本标准规定了食品中胡萝卜素的测定方法——高效液相色谱法及纸层析法。本标准适用于食品中胡萝卜素的测定。本方法检出限：高效液相色谱法为5.0mg/kg(L)，线性范围为0mg/L～100mg/L；纸层析法为0.11μg，线性范围lng～20ng。 GB/T 5009.83-2003 食品中胡萝卜素的测定 GB/T5009.83-2003 标准下载解压密码：www.bzxz.net

1C5 67.040
中华人民共和国国家标准
GB/T5009.83—2003
代H/T12389-.1S9
食品中胡要卜素的测定
Delerminatinn nf carotcnc in foods2003-08-11发布
华人民共和国卫生部
中国国家标准化管班季员会
2004-01-01实施
本拆准代片GB/1238913302食物中胡变宽的谢定：本标推与BT1238V-1990相比上要悼收如下修改了标难的中定名称.标准中文名称改为会品中胡要下索的定》：增加高效液相包增法作为募一法；GB/15009.85—2003
按GB/120001.4一2001帜理编T规州：第4部分：化学分析方粘对原标准的结行了修改：
产标准由中华人民共和国生部据出并归二，公标准第一法为卫生部愈卫三监督憶验所免去起草，北京市卫生防安站、十国种所医学科学院环亮“牛监通所多加起中.
本标准第一法的上要起草人，锈祖英，李安学，张山平、孙痒，蛇小元。本标准第法由国预防医学科学院管养上会品兰研究所市责起本，入标准第二保的上要起草人：赵忠林，下光业、干、下润栋：原标准十190年苦次发，太次为第次修司。ul
CH/T 5009.83—2003
献获下意足人体重要养事，它是维生志A的的体，是保食的承要分，GH蒙下素相当十1维素，国十批准3下落加人油及影化食品中，口能许证人饮料，黄油、冰淇淋等14种食品中。1S93年批润营卜享作为营关白强剂润人姿对儿食品，乳制品：中于09)年制定食购中月效需的遇定法（R/T12%—199》柔核项，本法幅订提出快违，尚使，谁确度，粉离要教的高效随析色说状创定食品中子胡落下素，产为第一法。原食约中的要下素的测定方法(GB_23别一1心>为第一法，5n2
1范围
食品中胡菱卜素的定
本林准规定了食品中韧等小离弱说方播一—高效液柜色济法及纸层折法，本标准活同下食中胡下教的测定。B/T5009.83—2003
本方法检出限：高效液相色增伙步.0/g>，裁性范为m/~/纸层所运为.11线性范围120ng
第一法高效液柜色谱法
2原理
试样中的2胡尊下素，用石间继一丙配（8C一2J）准合激提取，龄三氧化二错对球化·然后以高效液相色谱法定，以保留时间定性，峰高或哦面积实量3证别
3. 1台谢醛沸程~ic.
3.2甲醇：色潜纯
3.3丙醇.
3.4山皖。
3.5四氢味响，
3.6一然甲烷。
3.7乙，色谱线.
3.8三载化二知尽析月，1）口~2日，140℃22取凹放人干梁器许用3.9含确外率烷降限：猎确你取烘1n1，用异辛烧籍解并稀择至251nL，提与各月，3.10-胡下系杯维增来，精确杯取1号2-胡萝小素加人少其一激中烧落解，然后用石油溶关流涤烧杯数次游做转人L容最中，石范定率，装这为/m，于8嘴存各。3.11族要下标准缺：精确称取3-胡装下旁12.5站于说杯中，先，卫少量二点中烷穿，再用油够萃解并说涤增杯整次.论没转人三Cnl.穿量施，用石油醛定穿，浓度为250/mL，一13能存各用。两个月内稳定：根据广需浓政收一完血的3制事下素标带限用我动相新释成1g/m..3.12P尊下素标准使用效：分别吸取乱惠索标增穿变（,5，1,0.2.C.3.3.4.0.5.0为L于10ml容道瓶中，各加移动相至刻度，岳后，即得期即，案标准我列分别合岁下素5，10，20.岁，40sePg/mL.
