DB37/T 3738—2019
水质 磺胺类、喹诺酮类和大环内酯类抗生素的测定 固相萃取/液相色谱-三重四极杆质谱法

前言
本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。
本标准由山东省生态环境厅提出并组织实施。
本标准由山东省环保标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：山东省环境监测中心。
本标准主要起草人：郭文建、张慧、朱晨、王桂勋、岳太星、李红莉、丁波涛。

警告：实验中使用的溶剂和试剂均具有一定的毒性，对健康具有潜在的危害，应尽量避免与这些化学品的直接接触。样品制备过程应在通风橱中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具，避免接触皮肤和衣物。

1 范围
本标准规定了测定水中磺胺类、喹诺酮类和大环内酯类抗生素的固相萃取/液相色谱-三重四极杆质谱法。
本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中磺胺间甲氧啶、磺胺嘧啶、磺胺二甲氧啶、磺胺甲恶唑、磺胺二甲嘧啶、诺氟沙星、环内沙星、氧氟沙星、氟罗沙星、脱水红霉素、罗红霉素、螺旋霉素12种抗生素的测定。
当取样500mL，定容体积为1.0mL，进样体积为20μL时，方法检出限为0.001μg/L～0.007μg/L，测定下限为0.004μg/L~0.028μg/L，详见附录A。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范
HJ/T 164 地下水环境监测技术规范

3 方法原理
水样中的抗生素类化合物经固相萃取法富集、净化后，用液相色谱-三重四极杆质谱法分离检测。
根据化合物的保留时间和特征离子峰定性，内标法定量。

4 干扰与消除
金属离子与抗生素能形成络合物，使固相萃取效率降低，可向水样中加入二胺四乙酸二钠抑制络合物的形成。
水中余氯等其他具有氧化性的有机物会干扰磺胺类抗生素的测定，可向水中加入抗坏血酸消除干扰。

5 试剂和材料
除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为不含目标化合物的纯水。
5.1 盐酸：ρ(HCl)=1.19g/mL。
5.2 硫酸：ρ(H2SO4)=1.84g/mL。
5.3 乙腈（CH3CN）：色谱纯。
5.4 甲醇（CH3OH）：色谱纯。
5.5 甲酸（HCOOH）：色谱纯。
5.6 乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2Na2O8·2H2O）。
5.7 抗坏血酸（C6H8O6）。
5.8 盐酸溶液：1+1。
5.9 硫酸溶液：c(H2SO4)=4.0mol/L。量取22mL硫酸（5.2），缓慢加入到水中，待温度降至室温后用水定容至100mL。
5.10 pH 2.0去离子水：用盐酸（5.8）溶液调节去离子水至pH为2.0。
5.11 0.1%甲酸溶液：量取0.5mL甲酸（5.5），缓慢加入水中，用水定容到500mL。
5.12 甲醇/乙腈混合溶液：1+1。
5.13 0.1%甲酸甲醇/乙腈混合溶液：量取0.5mL甲酸（5.5），缓慢加入到甲醇/乙腈混合溶液（5.12）中，用甲醇/乙腈混合溶液（5.12）定容至500mL。
5.14 稀释溶剂：3+1。取75mL 0.1%的甲酸溶液（5.11）和25mL 0.1%甲酸甲醇/乙腈混合溶液（5.13）于玻璃容器中，混合均匀。
5.15 标准贮备液：ρ=100mg/L。准确称取10.0mg抗生素类化合物标准物质，用甲醇溶解后，转移到100mL棕色容量瓶中，定容至标线。此溶液在-10℃以下避光可保存1年。也可以直接购买有证标准溶液，参照制造商的产品说明保存。
5.16 脱水红霉素标准贮备液：ρ=2.00mg/L。脱水红霉素可直接购买标准物质（纯度≥95%）或者由红霉素制备。量取400μL 100mg/L红霉素贮备液于20mL棕色瓶中，加入19.6mL甲醇（5.4），然后加入约10μL硫酸溶液（5.9）调pH至3.0，室温下震荡4h，于-10℃以下避光可保存2个月。
5.17 标准使用液：ρ=1.00μg/mL。将12种抗生素类化合物标准贮备液（5.15）用适量的甲醇（5.4）稀释，临用现配。
5.18 内标贮备液：ρ=200μg/mL。内标物为阿特拉津-d3。可用标准物质配制，标准物质纯度大于99.0%，用适量的甲醇（5.4）溶解。也可直接购买有证标准溶液。贮备液应在-10℃以下避光保存或参照制造商的产品说明。
5.19 替代物贮备液：ρ=200μg/mL。喹诺酮类替代物为环丙沙星-d3，磺胺类替代物为磺胺二甲氧嘧啶-d4，大环内酯类替代物为脱水红霉素-d6。可用标准物质配制，标准物质纯度大于99.0%，用适量的甲醇（5.4）溶解。也可直接购买有证标准溶液。贮备液应在-10℃以下避光保存或参照制造商的产品说明。
5.20 内标使用液：2.00μg/mL。将内标贮备液（5.18）用适量的甲醇（5.4）稀释。内标使用液于-10℃以下避光保存，保质期1个月。
5.21 替代物使用液：2.00μg/mL。将替代物贮备液（5.19）用适量的甲醇（5.4）稀释。替代物使用液于-10℃以下避光保存，保质期1个月。
5.22 固相萃取柱：填料为二乙烯苯和N-乙烯基吡咯烷酮共聚物（HLB）或同等柱效的萃取柱，规格为6mL/500mg。
5.23 滤膜：0.7μm玻璃纤维或其他材质等效滤膜。
5.24 滤膜：0.22μm聚四氟乙烯或其它等效滤膜。
5.25 氮气：纯度≥99.99%。

6 仪器和设备
仪器和设备应符合相关标准要求，具体清单包括固相萃取仪、液相色谱仪、三重四极杆质谱仪、分析天平、涡旋混合器、移液器、超声波清洗器、旋转蒸发仪、氮吹仪等。