本标准规定了种子生活力的生化(四唑)测定、种子健康测定、种子重量测定和包衣种子质量检验本标准适用于农作物种子质量的检测 GB/T 3543.7-1995 农作物种子检验规程 其他项目检验 GB/T3543.7-1995 标准下载解压密码：www.bzxz.net

中华人民共和国国家标准
农作物种子检验规程
其他项目检验
Rules for agricullural seed testing--Other testing
1主题内容与适用范围
GB/T 3543.71995
代替GB3543--83
本标准规定了种子生活力的生化（四啦）测定、种子健康测定、种子重量测定和包衣种子质量检验方法
本标准适印于农作物种了质法的检测。2引用标准
GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样GB/T3543.3表作物种子检验规程净度分析(HB/T3543.4农作物种子检验规程发芽试验3术语
3.1种子生活力seedviability
种子发来的潜在能力或种胚具有的生命力。3.2种f健康状况seed health
种了是否携借病原菌（如真菌、细菌及病毒）,有害动物（如线出及害虫）。3.3培养incubation
将种子保持在有利十病原体发育或病症发展的环境下进行培养。3.4下粒重theweight of 000 seeds国家种·F质量标准规定水分的1000粒种子的重量，以克为单位。3.5丸化种了seedpellets
为精盘播种，整批种了通常做成在大小和形状上没有明显差异的单粒球状种子单位。丸化种了添加的丸粒物质可能含有杀虫剂、染料或其他添剂。3. 6包膜种了enerusted seel
种子形状类似于原来的种子单位，其大小和重量变化范圃可大可小。包衣物质可能含有杀虫剂、杀菌剂、染料或其他添加剂。
3.7种毯seerlmat
种子随机成条状，族状或敏布在整片用宽而薄的毯状材料（如纸或其他低级材料制成）上。3.8种产带seed tapes
种子随矶成簇状或单行排列在狭惜的材料（如纸或其他低级材料制成）上：国家技术监督局1995-0818批准
1996-06-01实施
3.9处理种于treated seed
GB/T 3543.7- 1995
种子凋杀虫剂、染料或其他添加剂处埋，不引起其大小和形状的显著变化或增加原来的重量。处理种子仍可按G:B/T3543.13543.6的规定方法进行测定。第一篇生活力的生化(四唑)测定4试剂
应用四唑的0.1%~1.0%(m/V）溶，1.0%溶腋用于不切开胚的种子染色，而0.1%-0.5%溶液可用于已经切开胚的种子染色，配成的溶液须贮存在黑暗处或棕色瓶里。如果用蒸馅水配制济被的pH值不在 6. 5~7. 5范画内,则采用磷酸缓冲液来配制。磷酸缓冲液的配制方法如下：
溶液 1 :称取 9. 078 磷酸二氢钾(KH,PO,)溶解于 1 000 mL 蒸缩水中。溶波I称取9.172磷酸氢=钠(Na,HPC),)或11.876g磷酸氢二钠(Na:HPO,-2H,0>溶解丁1 (00 mL的薇缩水中。
取溶液 I 2 份和溶液 1 3 份混合即成绶冲液。在该缨冲液中溶解准确数量的四唑盐类,以获得准确的浓度。如每100 mL缓冲液中溶入1B四唑盐类即得「%浓度的溶液。
5仪器、设备
5.1控温设备
a、电热恒温箱或发芽箱：
b．冰箱。
5.2观察器具
a。体视根微镜或手持放大镜
b、光线充足柔和的灯光。
5.3容器
a.棕色定量加液器，
b.不向规格的染色盘。
5.4切划工具
单面刀片、矛状解剂针、小针等。5.5预湿物品
滤纸、吸水纸和毛巾等，
5.6天平
天平感量为0.001。
5.7其他
舞子、吸管等。
6 测定程序
6.1试验样品的数取
每次至少测定200粒种子，从经净度分析后并充分混合的净种子中，随机数取每重复100粒或少于100粒的若下副重复。如尽测定发芽术期休眠种子的生活力，则单用试验末期的休眠种子。6.2种于的颅措预
预措指有些种子在预湿前须先除去种了的外部附属物(包括剥去果壳》利在种子非要害部位养破h
GB/T3543.7-1995
种皮，如水稽种子脱去内外，剃破硬实等。为加快充分吸湿、软化种皮.便丁样品准备，以提高染色的均勾度，通常种子在染色前要进行预混。根据种的不同，预凝的方法有所不同。·种是缓慢润湿，即将种子放在纸上或纸间吸湿，它适用于直接漫在水中容易破裂的种子（如豆科大粒种子）.以及许多陈种于和过分干燥种子：另一种是水中浸渍，即将种了完全浸在水中，让其达到充分吸胀，它适用于直接漫入水中而不会造成组织破裂损伤的种子。不同种类种子的具体预湿温度和时间可参见表1。7
和（整种
普源照起
棵燕委
T'riturum eestinnm L.