3.139-献尊小素构体：你取！，费下系于10客盘瓶中，充入氧气忧速人含换异辛烷熔孩10m1.益士西子，在距W的更光灯3Ucm处医射5m1.然虐在费米处用实空家抽去溶剂.用少负氧中烷净解带晶，用不降容解井定穿至度，浓度为5/，13保存。4仅器
4.1高效液相色消议，
4.2离心机。
4.3旋转蒸发议，
GB/I5009.83—2003
5分析步质
5.1试择提取
5.1.1类食品，你联10.Cg总样十25mL带塞或商小好来诚中制剪下求盘少，最样且可以多些）用右洲融或石种醚十丙酮（8V+2C>混含满带棉拐-区，吸收英色袋体并特人然发留中，更摄联占至连取液无色。含关提取被.于流转蒸发器工微发至干（水温准30饣）5.1.2液体食品：数10.CmL试Y于25)T.分液漏-中.加人油融十丙酮（80-2U)20ml.提取，然后静互分层，将下层水陷流效人分分浓渐4户异授，白至提取做无色为，合牛提收液，于放旋转发器上蒸发至11水溶湿质为40亡5.1.3类食片限表10.Cg以25.带座丘等中，加人石微秘+丙8C+20）频取，战发技取，白单上层提以液尤色，会并提安资.于构转蒸发益上满发率：。5.2剪化
存，，1.5.1.2，，1.3的式样老敢液线活，用少量石消整穿解，签后进行氧化铝层折：军化识性为1.5cm（内径）火1cm（商），先用洗脱液丙潮一石询版（5十95>洗氧化铝杜.然后再加人竞热式群益收液的落液，月断1右注能<5十S5洗脱-胡蒙下系，空制流速为2)滴/rim，收集于1r容量施：用洗脱液定容率刻.3.45Mm激孔滤膜过想，鸿液牛F[PLC分析用。5.3测定
5.3.1HPLC事专条：
色诺柱：Spheriso:hC住4.Smr.×15Jnur.r流动相，甲醇—艺肺（S.
流迎：1.7f./i-1
歧anm。
5.3.2试详测定：吸收5.2中已纪化范沿液20.依法操格，从标准由线食得或回与求好所含3初势下素的最。
5.3.3标准曲我：分别进标准位用液29L，进行HPL分析，以降面积对-划下富放度作标#线
6结果计算
见成)。
VX×*00n×1cC8*1 00
试-量位克每升）或/
一定穿的体概,单件为意开(L)
\——试样中8素系的浓理（在标线上查得），单位为微意每必升（吨/1.）一试样内量，单检为克(实旁升）m节结巢集南两位H效数字。
7情寄度
在革复性系件一获得特期次独立测是罚果的绝差值不行过算术平母侣的1，ut
8原蛭
第二法纸屏析法
GB/T 5009.83—2003
试样经过化后，用石泊能报取食品中的明氯下索改其他拓物色栽，以石油醛为展开剂进行纸层所.明剪下末极性装小，移动速应最快，从与其俊负系分电.剪下含部要下求的区带洗脱于50m9试剂
9.1名油醛（沸程心亡~60%：）同时是质9.2氢氧化评熔液（1+1，收50氢摄化钾奔十mrcl.水.9.3无水乙再，不得含有臣类物既.9.3.1拾龄办法，
9.3.1.1银氢激：加浓效水」$%硝融银液中，全乳化链沉淀降解，加人2.5mu/氢氧化钠暗较数滴如发牛沉淀·计加浓润水使之降軒9.5.T.2银能反应，加2根氯液下式普内，人几乙醇插句，加人少冶2.5mo1/氛算化铭熔械加热。如乙萨中无盛，叫没有渠沉淀：否，有组镜反座9.3.2脱醛方达，取2x确牌根降」少量水取4氢氧化纳籍源之酸将两者倾人7户，略处放胃两天（不时据或，促进反应.过滤，这被领人源谓年中蒸罐，弃左闭的心，乙醇中含醛较多时，销践能用量适当培如，
9.4无水疏销.
