本标准适用于商品粮食、油料中粗蛋白质含量的测定。 GB/T 5511-1985 粮食、油料检验 粗蛋白质测定法 GB/T5511-1985 标准下载解压密码：www.bzxz.net

GB5511—1985
中华人民共和国国家标准
粮食、油料检验
粗蛋白质测定法
Inspection of grainand oilseedsMethodsfordeterminationofcrudeproteinGB/T5511—1985
本标准适用于商品粮食、油料中粗蛋白质含量的测定。仪器和用具
凯氏烧瓶：50ml；
圆底烧瓶：100ml；
万用电炉；
锥形烧瓶：100ml；
微量滴定管：5ml、刻度0.01ml；容量瓶：50ml；
移液管：5ml；
量筒：10ml；
洗耳球；
凯氏微量蒸馏装置（见下图）、胶管等、凯氏微量蒸装置图
1一蒸馏瓶；2一冷凝管；3一承接瓶；4一回流管；5—漏斗；6活塞；7-簧夹；8—烧瓶
2试剂此内容来自标准下载网
2.1浓硫酸-过氧化氢-水混合液（2：1：3）：在100ml水中缓慢加入浓硫酸200ml，冷却后再国入30%过氧化氢300ml，混匀备用。此液存放阴凉处可保存一个月；
2.2混合催化剂：硫酸铜（CuSO45H,O）10g，硫酸钾（A.R）100g，硒粉0.2g，在研钵中研细使通过40目筛，混匀后备用；国家标准局1985—11-—02发布
1986—07—01实施
GB5511—1985
2.340%氢氧化钠溶液；
2。42%硼酸溶液；
2.50.01N盐酸溶液；
2.6甲基红乙醇溶液：0.1g甲基红溶于75m195%乙醇中（先在研钵中加乙醇研磨)；
2.7次甲基蓝乙醇溶液：0.1g次甲基蓝溶于80m195%乙醇中。临用时将以上两液按2：1比例混合即成。在酸域呈紫红色，在pH5.5时溶液无色，在碱域呈绿色。
3操作方法
3.1消化
按照含有10～30mg粗蛋白质计算试样用量，一般可称取试样0.2～0.3g（W，精确到0.0001g），用蜡光纸卷着倒入50ml凯氏烧瓶中，加混合指示剂1g，同时加入硫酸-过氧化氢-水混合液3～5ml，稍加振摇，斜置于电炉上，在通风橱内加热进行消化。开始时用低温加热，勿使瓶中泡沫超过瓶肚的三分之二，待泡沫减少和烟雾变白后再增加温度保持微沸。消化到溶液呈浅蓝绿色的透明状时，再继续加热沸腾10min，取出待消化液冷却至室温后，加水10～20ml，再待溶液温度降到室温后，干净地转入50m1容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀备用。
3.2蒸馏
按照凯氏微量蒸馏装置图的安装进行蒸馏和吸收。在烧瓶8内加水400m1和少量碎玻璃片，加5滴混合指示剂，加几滴酸液使水呈紫红色，连接4，1，2，并检查有无漏气处。量取30m11%硼酸溶液注入锥形瓶3内，加混合指示剂2滴，使冷凝管下端插入液面下1cm处。量取稀释的消化液5ml，由漏斗5注入瓶1内，再加水10ml，冲洗漏斗5。量取40%氢氧化钠溶液1ml，提起活塞注入瓶1内，立即用水2～5m1冲洗漏斗5，旋紧活塞。这时瓶1内溶液总体积不要超过其容量的一半。打开簧夹7，关闭活塞6，加热烧瓶8，待瓶1内溶液开始沸腾时开始计时，经2min降低瓶3，使冷凝管下端露出液面，再蒸馏1min后，用水冲洗管下端。蒸馏结束后，紧簧夹7，断绝蒸气，使瓶1内溶液全部吸入管4中，放松簧夹7，从漏斗5加入蒸馏水40～50m1，再通蒸气加热和回流，将瓶1洗涤一次备用。
3.3滴定
用0.01N盐酸溶液滴定瓶3中的吸收液，滴至溶液出现浅紫红色为止。为消除试剂误差，除不加试样外，按照上述操作方法，做一次空白试验。4结果计算
粗蛋白质的干基含量按下列公式计算：10000