Iiurdeum wuigure I..
Srrzie ereote L.
Aen satita L.
Avena nutu L.
Zen muys L.
PamirummifieeenmL.
Setaria itafica Beauy.
Seorghnan bicour (L)
Mocnch
Chyeu sutiza L.
Gersypium spp.
预方式
预渐时间
30c惊溢
水设种~
:4 h.或间
纸间或水同上
纸同或水：同上
纸河水
纸间或水
表1农作物种子四唑染色技术规定染色的的准备
数划监和四分之
三胚乳，
分害带盾片的脏
除上释壳,切既
和四分之胚乳。
1在肝部谢近横划
纵切胚和大部分胚乳
在压部附近横切。
沿胚乳尖端纵切
二分之
纵切胚和人部分班乳
纵切胚和四分之“班
纵切二分之“种
印去部分种皮
去掉胚乳遗迹
辫滤浓度31染色
鉴准所的处理
观察切i：
现察胚利
现察切训：
规察别面
划开或斯开、使，
旺器出
观动面
观察切而
在为种在济不染他。
较射或坏死的最大而！
盾片下任端二
芬之本梁色
既恨大部分不柔色，
店中央有
染色纠织.
表明受到热
但不定根原始体必测染损劳
报，盾片［下任端二
分之一小架色
根顶端三分之不梁
.农项端兰分之一
不染色。
盾产上下任一举兰
分之-不白
性根项端二分之不案
距根项端三分之-
不染色。
广院表面有小范围
的却死或子叶顶端一分
之…不染色
必要时可除
去内外俘
嫂实成划
被种反
种(变种)
Fagojyrum esculentum
Moench
Fagojyrumtataricm
(L.Gaertn.
Phaseolus vuigaris L.
Prsum seativum L.
Vignu radiata (L.)
Wilczek
Arachis hypogaeaL
Glyeinemar(1..)
nnguicuiata
Itichas lablah IL.
Vicia faba I..
Cucurhitamaschata
Ducheane ex Poinet
Luffaspp.
Cucumis sativus L.
Cirrelus lanatus
Matsum.et Nakat
Benincesa
hispica
Monnrdica charantia L
Cmnmis meio L
Tagrmaria
sreerariar
预湿方式
纸间或水
纸间或水
预逐时何
30元:水中3
~4 h,饿间
在20～
3n℃水 中
6 ~8 h
变纸间24h
染色前的雅备
沿费果近中线纵切
无额准备
纵切分之一种
剥去种皮，
西报用干燥布或
纸增,除去表面粘液
游液液阀
35r染色
时间,小
整定前的处理
观寒切面
切或除去科种
有牛活刀种子允许不染色
轮影感坏死的大面假
胚根顶端一分之·
不染色。
了叶表而有小范困
的坏死
脏根顶端不染色，花
皮，擀开子叶。
露出胚芽
除去种皮和内
生为“分之“，重且为二
分之二,其他种为一分之
h手叶项端不染色，花
生为四分之一，垂豆为
分之一.H他岁二分之
e.除垂豆外，脏芽须部
不薬色四分之
还根预端不染似二
分之一。
b．子顶不染色一
分之一
种(变种)
白菜型油菜
Brusrea campestris l..
不结球白
Bratsiecg campetris I..
Asp. chenetsis (L.)
结球白莱
甘蓝型油料
花郁菜
葱属（洋葱
韭染、题、韭
葱，细香葱>
Brussica campestris L.
pekinensi.s
(Luur.JOlson
Brassica maparL.
Brassira oteracea
var.capitaia L.
Brassica oleracea L.
var, totrytrs L.
Ruphanus farivus L
Brasmica jsncea Coss.
