DB51/T1298—2011 山羊传染性胸膜肺炎诊断技术规范 ICS 11.220 B41 备案号：30901-2011 四川省地方标准 DB51/T1298—2011 Technical Specification for Diagnostic Methods of Contagious Caprine Pleuropneumonia 发布单位：四川省质量技术监督局 发布日期：2011-06-27 实施日期：2011-07-01 前言 本标准由四川省畜牧食品局提出并归口，由四川省质量技术监督局批准发布。 本标准起草单位：西南民族大学、四川省畜禽繁殖改良总站。 本标准主要起草人：杨发龙、岳华、王永、汤承、傅昌秀。 本标准附录A、B为资料性附录。 1 范围 本标准规定了山羊传染性胸膜肺炎的病原分离培养及山羊支原体山羊肺炎亚种的PCR检测技术要求。 本标准适用于山羊传染性胸膜肺炎的诊断及山羊支原体山羊肺炎亚种的检测与鉴定。 2 规范性引用文件 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语与定义 3.1 山羊传染性胸膜肺炎（Contagious Caprine Pleuropneumonia） 由山羊支原体山羊肺炎亚种感染引起的一种以呼吸道症状为主的传染病。 3.2 聚合酶链式反应（PCR） 一种分子生物学技术，用于体外扩增特定DNA片段。 3.3 引物（primer） 人工合成的寡核苷酸序列，用于PCR扩增反应，两端分别与DNA模板互补结合。 4 临床症状与剖检变化 4.1 临床症状 病羊体温升高至41℃～43℃，2～3天后出现明显呼吸道症状，如呼吸加快、呼吸困难、咳嗽及呼噜音。后期病羊行动困难，呈前肢分开站立、颈部前伸、流涎等表现。 4.2 剖检变化 病变主要局限于胸腔内，一侧肺脏严重实变，呈红色至灰色变化，质地坚硬无弹性，切面呈大理石样外观。胸腔常有淡黄色胸水，暴露空气后形成纤维蛋白凝块。胸膜增厚粗糙并可发生粘连。 5 病原分离与鉴定 5.1 病料采集及运输 5.1.1 活体病料采集：无菌采集鼻腔分泌物。 5.1.2 剖检病料采集：采集肺组织（病健交界处）、胸腔渗出液及纵隔淋巴结。 5.1.3 病料运输：低温条件下24小时内送检，无法及时检测应-20℃保存。 5.2 病原分离 5.2.1 培养基：改良Thiaucourt's液体及固体培养基（见附录A）。 5.2.2 病料处理 鼻拭子浸入培养基并混匀；组织样本剪碎后加入培养基并离心取上清；胸腔渗出液直接加入培养基。 5.2.3 培养 对样本进行系列稀释后接种固体培养基，37℃培养，逐日观察液体培养颜色变化，5～7天判定结果。菌落在体视显微镜下观察并进行纯化。 5.2.4 结果判定 （后续内容未提供）