DB34/T3861—2021 畜禽血清中黄曲霉毒素B1生物标志物的测定 高效液相色谱法 发布单位：安徽省市场监督管理局 发布日期：2021-01-25 实施日期：2021-02-25 前言 本标准按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则》的规定起草。注意本文件的某些内容可能涉及专利，发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽农业大学提出，并由安徽省农业标准化技术委员会归口。起草单位包括安徽农业大学、安徽浩翔农牧有限公司、望江县小月山农业发展有限公司、和县农业农村局、望江县畜牧兽医局、安徽省动物疫病预防与控制中心、安徽省农业科学院畜牧兽医研究所、宿松县春润食品有限公司。主要起草人：王希春、杨长根、陈祥国、赵家喜、沈艳、高亚飞、王军、汤继顺、赵杰、吴金节、李玉、冯士彬、孙裴、涂健、冯江华。 1 范围 本文件确立了畜禽血清中黄曲霉毒素B生物标志物含量的高效液相色谱（HPLC）测定方法，规定了测定原理、试剂和设备、测定步骤、结果表述、重复性、检出限与定量限及回收率。本方法适用于畜禽血清中AFB生物标志物的测定。 2 规范性引用文件 下列文件通过文中的规范性引用构成本标准的必要条款。注日期的引用文件仅适用注日期版本，不注日期的引用文件其最新版本（包括所有修改单）适用。 - GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 3.1 黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB） 主要由黄曲霉与寄生曲霉代谢产生的一种真菌毒素，在体内会与血液白蛋白中的赖氨酸（Lysine）结合形成稳定的生物标志物AFB-Lysine。 4 原理 通过蛋白酶消化从血清蛋白中释放AFB生物标志物，使用固相萃取柱进行浓缩。浓缩的AFB生物标志物经高效液相色谱分离，并通过荧光检测器检测。 5 试剂和设备 5.1 试剂与材料 5.1.1 甲醇（CH3OH）：色谱纯 5.1.2 蛋白酶 5.1.3 磷酸二氢铵（NH4H2PO4）：分析纯，叠氮化钠（NaN3）：分析纯 5.1.4 白蛋白试剂（DMA）：生物试剂 5.1.5 蛋白检测染料试剂浓缩液（考马斯亮蓝G-250） 5.1.6 氯化钠（NaCl）：分析纯 5.1.7 磷酸氢二钠（Na2HPO4）：分析纯 5.1.8 磷酸二氢钾（KH2PO4）：分析纯