ICS 67.050 X 04 备案号：35976-2013 DB22 吉林省地方标准 DB22/T 1685-2012 人参中人参多糖的测定 分光光度法 Determination of ginseng polysaccharides in Ginseng Spectrophotometric method 2012-12-21发布 2013-01-01实施 吉林省质量技术监督局 发布 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009和GB/T 20001.4—2001给出的规则起草。本标准由吉林省卫生厅提出并归口。 本标准起草单位：吉林省卫生监测检验中心、吉林省现代检测技术工程研究中心。 本标准主要起草人：杨大鹏、方赤光、刘思洁、姜楠、郭金芝、周丽、丛姬媚。 1 范围 本标准规定了人参中人参多糖含量的分光光度测定方法。 本标准适用于鲜人参、生晒参中人参多糖含量的测定。 2 规范性引用文件 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试料中的人参多糖经水解与醇沉处理后生成醛糖衍生物，在强酸条件下与苯酚反应生成橙色化合物，在486 nm波长处进行比色测定，并采用外标法定量。 4 试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T 6682三级水要求。 4.1 硫酸 4.2 乙醇溶液（80%）：80 mL无水乙醇加入20 mL水混匀。 4.3 葡萄糖标准品（纯度≥99.0%） 4.4 葡萄糖储备液（10 mg/mL）：称取1.0000 g葡萄糖标准品溶解定容至100 mL。 4.5 葡萄糖使用液（0.1 mg/mL）：取储备液1 mL定容至100 mL。 4.6 苯酚溶液（50 g/L）：5.0 g苯酚加水定容至100 mL，4℃避光保存一个月。 5 仪器 5.1 分光光度计（精度0.001） 5.2 电子天平（感量0.00001 g） 5.3 高速离心机（≥10000 r/min） 5.4 恒温水浴锅 5.5 超声波提取器（≥0.3 W/cm²） 6 试样制备 取适量人参样品粉碎并烘干备用。 7 分析步骤 7.1 提取 称取2.00 g样品置于100 mL容量瓶中，加70 mL水超声提取30 min，再于100℃水浴提取4 h，冷却后定容。取5 mL提取液加入80%乙醇沉淀，多次离心洗涤后弃上清液，残渣用水溶解定容至100 mL，作为待测液。 7.2 测定 取2 mL待测液于试管中，加入1.0 mL苯酚溶液，迅速加入5 mL硫酸溶液，振摇后静置，沸水浴加热20 min，冷却后在486 nm处测定吸光度，以空白为参比。 7.3 标准工作曲线绘制 分别取葡萄糖标准溶液0～1.6 mL，加水定容至2.0 mL，按同样显色步骤处理，在486 nm测定吸光度，绘制标准曲线。 8 结果计算 根据标准曲线回归方程计算人参多糖含量，并结合稀释倍数与定容体积进行换算。 9 精密度 9.1 重复性：两次独立测定结果差值不超过平均值的10%。 9.2 再现性：两次独立测定结果差值不超过平均值的10%。