ICS 71.100.10 Y42 DB37 山东省地方标准 DB37/T3037—2017 化妆品中乌头碱及其盐的测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of aconitines and aconitine salts in cosmetics by liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2017-10-25发布 2017-11-25实施 山东省质量技术监督局 发布 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由山东省质量技术监督局提出。 本标准由山东省化妆品标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省产品质量检验研究院、山东省食品药品检验研究院。 本标准主要起草人：周莉莉、崔玉花、李丽、高勇、邹惠玲、许世明、张卉、祝建华。 1 范围 本标准规定了化妆品中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱及其盐的液相色谱-串联质谱测定方法。 本标准适用于化妆品中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱及其盐的定性确证和定量测定。 本方法中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的检出限均为2.0 μg/kg。 2 原理 试样用少量浓氨水溶解后，以乙腈提取，经冰水浴超声处理并离心分离，采用液相色谱-串联质谱法测定，外标法定量。 3 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为二次去离子水或重蒸水。 3.1 乙腈：色谱纯。 3.2 氨水。 3.3 0.05%（v/v）氨水溶液：取0.5 mL氨水，用超纯水稀释并定容至1 L。 3.4 乌头碱标准品（aconitine，CAS号302-27-2，C34H47NO11），纯度≥98%。 3.5 新乌头碱标准品（mesaconitine，CAS号2752-64-9，C33H45NO11），纯度≥98%。 3.6 次乌头碱标准品（hypaconitine，CAS号6900-87-4，C33H45NO10），纯度≥98%。 3.7 标准储备溶液：分别称取标准品，用甲醇溶解配制成100 μg/mL标准储备液，-18℃避光保存。 3.8 混合标准中间溶液（1 μg/mL）：分别取1.00 mL标准储备液于100 mL容量瓶中，用甲醇定容。 3.9 混合标准工作溶液：用初始流动相稀释混合标准中间溶液，现用现配。 3.10 0.22 μm有机相过滤膜。 4 仪器和设备 4.1 液相色谱-串联质谱联用仪（配电喷雾ESI源）。 4.2 分析天平（感量0.1 mg和0.01 g）。 4.3 涡旋混合器。 4.4 超声波提取器。 4.5 离心机（≥3000 r/min）。 5 样品制备 称取化妆品试样0.5 g（精确至0.01 g）于离心管中，加入1 mL浓氨水振摇，涡旋1 min后加入10 mL乙腈，在冰水浴中超声提取10 min，3000 r/min离心5 min，取上清液过滤至刻度管中。 氮吹浓缩至少于5 mL后，用乙腈定容至5.0 mL，再用0.05%氨水溶液定容至10.0 mL，涡旋混匀，经0.22 μm滤膜过滤后供仪器分析。高含量样品可适当稀释后进样。 6 测定 6.1 标准工作曲线制备 以空白基质提取液配制不同浓度混合标准溶液，按规定条件测定并绘制标准曲线。 6.2 液相色谱条件 色谱柱：C18柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）或等效柱； 流速：0.3 mL/min； 柱温：40℃； 进样量：5 μL； 流动相及梯度洗脱条件如下： 0.00–1.00 min：A 50%，B 50%； 1.00–3.00 min：A 50%→80%； 3.00–4.00 min：A 80%； 4.00–4.10 min：A 80%→50%； 4.10–6.00 min：A 50%。 6.3 串联质谱条件 参见附录A。 6.4 液相色谱-串联质谱测定 在相同条件下测定样品与标准溶液，按保留时间及特征离子进行定性确证，并采用标准曲线进行定量分析。样品保留时间与标准溶液偏差应在±2.5%以内，同一化合物应满足母离子及至少两个子离子特征。