用，B. 3. 3. 4接虫感染
于26℃～30℃室温下，将未经取食的初解幼虫（解化后12h内）抖人直径30cm的标本缸中，静待数分钟·选取爬上缸口的健康幼虫作供试虫，用毛笔轻轻地将它们移人已有感染饲科的组织盘的小孔内，每孔一头虫。每个浓度和空白对照皆放48头虫，用塑料游片盖佳，然后将组织培养盘逐个叠起，粥橡皮筋捆紧,竖放于 25℃培养籍内培养72 hB.3.4结果检查和统计分析
用肉眼或效大镜检查死，活虫数，以细签触动虫体，完全无没应的为死出，计算死亡率。如对照有死亡，可查Abbott校正值表或按式（B.1)计算校止死亡率。刘照死亡率在6%以下不用校正，6%-15%之问需校正，大于15%则试验无效。将浓度换算放对数值，死亡率或校正死亡率换算成儿率值，用最小二乘法或有统计功能的计算器，分别求出标准品样品的I60，接式（B,2)算毒力效价。B,3.5允许差
毒力测定方法的充许相对偏差要求与B、1.5相同。B.4对播入其他有效成分的可疑样品的检测对于某些符合正文3.2分析指标的可样品，可通过测定原粉样品中跑晶混合物的声力资献率，判定样品中是否掺人其他有效成分，B.4.1原粉中不同成分的分离
用丙酮将原粉帮释成10mg/mE的溶液，4下5009r/min离心10min，保留沉淀组分，用等体利！的丙丽悬浮，南进行离心，共离心洗涤3次·保留沉淀组分，用等体积的蒸水恐浮沉淀组分，离心并保留沉淀组分，共进行3次离心洗涤，保留沉淀组分，该流淀组分即为原粉中的胞品混合物。B. 4. 2 毒为效价的测定
按B.1，B.2或13,3的方法.对单位质量原粉及项粉的沉淀组分（胞混合物）分别进行毒力效价溅。
GB/T19567.1—2004
B.4.3样品中是否摧入其他有效成分的判断依据原粉中胞晶混合物的薛力贡献率（X）来判概原粉样品中是否掺人其他有效成分：毒力贡献率按式(B.3)计算：
X =—x100%
式中：
I-单位质源粉中跑晶混合物的薛力效价：T单位质源粉的毒力效价。
若原粉中胞晶混合物的毒力贡献率小于70%.则判定此原粉样品不符合标雅。....( B. 3)
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