Caprieah frutesrens L.
Capsicwm fruescenr
ar.grosum
Sotanum melongena L..
Iycoperzcan
tyeopersicum (I..
Karsten
预湿力式
预凝时间
纸间或水
30℃温水
中经种 3~
4 h 或纸间
纸间水中
在20～
30水中3
-4 h,或纸
间12h
缓表1
色前的准备
剥去种皮。
切去那分种皮
a.潜扇平面纵切.
不究全切开，基部相连。
b。切去子叶两,但不
摄恢胚据及子叶
在种子中心刺破
种皮和胚乳。
bh.切上种子末猫，包
括一小部分子叶
液辣35C染色
时间h
0. 5~-1. 5
鉴定前的处理
切种子
使胚中辆露出。
古部分
有生活力种于允许不染色
较屿成坏死的最人面积
胚根项端一分之-
不染色．
子叶顶端有部分虾
种皮使压胚中勒：死
让扯开切露
b.切去-薄层
胚乳，使胚露山
0. 5-~1. 5
撕开胚乳，
使旺露出。
b．纵切种子
使胚腾出
a，种历和胚乳完全染色。
b、不与胚相连的胚乳有
少量不染色
旺胚和胚乳全郁染色
7-1995
(变种)
胡剪下
首菊属
草木棵局
紫云茨
向口葵
Coridndram sativim I.
Apiuzn graveolens L.
Ihaucus carota I..
Foeniculm
Medicaga Bsj.
Melilotux5sp.
negare
Astragales sinicus L.
Lactwrc ratize L.
Chrysentfeenum:coro
var.spatistm
Heliantlims annus L.
Retu vufguris L
Spiaria netcee [..
渐湿方式
预湿时间
在20～30℃
永中３h
在30水
中径2~4h
续表1
染色前的难备
35℃染色
时间，h
纵切钟子半.井0.1~0.5
渐开胚乳使胚避出。
b.切去种子末端四
分之一或三分之一www.bzxz.net
无衡雅爷
a. 纵切种子上半部(非
胚根端)
b.划去种子末端包括
一部分李叶
纵切种下上半部或除
去果尧。
0. 5 ~~1. 4 G~-24
除者盖考种胚的
. 1 ~- t. 5
幅状物。
沿胚与胚乳之界
线切井
在脏与附乳之边
界刺破种改。
在胚根与之
同横·切
鉴定前的处理
有生活力种子允许不染色、
较将或环死的最大面
进步撕！旺和胚班全部染色
开切口，使怪露
b.纵切种子
露出胚和胚乳
除去种皮使脏
a.切去种皮和
子叶使胚出。
b. 切种乎严术
端轻轻挤压，使
胚露出
除去果壳
让开扭口，使啦
胚根顶端二分之
不菜色。
了叫顾菊分之
如在衣而可二分之一不
a.胚般项蹦二分之·不
染色，
b.子叶项端二分之--表
面不染色·或一分之一弥
馒性不染色
a、胚根顶端三分之
不染色：
“吓顶部表而分
之·不染色
胚根项端三分之
不染色。
子叶顶端三分之一
不菜色
0. 5~-1. 5; .
