本标准规定了测定羊毛水解物中胱氨酸含量的方法。本标准适用于未经氧化、还原和染色的洗净纯羊毛、毛条、毛纱、毛线和织物。 GB/T 12492-1990 羊毛水解物中胱氨酸含量的测定 比色法 GB/T12492-1990 标准下载解压密码：www.bzxz.net

中华人民共和国国家标准
羊毛水解物中胱氨酸含量的测定比色法
Determination of cystine content of woolhydrolysates by colorimetry
本标准等效采用国际标准ISO2913-1975《羊毛酸的含量》。
主题内容与适用范围
GB/T 12492-90
用比色法测定羊毛水解物中胱氨酸加半胱氨本标准规定了测定羊毛水解物中胱氨酸含量的方法。本标准适用于未经氧化、还原和染色的洗净纯羊毛、毛条、毛纱、毛线和织物。2原理
羊毛纤维在硫酸溶液中水解生成胱氨酸，再用焦亚硫酸钠分解胱氨酸，生成的半胱氨酸与十二磷钨酸作用产生蓝色溶液，溶液颜色的深浅与水解物中胱氨酸含量成正比，通过对蓝色溶液吸光度的测定，并与标准胱氨酸溶液吸光度比较，可计算出羊毛纤维的胱氨酸含量。如果被测试的羊毛含有比正常高得多的半胱氨酸量，可按附录A(补充件)进行定性检验。3试剂
测试所用的水为蒸馏水或去离子水，试剂为分析纯。3.1c(HzSO)=2.7mol/L的硫酸溶液：密度为1.84g/mL，95%~98%硫酸150mL加到850mL水中。3.2乙酸盐缓冲溶液，pH5.6：209g无水乙酸钠，24mL冰乙酸和0.001g硫酸铜（CuSO。·5Hz0)溶于水中，并稀释到1000mL。
3.3十二磷钨酸溶液：在1000mL三角烧瓶中放入200g钨酸钠，加入400mL水，再加入100mL85%磷酸，装上冷凝器，回流1h，移去冷凝器，逐滴加人漠水，直至溶液由亮黄色变成棕褐色为止，煮去过量的溴（15~~20min），过滤，滤液移入1.000mL棕色容量瓶中，用水稀释至刻度。3.4焦亚硫酸钠溶液：10g焦亚硫酸钠溶于水中，移入100mL棕色容量瓶中，并稀释至刻度。溶液超过20d，需重新配制。
3.5胱氨酸标准溶液：0.1000g胱氨酸（生化试剂）溶于20mL硫酸溶液（3.1)中，移入250mL棕色容快瓶中，用水稀释至刻度（现用现配）。3.6二氯甲烷。
采用说明：
1)将ISO2913--1975文本标题中胱氨酸加半胱氨酸含量测定改为胱氨酸含量测定。国家技术监督局1990~09-21批准1991-06-01实施
4仪器
分析天平：精确度为0.0002g。
称量瓶。
4.3鼓风烘箱：105士2℃。
4.4干燥器。
4.5棕色容量瓶：25,100,1000mL。4.6移液管：1,2,5,10,15mL。
4.7三角烧瓶：100,1000mL。
GB/T 12492-
4.8玻璃砂芯漏斗：容量为35mL，滤片平均滤孔为40~80μm。4.9分光光度计或最大吸收波长在720~800nm的滤色光度计：在·0.2~0.7范围内的吸光度读数精度为0.01。
4.10索氏萃取器。
5试样制备
除去试样中植物性物质和其他杂物，样品如织物可拆成纱线，并把纱线剪戒1cm长度，毡类织物则剪成小块。然后，把试样用滤纸包好放入索氏萃取器中，用二氯甲烷萃取1h（至少循环6次）。取出试样，待试样中二氯甲烷挥发后，把试样暴露24h后待称重。6操作步骤
6.1试样称量
6.1.1称1±0.0002g试样两份，用以测定干燥重量。6.1.2称0.3±0.0002g试样两份，为生成水解物用以测定胱氨酸含量。6.2绝干重量测定
把试样（6.1.1)放入已达恒重的称量瓶内，瓶盖放在瓶边，放入105士2℃的鼓风烘箱中，烘干后（-般需2～4h)盖上瓶盖，移人干燥器内，冷却，称重，重复上述操作直至达到恒重，算出平均干重W1，然后按比例计算水解物试样的干重W(W=0.3XWi)。6.3水解
把试样（6.1.2)分别放入100mL三角烧瓶中，加入8mL硫酸溶液（3.1），然后将三角烧瓶放入105士2℃烘箱中，每隔0.5h摇动一次瓶子，使试样浸润于硫酸溶液中发生水解反应，待试样充分浸润于硫酸溶液时（约需2.5～3h）可停止摇动，使试样继续水解，10h.后取出三角烧瓶，冷却至室温，把瓶中的试液全部定量地移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。然后用干燥的漏斗进行过滤，滤液至少50mL，作测定其吸光度用。
6.4吸光度测定
6.4.1采用10mm的比色池，最大吸收波长选择720~800nm区域。6.4.2以蒸馏水作为测定吸光度时的参比溶液。6.4.3试样水解液中半胱氨酸吸光度的测定。用移液管吸取5mL滤液置于25mL容量瓶中，加入15mL缓冲溶液（3.2），再加入2mL十二磷钨酸溶液（3.3)，充分混和，放置20~~30min，用水稀释至刻度，测定其吸光度，测定两次，取得吸光度平均值再除以5得A值。
6.4.4试样水解液中胱氨酸、半胱氨酸吸光度的测定。用移液管吸取1mL滤液移入25mL容量瓶中，加入5mL缓冲溶液（3.2），1mL焦亚硫酸钠溶液（3.4)和2mL十二磷钨酸（3.3），充分混和，放置20～~30min，再用水稀释至刻度，测定其吸光度，测定两74
次，取得吸光度平均值为B。
6.4.5胱氨酸标准溶液吸光度的测定。GB/T 12492-此内容来自标准下载网
用移液管吸取1mL胱氨酸标准溶液，按6.4.4进行测定，测定两次，取得吸光度平均值为（（值必须在0.56～0.7范围内）。
分析结果的计算
25×c:w×100
式中胱氮酸含量，%；
A--—半胱氨酸吸光度；
胱氨酸加半胱氨酸吸光度；
C-标准胱氨酸吸光度；
\水解试样绝干重量，名。
对照试验
每次系例试验用未处理原样作对照试验，9试验报告
未处理试样胱氨酸含量；
各处理试样胱氨酸含量；
注明按本标准方法测试。
GB/T12492-90
附录Ａ
定性试验
（补充件）
如被测试的羊毛含有比正常高得多的半胱氨酸量，可按下述定性试验进行检验。未染色羊毛
将样品浸入1%亚硝酰铁氰化钠溶液中，完全浸透后，取出，夹在滤纸间干燥，并暴露在氨气下，样品呈红紫色表示半胱氨酸残留物存在。A2羊毛水解液
取2~3mg羊毛水解液放入试管，加入2～3滴1%亚硝酰铁氰化钠溶液，并滴加浓氨水，立即变成红紫色，表示半胱氨酸残留物存在。附加说明：
本标准由中华人民共和国纺织工业部提出。本标准由纺织工业部标准化研究所归口。本标准由上海毛麻纺织科学技术研究所负责起草。本标准主要起草人徐壁城、储国强、沈美华、钱瑞莲，76
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