DB32/T5109—2025
消毒产品中苯扎氯铵含量的测定 液相色谱法

前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由江苏省精细化工标准化技术委员会提出、归口并组织实施。
本文件起草单位：泰州市产品质量监督检验院、常州检验检测标准认证研究院、南京海关工业产品检测中心、青岛市食品药品检验研究院、苏州市产品质量监督检验院。
本文件主要起草人：陈松辉、钱辉、蔡露涛、鲍军方、汤娟、钱凯、周元圣、王爱霞、汶海花、李兴根、张子良、王文、谢坚、潘阮。

1 范围
本文件描述了苯扎氯铵的液相色谱测定方法。
本文件适用于消毒产品中苯扎氯铵含量的测定，消毒产品原料中苯扎氯铵含量的测定也可参照本文件执行。
注：本文件中苯扎氯铵包括十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基二甲基苄基氯化铵、十六烷基二甲基苄基氯化铵3种组分。

2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定

3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。

4 原理
试样中苯扎氯铵用水提取稀释，经滤膜净化后，用液相色谱分离，二极管阵列或紫外检测器检测，根据色谱峰相对保留时间定性，外标法定量。

5 试剂和材料
5.1 除非另有规定，使用分析纯或以上规格试剂，水应符合GB/T 6682中的一级水的规定。
5.2 苯扎氯铵（BAC）对照品：
十二烷基二甲基苄基氯化铵（DDBAC，分子式：C19H44ClN），纯度≥98%，CAS号：139-07-1；
十四烷基二甲基苄基氯化铵（TDBAC，分子式：C21H48ClN），纯度≥98%，CAS号：13908-2；
十六烷基二甲基苄基氯化铵（HDBAC，分子式：C23H52ClN），纯度≥98%，CAS号：122-18-9；
其他含量的有证标准物质均可。
5.3 乙腈：色谱纯。必要时经有机滤膜净化后使用。
5.4 乙酸铵。
5.5 三乙胺。
5.6 冰乙酸。
5.7 水相滤膜：0.45μm。
5.8 有机相滤膜：0.45μm。
5.9 乙酸铵缓冲溶液：称取0.5g乙酸铵（5.4）溶解于200mL水中，加入1mL三乙胺（5.5），定容至1000mL，用冰乙酸（5.6）调节pH至5.0，过0.45μm水相滤膜（5.7）待用。
5.10 标准储备液：称取苯扎氯铵三种组分对照品十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基二甲基苄基氯化铵、十六烷基二甲基苄基氯化铵（以纯品计）各0.02g（精确至0.0001g），用水溶解转移至10mL容量瓶中，定容至刻度并摇匀，此溶液苯扎氯铵3种组分质量浓度都为2mg/mL，置于0℃~8℃保存。
5.11 标准工作溶液：移取上述标准储备液适量以水稀释配制成不少于5个适当质量浓度的标准工作溶液，如质量浓度分别为：10mg/L、20mg/L、50mg/L、100mg/L、500mg/L。

6 仪器和设备
6.1 液相色谱仪：配二极管阵列(DAD)或者紫外检测器(UVD)。
6.2 色谱柱：XDB-C色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），或性能相当者。
6.3 电子分析天平：分度值为0.1mg。
6.4 超声清洗仪：功率为400W。

7 分析步骤
7.1 样品处理
称取1g（精确至0.0001g）样品，用水溶解（必要时超声5min），转移至10mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，静置，过水相滤膜后，上机测试。样品的质量浓度如超出线性范围可以稀释后上机测定。
7.2 液相色谱条件
项目：紫外检测波长 262nm；进样量：20μL；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；流动相：乙腈:乙酸铵缓冲溶液（体积比）= 70:30。
7.3 测定
分别移取20μL系列混合标准工作溶液（5.11）和样品过滤液（7.1）。在液相色谱参考条件（7.2）下进样测定。由保留时间定性，标准曲线计算试样中苯扎氯铵各组分浓度。苯扎氯铵的液相色谱二极管阵列(LC-DAD)光谱图和色谱图参见附录A。
7.4 空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。