DB13/T5189.6—2020 天然植物提取物中危害成分的检测 第6部分：万寿菊提取物中乙氧基喹啉的测定 发布单位：河北省市场监督管理局 发布日期：2020-06-28 实施日期：2020-07-28 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009规定起草。DB13/T5189《天然植物提取物中危害成分的测定》共分12个部分，本部分为第6部分，规范万寿菊提取物中乙氧基喹啉的测定方法。标准由河北省市场监督管理局提出，起草单位包括河北省食品检验研究院、晨光生物科技集团股份有限公司、石家庄海关技术中清河县食品药品检验检测中心。主要起草人：贾振国、冯浩彬、刘登帅、张强、王红、张海超、张凤霞。 1 范围 本部分规定了万寿菊提取物中乙氧基喹啉的测定方法，适用于万寿菊提取物中乙氧基喹啉的定量分析。 2 规范性引用文件 下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡注日期的引用文件，仅注日期的版本适用；凡不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用。 - GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 万寿菊提取物中的乙氧基喹啉经丙酮超声提取后，加入乙腈提取液，取上清液过滤，通过液相色谱-串联质谱仪（LC-MS/MS）检测，采用外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有说明，水为GB/T 6682规定的一级水，试剂均为色谱纯。 4.1 试剂 4.1.1 丙酮（C3H6O）：色谱纯 4.1.2 乙腈（C2H3N）：色谱纯 4.2 标准品 乙氧基喹啉标准品（C11H12N2O, CAS号：91-53-2）：纯度大于99.0%，-18℃冷冻储存。 4.3 标准溶液配制 4.3.1 标准储备液：准确称取50mg乙氧基喹啉标准品，用乙腈定容至50mL，配制成1mg/mL储备液，-18℃保存。 4.3.2 标准中间液：从储备液中取适量，用乙腈配制成100ng/mL标准中间液。 4.3.3 标准使用液：从标准中间液中准确吸取0、0.5、1、2、5、10 mL，分别置于100mL容量瓶中，用空白样品提取液定容，得到浓度为0、0.5、1、2、5、10 ng/mL的系列标准液。 5 仪器与设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪（LC-MS/MS）：配电喷雾离子源（ESI） 5.2 电子天平：感量0.001g或0.0001g 5.3 漩涡混匀器 5.4 冷冻离心机：转速≥10000 r/min 5.5 超声波清洗机 6 试验步骤 6.1 试样制备 准确称取0.5g万寿菊提取物样品于50mL试管中，加入5mL丙酮超声溶解，加入20mL乙腈，超声提取20分钟，4℃冷冻离心10000 r/min 3分钟。取上清液至25mL容量瓶，用乙腈定容至刻度，过滤0.22μm滤膜待测。 6.2 色谱质谱参考条件 6.2.1 液相色谱条件 色谱柱：C18柱（2.1mm×100mm, 2.5μm）或等效柱 流动相：乙腈:0.1%甲酸水=70:30 流速：0.4 mL/min 柱温：40℃ 进样量：2μL 6.2.2 质谱条件 离子源：电喷雾离子源（ESI） 扫描方式：正离子扫描 检测方式：多级反应监测（MRM） 电喷雾电压：5500 V 离子源温度：550℃ 雾化气、气帘气、辅助加热气及碰撞气均为高纯氮气或仪器适用气体 定性离子对、定量离子对及碰撞能量参数详见表1 表1 乙氧基喹啉质谱参数 目标物质：乙氧基喹啉 定量离子对(m/z)：218.3/148.3