ICS 65.120
B 46
DB13
河北省地方标准
DB13/T 1091-2009

饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定 分光光度法

2009-06-17发布 2009-07-02实施
河北省质量技术监督局 发布

前言
本标准由河北省畜牧兽医局提出。
本标准起草单位：河北省饲料产品质量监督检验站、石家庄市畜产品质量监测中心。
本标准主要起草人：武英利、正萍、左晓磊、王作艳、超、武利勇。

1 范围
本标准规定了饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的单位定义和测定方法。
本标准适用于饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定。

2 规范性引用文件
下列文件通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1 酸性蛋白酶活力单位
在40℃、pH 3.0条件下，1 min水解酪素生成1 μg酪氨酸所需的酶的量，规定为一个酶活力单位。

4 原理
蛋白酶水解酪素产生酪氨酸，在碱性条件下含有酚基的酪氨酸将林试剂还原生成钼蓝与钨蓝溶液的颜色与酶解产生的酪氨酸的量成正比，而生成的酪氨酸的量与酶的活力成正比，用分光光度计测定其吸光度值，根据吸光度值计算其酶活力。

5 仪器和设备
5.1 分析天平：感量0.0001 g。
5.2 研钵。
5.3 容量瓶：50 mL、100 mL。
5.4 电炉：温度可调。
5.5 恒温水浴摇床：温控范围30℃±0.2℃~60℃±0.2℃。
5.6 烧杯：200 mL、250 mL。
5.7 砂芯玻璃滤器：孔径0.45 μm。
5.8 酸度计：精确至0.01。
5.9 秒表。
5.10 移液器：精度10 μL。
5.11 分光光度计。
5.12 比色皿：25 mL。

6 试剂
方法中所用试剂，除另有规定外均为分析纯试剂，所用水应符合GB/T 6682-2008三级以上用水。