本标准规定了食品中栀子黄色素的高效液相测定方法和薄层色谱法。本标准适用于饮料、酒、糕点中栀子黄的测定。第一法检出限为3。2μg/mL；标准曲线线性范围为0ng/mL～200ng/mL。 GB/T 5009.149-2003 食品中桅子黄的测定 GB/T5009.149-2003 标准下载解压密码：www.bzxz.net

FCS67.040
中华人民共和国国家标准
GB/T5009.149—2003
我G/17335.--1998
食品中子黄的测定
Dctcrminatian of crocln in foods2003-08-11发布
中华人民共和国卫生部
国国家标化管理琴货会
2004-01-01实施
本标难我替GB/T17535—1998食品中了黄的测定。(H/T5009.149—2003
第4部分化学分析方法3对原标准的结转进行本标准按服GR/T23001.4—2091-标准编写规则2了修改。
本标游由中华人出共和国生部提出并妇口。本标准负资起草单位，户司预防医学科学院劳款卫生与取业病谢究所，参加表单单位，卫学部食品卫坐监督检验所.
本标准上要起苹人，丰严飘，土梅、杨祖英。原标准干1S9年首改发布，本次为第一次修订253
G1/ 5009. 1492003
柜子黄作为愈品若色剂已经列人GB2760--1SS6食品凝加剂使月卫生标准，最大使用整0,=/kg 5
1范围
食品中板子黄的测定
本标准刻定了宽量中拒子黄色煮的高效浪相别定力法和层色谱法。本标准适用于饮料、酒，糕点中板子黄的测定第一法检山限为a.?u/ml：标准曲我续性也围mg/ml~22g/ml。第一法高效液相色谱法
2原理
GB/T 5009. 149—2003
试样中柜子黄经提疗化后.用高效饿明色谱法测定，以保里时间定灶、咚离定最，枪子武尼糖子黄的土要成分，为对照品。
3试刻
试剂没分祈纯，水为藻询水
3.1甲萨
3.2石油醛65~。
3.4二叔干烷，
3.5要黄色素
3.柜了成。
3.7子试标洲落夜：称攻2.75mg了低标准品，用甲醇游解，并月手醇稀释率100ml港句，即得27.5g/mL恒手.
3.8子标准使用液，分别吸取根子武标准液0.2.0.4.0,6.0.A.0mT.了10mL容量瓶巾，加币序定容至:0mT..得3,1.5,11.1,13.5,22.Ug/mL的子试标准系划游液。4倪善
4.1小型粉机.
4.2指滞水溶。bZxz.net
4.3高效液相色谱系统：Wa1er'sM510泵.L'6K进杆器，岛池RF-535。荧光检测器，Bluchip/PC计钟礼和Baeline81C色谐控制程序，5分析步霸
5.1试样处理
5.1.1料，将试样蕴熟，搅并除去二氧化盖或超户总气，斜勾后.通过微孔您膜（.、Am过滤，滤液备作HPI人分析用。
5.1.2酒；试样通过微孔池碘过.滤商备HPLC分析用。5.1.3黑点取1ng试样放人1U0m的医您版牛，用50mL石油醛加热向流1min，置室湿砂芯漏斗过随，用亡叫洗谈残渣5次，洗液并人越减中，减压浓缩石油酵提收离，渣人通风橱至无石池雕味。用中静提取3次--5次，每次30ml.直至乘取液无枪子黄期色，用秒芯温斗过德，够液通过29
GB/F5009.149—2003
微孔滤膜过能，滤糖贮十冰箱各同，5.2测定
5. 2. 1HPLC 参考条件
色谱柱:粒度 5 um ()DS Cx 150 mm×1. t mm:流动柑：甲醇一水（35-55)
流速:0.3 mL/min
波长，240m，
5.2.2标准曲线
在本实验条件下，分别注入拖子试标准使用液,2,4,，T.,进行IITL心分析，然后以蜂高对施子代微度作标准曲线。
5.2.3试样测定
在实验条件下，注.人3uT。5.：试样处型液，进行HPLC分析，取其峰与标难比较，测得试性恒了成含量。
6 结果计薄
按下试Ⅱ算；
式中:
×1000
试样中子黄色素的含，单位为克每千克（g/kg）A—进样波中忆了的合盘，单将为微克每意并（g/mL)V-试样制备商体积,单位为培升(ⅡL);m试样质量，单位为克(g)。
7精密鼠
在重复性象件下获得的两次独文测定结果的绝对差值不得超过5%，第二法薄厚色谱清
8原理
试样中恒了黄色素用有机游剂提取，并经过纯化处理，去除下犹物质，饰纤点样展升后，在TIV254HT灯下是黑色斑点，与标准比较进行定性、及概略定量。9试剂
所用试剂均为分析纯，本为蒸确水，9.1 甲醇。
9. 27醇.
乙酸乙酯。
两酮。
三额甲烷，
硅胶心F251.薄层色谱用
展开剂：乙眼乙酯十丙酮+甲醇十水（5+5-111)。9.8
9. 9展开剂,三氟甲烷十用醇(6十3)。10仅部
10.1全塘浓蒲器.
10.2遵层板涂布器。
10.3玻板,1 cmx20 cm.25 enX20 cmm10.4层析可。
10.5UV24nm荧光灯。
10.6微量注射器。
操作方法
11.1试样处理
将、饮烈、蛋样品理后进行TLC检识、见11.2.2展刀结果.月/T5009.149—2003
11.1.1酒：收式样100mL，减压浓缩单无酒味，然后用乙酸乙醇益取，每次30mL，萃收：次~5次，至无柜子黄渠é为正，合并苯取瓶，减压浓缩至无乙酸乙酯味。约剩20m为正，此变留作薄尿分析月，
11.1.2饮外：取试样100mL用乙酸乙需萃收，每次50mL，萃敢3次~5次，至无坛了黄额色为止，合并举液.减压浓萌差无之酸艺醇味，药剩20拉L，此落删作薄尿分机用。11.1.3蛋糕：栋取1U.！g已粉悼均句的试样，加海处少许，混匀，用热风吹干试样（用于模山十澡即可），加人50mI.石油酷捞拌，放置片刻，弃去石油醚，如此反复处理三次，以除去脂肪，次下后研潮，改入索式提取器，用甲美取色素，直到无矩了黄色表为止·直至色素全部提完，胃水裕浓缩至约：m此液留作博层层析用..
11.2划定
11.2.1点档：取市售硅胶GF354荧光板，高板底边7<1处点试样提取减0.5μL，板的方过点2L柜子英色豪标准齊度。
11.2.2展开，将11,2.1已点好样和标准板.用5.8，3.9愿开剂展并，持概子黄色明显分并后收出，晾下，与标准斑点比较：插于黄R，值为0.64和L.50。而要黄色紊为0.11心，_5.试样与标品的点的及但值致，叫证明试样中的丝系为子黄色表.261
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