领韧触子。
使胚矫出，
瞬开别
陕压露山
7—1995
6.3漆色前的准备
GB/T3543.7—1995
为了使距的书构造和活的营养组织暴露出来，便于四唑溶液快速而充分地入和观察鉴定，经软化的种子应进行品准备。准备方法因种子构造和胚的位不而异（详见表1），如禾谷类种子浒胚纵切，伞形科种近胚纵切、葱属沿种子扁平面纵切等。西瓜等种子预湿后表面有粘液，可采用种了表面「燥或把种子夹在布或纸闻措擦清除掉。6.4染色
将准备妤的种于样品放入染色盘巾，加入适宜浓度的四唑溶液（表1)以完全灌没种子，移暨一定温度的黑暗控温设备内或羽光下进行染色反应，所用染色时间因四唑溶液浓度、温度、种子种类、样品准备方法等四素的不同而有差异。一般来说，四唑溶液浓度高，染色快，温度高，染色时间短，但最高不超过45。到达规时间或染色已很明显时，倒去四唑溶液、用清水冲洗。6.5鉴定前处理
为便于观察鉴定和计数，将已染色伪种子样品，加以适当处理使胚主要构造和活的营养组织明显暴露出来，如些豆类沿胚中轴纵切，瓜类剥去种皮和内膜等。不同种类种子的处理方法详见表1。6.6观察鉴定
人中粒种子可直接用肉眼或于特放大镜进行观察鉴定，对小粒种子最好用10～100倍体视显微镜进行观察。
观察鉴定时，确定种子是否具有生活力，必须根据胚的主要构造和有关活营养组织的染色情况进行正确的判断。般的鉴定原则是：凡胚的七要构造惑有关活营养组织（如蒸属、伞形科和茄科等种子的胚乳）全部染戚有光泽的鲜红色或染色最大面积大于表1规定，耳组织状态正常的为正常有生活力的种千；否则为无生活力的种子。根据种类的不同，具体鉴定标准详见表1。依据鉴定标准·将各部分分开和计数。7结果表示与报告
计算各个重复中有生活力的种于数，重复间最大容许差距不得超过表2的规定，平均百分率计算到最近似的整数。
表 2生活力测定重复间的最大容许差距平均生活力百分
91--92
H4 -86
81---83
78--80
76--77
15--17
4 次量复
重复间容许的最大差距
3 次童复
2次重复
平均生括力百分事
73·-75
71~·72
64---66
56--63
26---28
29-~30
31--32
33~-34
35---37
38--45
GB/T3543.7—1995
续表2
重复间容许的段人差距
4次单复
3次重友
2次张发
在GB/T3543.1的结果报告单“其他测定项目”栏中要填报\四唑测定有生活力的种子%”。
对豆类、棉籽和葬菜等需增填\试验中发现的硬实百分率”，硬实百分率应包括在所填报有生活力种子的百分率中，
种子健康测定
8仪器设备
显微镜（60倍双目显微镜）
培养箱：
近紫外灯：
冷冻冰箱：
高压消毒钢、培养迎等。
9测定程序
9.1未经培养的检验（不能说明病原菌的生活力）a，直接检查
适用于较大的病原体或杂质外表有明显症状的病害，如麦角，线虫瘘、虫要、黑秘病孢子、类等。必要时，可应用双目显微镜对试样进行检连，取出病原体或病粒，称其重量或计算其粒数。b吸胀种子捡查
为使子实体，病症或害虫更容易观察到或促进孢子释放，把试验样品没入水中或其他体中，种子吸胀后检查其表面或内部，最好用双自显微镜。c：洗涤检查
用于检查附着在种子表面的病菌孢子或颖壳上的病原线虫，分取样品两份，每份5g，分别倒入100mL三角瓶内，加无菌水10mL，如使病原体洗涤更彻底，可加入0.1%润滑剂（如磺化二酸脂）、置振荡机上振荡，光滑种子振粥5trin，粗楚种子振荡10min。将洗涤液移入离心管内，在1000～1500×离心35min。用吸管吸去上满液，南1mL的沉淀部分，稍加振菌。用干净的细玻璃梯将甚浮液分别滴于5片载玻片上。盖上盖玻片，用400～~500倍的显微镜检查，每片检查10个视野，并计算每视野平均孢子数，据此可计算病菌孢子负莅量，按式（1)计算：N\XnXng
每克种子的孢子放荷量：
式中: N—
每视野平均孢了数：
\：靠股片面积上的神卵数：
n-1ml.水的滴数：
供试样品的重
d.剂粒撤查
GB/T 3543.7--1995
取试择！-[g！小麦等粒种”5，米、碗豆大种子10g用刀开或切开种的被害或可郝分，检查害虫