9.5β制典下家标准落液
9.5.1?明尊下家标准备液准确称收55.0mg制惠下索标准第于手1m.m.三氧甲烧法废约为500/ml准确测共浓度.标定浓，就的方法女1：取标准吧备没10).加工巴烷3.00T混句。测其吸光度值，比色杯原度为」cm，以正己烧为空白.人对技K4心n.半行则定一价.均佰.按式(门)计节游液浓线：
武中：
X，要，亲标推海液浓理，单位火尚克每室升（I)A
爱光房值
已司尊下素在F山答饿中人射光波长4503m，比色杯原度1em，溶载范旺为！m/.所吸光系数为0.263号
测定过作中取据倍效的换算系效。9.5.2以要下案尔使用：特口标定的标准液用不测碰准确稀释10倍，使你增并落微拍当于5站光水保存冰榨！
替告：遇常标准品不能全溶解于有机落剂中，必要时应先将标准品电化，再用有机零剂提取，用蒸水漆至中性后，浓翁定客·再进行标定，由于胡募卜事很穿分解，所以每次使用前，所用标准品均需标定·在测定试样时需带际准品同步操作。15仪器
10.1实验些常月设各。
iB/1 5009.83—2303
10.2鼓第层衍
10.3分光光度：
10.4整转燃发器兵配会150扣L速形瓶。10.5瓦益水游误：
10.6笔化日调装滑，
10.？点样端或谢益注点器。
10.2缺跃，18rm义)cm定环，央座或户速：11分析步骤
以下止张温东光案件一进行，
11.1试样预处理
11. 1. 皂化
取适量试样，相原样：含胡岁素约~勾浆，食试栏视期变素含i定恼物油和高脂肪试样取量不超型13，巴1r::r:L逆案准形瓶中:加脱醛之醇)m1.,再:1JmL多氧化钾等覆111），凹流加热30min然后用水侠之迅递冷虾，电化后试样月石汕醛提取，直至长取减无些为E..每次提取在社醛用量为15m1.-.25可L：11..2洗涤
将良化后试单提报附月水谨至中，格投取液通过准有营无水谢酸钠的小漏，漏人球形能，历心单石注献分激次冷分难游斗和无求硫酸够层内的色求，洗涤湾井人球形版内。1. 1.3率缩与定容
将上逆或形瓶内的提取液丁版然蒸发器上减压游发·求浴温度火0，换发卓的1时、收下球形报，H氮气吹十，立即闻人2.Jo)nI.石洲醚定穿，各层折用。1.2纸层析
11.2.1点挡，在9m：3m滤纸下端臣底该41F.2.2展开，传工所点样浓白然择发干后，将将抵者成阅萨收，置先石油醛链新的号断证中，进行上行展正、
11.2.3洗脱，于胡惠下意与其他垒索完金分并旨，取山滤红，良然挥发F在汕醛，瓶位手展并剂前沿的下系层折带前下文即故人盛有5：圳性的只忘试咨中，用力振据，使制尊下完全游人试中。
1.3测定
H】m比色坏，以池醛调点，下波长下吸光度值：以其佰从称杯准线十查日部下素的合录，供算所使用。
11.4标准工作曲践绘制
tB/15009.23—2003
表3胡萝下标准信用渡（依0u5/m3.)1.002.00.3.C0、4.00.6.00.8.CCml.分别置于10T其要继形瓶中，按试托分折步象进锁处州和链层新，点样体积1CmL.标准曲线咨点含做次为2.5.5.0.7.，10.3.0、2,0*8为测定低含量试样，可0至.5实做几点，以3-品卜素含量为微坐标：以吸光衰为纵坐标绘低标准制线。2结果算
试择中胡菜下案量按式3计节，
X=mxV*
试样中故索的量以要系计），单位为微每克；x
“-在际难证线上查役的缸安下案质血，单位为微点()：——点样体祝,总位为毫升(rar.l;V：试样提取液着后的定管体积，单位为升（mL)：试届设迫件为定g)。
计单结果保显三位有效数字此内容来自标准下载网
13精密度
在重友性条件下效得的内饮抽守测定结果的跨对关俏不得过单术平坊值的1：Gu:
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