ICS13.060.20 X50 DB65 新疆维吾尔自治区地方标准 DB65/T3970—2017 蔬菜和水果中17种植物生长调节剂残留量的测定液相色谱-串联质谱法 Determination of 17 plant growth regulators in fruits and vegetables by LC-MS/MS地方标准信息服务平台 2017-01-10发布 新疆维吾尔自治区质量技术监督局2017-02-10实施 发布 前言 DB65/T3970-2017 本标准依据GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编写。本标准由新疆维吾尔自治区分析测试研究院提出。本标准由新疆维吾尔白治区农业厅归口。本标准起草单位：新疆维吾尔自治区分析测试研究院、新疆维吾尔自治区标准化研究院，本标准主要起草人：曹雪琴、杨中、宋良辉、陈国通、王爱霞、赵楠、李芳、郑健琨、胡小明、张磊、李统中、杨飞、文娜、罗建民、芦静、战国利。地方标准信息服务平台 DB65/T3970—2017 蔬菜和水果中17种植物生长调节剂残留量的测定液相色谱-串联质谱法 1范围 本标准规定了蔬菜和水果中17种植物生长调节剂残留量的液相色谱一串联质谱测定的原理、试剂和材料、仪器和设备、分析步骤、结果计算和其他等。本标推用于蔬菜和水果中矮壮素、氯吡豚、赤霉素、脱落酸、2,4-二氯苯氧乙酸、3-吲哚丁酸、2-萘氧乙酸、3-吲哚丙酸、4-氯苯氧乙酸、1-萘乙酸、3-吲哚乙酸、4-氟苯氧乙酸、多效唑、烯效唑、6-基嘌呤、噻苯降、缩节胺17种植物生长调节剂残留量的定量测定。2规范性引用文件 下列文件对丁本文件的应用是必不可少的。凡是注H期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T27404实验室质量控制规范食品理化检测3原理 试样经含1%乙酸的乙睛溶液提取，盐析离心，用C净化剂和无水硫酸镁净化，液相色谱一串联质谱仪检测蔬菜和水果中17种植物生长调节剂，外标法定量。4试剂和材料 准信息服务平台 除另有规定外，所用试剂均为分纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1试剂 4.1.1甲醇：色谱纯。 4.1.2乙：色谱纯。 4.1.3乙酸铵：优级纯。 4.1.4甲酸：色谱纯。 4.1.5冰乙酸。 4.1.6C18净化剂：粒度40μm~50μm。4.1.7无水硫酸镁（Mg2SO4）：550C烘干2小时。4.1.8氯化钠。 4.2试剂配制 4.2.1含1%（v/v）乙酸的乙腈溶液：取10mL冰乙酸（4.1.5），用乙腈（4.1.2）定容至1L，混匀。2 DB65/T39702017 4.2.2乙酸铵溶液（5mmol/L）：准确称取0.385g乙酸铵（4.1.3）济解于适量水中，定容至1L，混匀后备用。 4.3标准品 17种植物生长调节剂标准晶（矮壮素、氯吡脲、赤霉素、脱落酸、2,4-二氯苯氧乙酸、3-吲哚丁酸、2-萘氧乙酸、3-吲哚丙酸、4-氯苯氧乙酸、1-萘乙酸、3-吲哚乙酸、4-氟苯氧乙酸、多效唑、烯效唑、6-苄基嘌呤、噻举降、缩节胺），纯度均≥98%。4.4标准溶液配制 4.4.1标准储备液 分别精密称取17种植物生长调节剂标准品各5.0mg，用甲醇（4.1.1）溶解并定容至50.0mL。此标准储备液浓度均为0.100mg/mL，储存于棕色玻璃瓶中，-20℃下避光保存。4.4.2混合标准储备液 吸取17种标准储备液适量，配制混合标准储备液，用甲醇（4.1.1）稀释并定容。根据相关化合物在仪器上的响应差异，将17种植物生长调节剂分成四组，配制相应浓度的混合标准液。其中A纽为矮壮素、氯吡脲、多效唑、烯效唑、6-苄基嘌呤、噻苯隆、缩节胺，浓度为200ng/mL；B组为脱落酸、2,4-二氯米氧乙酸、2-氧乙酸、4-氯苯氧乙酸、1-萘乙酸、4-氟苯氧乙酸，浓度为2ug/mL：C组为赤霉素，浓度为5μg/mL；D组为3-吲哚乙酸、3-吲哚丙酸、3-吲哚丁酸，浓度为20ug/mL。混合标准储备液于.-20℃下避光保存。5仪器和设备 5.1离心机：高速低温离心机，离心转速10000rpm/min。5.2分析天平：感量0.01g。 5.3天平：感量0.0001g。 5.4超声波发生器。 5.5涡旋振荡器。 准信息服务平台 5.6液相色谱一串联质谱仪：配有主喷雾电离源（ESI）。5.7有机微孔滤膜：0.22μm。 5.8均质机。 6分析步骤 6.1试样的制备 按GB/T27404规定的方法制备样品，将试样于一20℃贮存备用。6.2仪器参考条件 6.2.1色谱条件 6.2.1.1色谱柱：AcquityUPLCBEHC18柱，100mm×2.1m（内径），粒径1.7um或相当者：6.2.1.2流动相： 3 a）A相：乙； b）B相：5M乙酸铵溶液（0.1%甲酸）；6.2.1.3柱温：30℃ 进样量：5μL： 6.2.1.4 6.2.1.5 洗脱程序见表1。 表1 洗脱程序 时间min 0 2 12 14 18 6.2.2 质谱条件 6.2.2.1 6.2.2.2 6.2.2.3 流速mL/min 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 离子源：电喷雾离子源ESI 电离方式：正负离子电离ESI士：监测模式：多离子反应监测MRM；毛细管电压：2.8kV(+)：2.8kv(-)6.2.2.4 离子源温度：150℃； 6.2.2.5 6.2.2.6 6.2.2.7 6.2.2.8 6.2.2.9 脱溶剂温度：350℃ 脱溶剂气流量：1000L/H； 锥孔气流量：50L/H； 质谱采集参数见表2。 表2 质谱采集参数 化合物 矮壮素 氯吡豚 多效哦 烯效唑 6-华茄嘌呤 噬苯隆 缩节胺 脱蒋酸 电哥模式 ESI+ ESI- ESI+ ESI+ ESI+ ESI+ ESI+ ES- 母离子(m/z) 122.1 2751 294.1 292.1 226.1 221.0 114.2 263.2 A相% 5 5 70 5 5 了离子(m/z) 59.0* 63.1 91.1 127.0* 0.0* 125.1 70.0 125.0 65.0 91.0* 102.1* 128.0 58.1* 98.2 153.1* 维孔电压(V) 34 34 22 22 26 26 34 3 26 26 26 26 44 44 22 DB65/T39702017 B相% 95 95 30 95 95 碰撞能量(eV) 18 18 28 10 18 36 22 24 48 22 16 16 20 18 12