2：熟色检在
高锰酸御梁色法适于检在隐蔽的来象、谷象。取试样15&，除去架质，倒入铜丝网巾，于30℃水中没泡1min.再移入1关高锰酸钾溶液巾染色1mit然后用清水洗涤，倒在白色吸水纸上用放大镜检弯,挑出粒面上带有直径0.m 的斑点即为害虫籽粒。计算害虫含量。碘或典化钾染位法：适用丁橙验豌豆象。最试样50多，除去杂质，放入铜丝网中或用纱布包好，浸人1%碘化钾或2%碘酒落液中11.5in。取出放入0.5%的氧氧化钠溶液啡漫30s,取出用清水洗涤15~-2( s,立即捡验,如立粒表面有1 ～2 m㎡ 直径的圆斑点,即为豆象感染。计算害虫含量。\比重检验法
取试样 [00 g-除去杂质,倒入食盐饱和熔获中(含盐 35. 9 g溶于 1 000 ml. 水中),搅拌1~15 min.静止.1~2 nin,将悬浮在上层的种子取出,结合剂粒检验(见 9. 1 d. ）,计算害虫含量。B软X射线拾验
用”险餐肿子内愿置的虫害（如牵京象、正来象、麦等），通过照片或直接从荧光屏上观察，9.2培养后的按查
试验样品经过一定时间培养后，检查种于内外部和幼苗上是否存在病原菌或其症状。带用的培养基有三类：
8吸水纸法
吸水纸法适用于诈多类型种子的种传真菌病害的检，尤其基对于许多半知菌，有利于分生孢子的形成和致病真菌在幼渐上的症状的发展。稻癌病(Pyricntanu uryzae Cav,)试拌400粒种子,将培养血内的吸水纸用水湿润,每个培养血播25粒种子,在22℃下用12h黑暗和 12 h 近紫外,光照的交替周期培养 7 d。在 12～50 倍放大镜下检查每粒种子上的韬瘟病分牛孢子。-殿这种真菌会在额片上产生小而不明显、灰色至绿色的分生孢子，这种分生孢子成束地着生在短而邹细的分牛孢了梗的顶端。菌丝很少覆盖整粒种子。如有怀疑，可在200倍显微镜下检查分生孢子来核实。典型翁分生抱子是倒梨形，透明，基郝钝阅其有短齿分两隔，通常具有灯锐的顶端，大小为（-25）mx(--12) μm
水明嘟叶斑病（rechsteraoryeaeSuhram&Jain）取试样 400 粒种子+将培养血的吸水纸用水湿润,每个培养血播25 粒种子。在22 ℃下用 12 h黑和121近素外光照的交替周期培养7d。在12～50倍放大镜下检查每粒种了上的胡麻叶斑病的分生泡子，在种皮上形成分生孢了梗和谈灰色气牛菌丝，有时病菌会蔓延到吸水纸上。如有怀疑，可在200倍显微读下检奋分孢来核实，其分生孢子月才形，（35170）×（1117）Pm谈棕色至棕色，中或近中部最宽，两端渐渐变细变。F宇花科的黑胞病（IeplasphaeriumucwlunxCes.&deNot.）即甘蓝黑腐病（PhomalingamTesm.i
取试样100数种于,每个培养山垫入三层滤纸,加入5ml.0.2%(m/V)的2,4二氯苯氧基乙酸钠盐（2.4-1\)溶液，以抑制种子发求。沥去多余的2.4-D溶液，用无菌水洗涤种子后，每个培养血播50粒邮了，个2i（用12h光照和12h黑嗒交用期下培养11d.经6a后征25倍放大镜下-检查长在神GB/T 3543.7—1995
于和培养基上的甘蓝黑腐病松散生长的银白色菌丝和分生孢子器原基。经1！山片，进行第次愉查感染种子及其周剧的分生孢了器。记录已长有的甘监黑腐病分生他子器的感炎种了。b．砂床法
适用十某些病原体的检验。用砂时应去掉砂中杂质并通过1mm孔径的筛子，将砂核清洗，高温烘干消毒后-放入培养而内加水湿润，种了排列在砂床内·然所密闭保持高温，培养温度与纸床相同，待药苗顾到培养Ⅲ益时进行检查（约经7-~10d）。c.原帖血法
七要用于发育较慢的致病真菌潜伏在种子内部的病原菌，也可用于检验种子外表的病原荫。小颖枯病(Srpturia nodorum Berk.）先数取试样400粒，经1%(m/m>的次氯酸钠消毒[0min后，月无菌水洗漆。在含(.01%硫酸链霉素的麦导或马龄薯左施糖琼脂的培养基上，每个培养Ⅲ播10粒种了于掠脂表面，在20C黑暗条件下培养7d。用肉眼检查每粒种子上缓慢长成圆形菌落的情况，该病菌菌丝体为白色或乳色，通带调密地微盖着感染的种了。菌落的背面里黄色或褐色，并随其生长颜色变深。豌臣褐斑病（AscochytupisiE,ih）先数取试样400粒，经1为（m/m）的次氟酸钠消毒10rmin后，用无菌水洗涤。在变芽或马铃暮葡菊糖琼脂的培养基上，每个培养血播10粒种子丁琼脂表面，在20心照暗条件下培养7d。用肉眼检查每粒种千外部盖满的大量色菌丝体。对有坏疑的菌落可故在25倍放大镜下观察，根据凿落边缘的波状闲丝来确定