粗蛋白质（干基%）=(V,-V）)×N×14×P×*w(100-M)
式中：V蒸馏时取用稀释的消化液体积，ml；V,—实验用去的盐酸溶液体积，ml；V。空白试验用去的盐酸溶液体积，ml；N盐酸溶液的当量浓度，N；
14一每毫克当量盐酸相当于氮的毫克数；国家标准局1985—11-—02发布
1986—07—01实施
GB5511—1985
P蛋白质换算系数（小麦5.7，其他谷物及豆类6.25）；W—试样重量，mg;
M试样水分百分率，%。
双试验结果允许差：粗蛋白质含量在15.0%以下时，不超过0.2%；粗蛋白质含量在15.1%以上时，不超过0.4%。求其平均数，即为测定结果，测定结果取小数点后第一位。
注：①消化过程中，若硫酸损失过多时，可酌量补加硫酸，勿使瓶内干洞。②消化液加水稀释后，应及时进行蒸馏，否则应保存消化液，临用时加水稀释。
③加入蒸馏瓶1内的碱液，必须过量。④也可使用由0.2%甲基红乙醇溶液1份和0.2%溴甲酚绿乙醇溶液5份配制的混合指示剂（临用时混合），终点为灰红色。附录A
大豆水溶性蛋白质测定法
（补充件）
A。1仪器和用具
粉碎机；
磨口带塞锥形瓶：500ml；
振荡器：国际型；
容量瓶：250ml；
离心机，附50ml离心管；
玻璃漏斗；
A.1.7锥形瓶、移液管；
A.1.8其他仪器和用具与本标准第1章同。A.2试剂
所有试剂与本标准第2章同。
A.3操作方法
A.3.1试样制备：将大豆粉碎使90%以上通过60目筛。A。3.2提取：称取粉碎试样5g（W，精确至0.01g）于磨口带塞锥形瓶中，加水200ml，摇混使均匀分散，然后在25～30℃温度下振荡2h，取出后将混合液转移至250ml容量瓶中，用水稀释至刻度，混勾后静置1～2min，将上层清液倒入离心管中，在每分钟转数1500转的离心机中离心10min，再将离心液用快速滤纸或玻璃纤维过滤，收集清晰滤液于锥形烧瓶中，即为样品水溶性蛋白质测定液。
A.3.3定氮：吸取测定液10ml于50ml或100ml凯氏定氮瓶中，按本标准3.1、3.2、3.3步骤进行消化、蒸馏、滴定。记下滴定样品液及空白液消耗盐酸的数量。
A.4结果计算
水溶性蛋白质含量按下列公式计算：10×5
水溶性蛋白质（干基%）=(V-V。）×N×0.014×6.25×25050~W(100-M)
国家标准局1985—11—02发布
1986—07—01实施
GB5511—1985
式中：V一
-滴定5ml样品液消耗盐酸体积，ml；V。滴定5ml空白液消耗盐酸体积，mlN
一盐酸溶液的当量浓度，N；
每毫克当量氮的克数；
6.25一大豆含氮量换算成蛋白质系数；吸收提取液进行消化的体积，ml；10
250一总提取液的体积，ml；
5——吸收消化液进行蒸馏的体积，ml；50一总消化液的体积，ml；
W—试样重量，g;
试样水分百分率，%。
双试验结果允许差不超过0.4%，求其平均数，即为测定结果。测定结果取小数点后第一位。
注：①大豆氮可溶解指数（%）的计算方法是：以所测得的大豆水溶性蛋白质（%）除以大豆总蛋白质（%），再乘以100即得。②本方法采用样品制备方法及提取方法使测定结果较为稳定，但如因粉碎样品细度达不到要求，则可采用称取试样5.00g于研钵中，加5ml水，用手研磨10min，将混合物用200ml水转移至250ml磨口瓶中，再在振荡器上振荡30min，然后同本标准3.2进行定容、离心、过滤、定氮。
附加说明：
本标准由中华人民共和国商业部提出。本标准由商业部粮食储运局负责起草。本标准主要起草人高修吾、杨浩然、吴艳霞、吕桂芬。国家标准局1985—11-—02发布
1986—07—01实施
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