9.3其他方法
大麦的散黑感病菌可用整压胚捡验。大麦散黑穗病(WstilagonudaRostr两次重复，每次重复试验样品为100～120g（根据干粒重推算含有2000～4000粒种-f-），先将试验样品放入1I新配制的5%(V/V)Va()H溶波中.在20℃下保持24h。用温水洗涤，使胚从软化的果皮甲分离山来。收巢胚在1mm网孔的筛子里，再用网孔较大的筛子收集胚乳和择壳，将胚放入乳酸苯（甘油、苯酚利乳酸各一分之一)和水的等量混合液里，使胚和浮壳能进一步分离。将胚移置盛有75ml清水的烧杯中，并在通风柜单，保持在沸点人约30\，以除去乳酸举酚，并将其洗净：然后将胚移刹新配制的微溢甘油中，再放在16～25倍放大镜下，配置适当的台下灯光，检查大麦散黑秘病所特有的金褐色菌丝体，每伙重复检查1000个胚。测定样品中尼否存在细菌、真菌或病毒等，可用尘长植株进行检查，可在供检的样品中取出种了进行播种，或从样品中取得接种体，以供对健康幼苗或植株一部分进行感染试验。应注意植株从其他途径传播感染，并控制各种条件。
10结果囊示与报告
以供检的样品重童中感染种子数的百分率或病原体数日来表示结果。填报结果要填报病原菌的学名，同时说明所用的测定方法，包括所用的预措方法，并说明用了检查的样品或部分样品的数量。
第三篇重量测定
11仪器设备
乱：数粒仪成供发芽试验用的数种设备。b.感量为0.1.0.01g的天平。
12测定程序
12.1试验样品
GB/T 3543.7—1995
将净度分析后的全部净种子均勾混合，分出一部分作为试验样品。12.2测定方法
任选下列方法之一进行测定。
用手或数种从试验伴品中随机数取8个重复，每个重复100粒,分别称重（g）,小数位数与GB/T 3543. 3的规定相回
汁算8 个重其的平均重,标准差及变异系数,按式(2),(3)计算：标雅差（S）
x中:X
各重复重量，区：
重复次数，
n(EX2) - (EX)
n(n-1)
变异系数一
式中.标准差·
x——100粒种·子的平均重量·g。S
如带有摔壳的禾本科种子[见 GB/T 3543. 3 附录 B(补充件)变异系数不超过 6. 0,或其他种类科子的变异系数不超过4.0,则可计算测定的结果。如变异系数超过上述限度，则应再测定B个重复，并诈算16个重复的标推差。凡与平均数之差超过两倍标准差的重复略去不计。b、干粒法
用手或数粒仪从试验样品中随机数取两个重复，大粒种子数500粒，中小粒种子数1000粒，各重复称重(g),小数位数与 GB/T 3543. 3 的规定相同。两份重复的差数与平均数之比不应超过 5%,者超过应再分析第三份重复,直至达到要求,取差距小的两份计算测定结果。
将整个试验样品通过数粒仪，记下计数器上所示的种子数。计数后把试验样品称量（g），小数位数与GB/T3543.3的规定相同。
13 结果表示与报告
如果是用全量法测定的,则将整个试验样品重量换算成1000粒种子的重量。如果是用百粒法测定的，则从8个或8个以上的每个重复100粒的平均重量（X），再换策成1000粒种子的平均重量(即10×x)。
根据实测T粒重和实测水分，按GB44044409和GB8079～8080种子质量标准规定的种子水分,折算成规楚水分的千粒重。计算方法如下：千粘重（规定水分，名）—实测于粒重(&）α上1一窦测水分(%））1一规定水分（%）
其结果按测定时所用的小数位数表示(见12章）。在GB/T3543.1的种子检验结果报告单\其他测定项目\栏中，填报结果。(4)
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