本标准规定了用3，5-二羟基甲苯-硫酸溶液作显色剂，使用分光光度计定量测定棉花含糖量的试验方法。本标准适用于棉纤维所含全糖的定量测定。 GB/T 16258-1996 棉纤维含糖试验方法 定量法 GB/T16258-1996 标准下载解压密码：www.bzxz.net

GB/T 16258—1996
已公布实施的GB/T13785一92《棉纤维含糖程度试验方法比色法》具有快速、简便的特点。但只能定性或半定量测定棉纤维所含还原糖，本标准方法采用3，5-二羟基甲苯硫酸溶液作为显色剂，使用分光光度计定量测定棉纤维所含全糖（包括还原糖、非还原糖）。
本标准由中国纤维检验局提出。本标准由中国纤维检验局归口。本标准负责起草单位：中国进出口商品检验技术研究所。本标推主要起草人：郝楠、王星、王超。122
1范围
中华人民共和国国家标准
棉纤维含糖试验方法
定量法
Test method for sugar in cotton fibers-Quantitative method
GB/T 16258-1996
本标准规定了用3，5-二羟基甲苯-硫酸溶液作显色剂，使用分光光度计定量测定棉花含糖量的试验方法。
本标准适用于棉纤维所含全糖的定量测定。2 引用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB609785棉纤维试验取样方法
3定义
本标准采用下列定义。
3. 1 含糖率 percentage of sugar附着在棉纤维表面总糖（包括还原糖、非还原糖）重量占棉纤维试料重量的百分率。3.2精密度precision
在确定条件下，将测试方法实施多次所得结果之间的致程度。3.3回收率recovery
在同一条件下，将已知量的标准物加入到待测物中进行测定，其结果扣除待测物的本底值后与标准物加入量之比。
4原理
在非离子表面活性剂的作用下，使棉纤维上的糖溶于水中，糖在强酸性介质中转化为醛类，与3，5二羟基甲苯发生显色反应，生成橙黄色化合物，用分光光度计在入一425nm处与标准工作曲线比较定量。
5试剂和材料
5.1蒸馏水。
5.2硫酸（密度1.84g/mL)。
5.33,5-二羟基甲苯。
3,5-二羟基甲苯-硫酸溶液（0.2%，W/W）：称取3,5-二羟基甲苯（5.3)0.2g，置于100mL烧杯中，加入100g（约54mL）硫酸（5.2），搅拌使之全部溶解。现用现配。国家技术监督局1996-03-28批准1996-06-01实施
GB/T 16258-—1996
5.4脂肪酸烷醇酰胺（尼纳尔)(工业级）。5.4.1测定用脂肪酸烷醇酰胺(0.04%)溶液称取0.4g脂肪酸烷醇酰胺（5.4)溶于1000mL(5.1)水中，搅拌均匀。5.4.2提取用脂肪酸烷醇酰胺（0.005%）溶液量取测定用脂肪酸烷醇酰胺溶液（5.4.1)100mL，溶于700ml水（5.1)中，搅拌均匀。5.5D-果糖。
5.5.1糖标准储备溶液
称取D-果糖（5.5)0.200g，用水（5.1)溶解后，转入100mL容量瓶中，用水（5.1)稀释至刻度。浓度为 2. 0 mg/mL。
5.5.2糖标准工作溶液
用移液管吸取0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0，5.0mL糖标准储备溶液（5.5.1），分别注入50mL容量瓶中，用水（5.1）稀释至刻度，该糖标准系列浓度分别为0.020，0.040，0.060，0.080，0.10，0.12，0.16,0.20 mg/mL.
6主要仪器及器具
6.1分光光度计：波长范围200~800nm。6.2天平：分度值0.01、0.001g。6.3振荡器：>200次/min。
6.4恒温水浴锅。
6.5250ml.磨口具塞锥形瓶。
6.61cm玻璃比色皿。
6.7移液管：1mL，2mL，5mL，符合GB12807—91,A级。6.8容量瓶：50mL、100mL，符合GB12806—91,A级。6.925mL比色管。
7样品
7.1按GB6097规定抽取实验室样品。7.2从实验室样品中随机抽取不少于15g的试验样品。7.3将试验样品中去除粗大杂质，充分混合（或用混样器），从中称取3份作为试料，每份试料重2.0g±(.1g。余样备用。
8分析步骤
8.1试样溶液的配制
取3份试料（7.3），分别置于250mL锥形瓶中。加入0.005%脂肪酸烷醇酰胺溶液（5.4.2）200ml，在振荡器上振荡10min。用玻璃棒将棉花翻过后，继续振荡10min，用定量滤纸过滤，得到3份试料溶液。
8.2空白试验
8.2.1吸取0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液(5.4.1)1.0mL,注于25ml.比色管中。8.2.2将比色管置于70C恒温水浴锅中，快速加入3,5-二羟基甲苯-硫酸溶液2.0mL，摇匀，继续置于水浴锅中40min，取出，加入0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液（5.4.1)20mL，摇匀，冷却至室温，用0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液（5.4.1)定容至刻度。将仪器（6.1)调整好，在425nm波长处测定溶液的吸光值，记录其读数，保留两位小数。8.3测定
GB/T16258--1996
吸取试料溶液（8.1)1.0mL，注于25mL比色管中。以下按8.2.2步骤进行，8.4工作曲线绘制
吸取糖标准工作溶液（5.5.2）各1.0mL，注于25mL比色管中。以下按8.2.2步骤进行。以吸光值为纵坐标、糖的标准工作溶液浓度(mg/mL)为横坐标绘制工作曲线。9试验结果的表述
9.1计算公式
将试料溶液的吸光值减去空白溶液的吸光值，在工作曲线上查出试料溶液的浓度，按式(1)计算糖的含量：
2×1000×100
式中：X-试料含糖率,%;
在标准曲线上查得试料溶液中糖的浓度值，mg/mL，200—预处理试料时所加脂肪酸烷醇酰胺溶液量，mL；2×1000--—试料重量,mg。
所得结果修约至二位小数。以三次试验结果的算术平均值作为该试料的平均含糖率。9.2试验报告
试验报告单见附录A。
10精密度和回收率
10.1精密度
本标准方法的标准偏差(S)为0.014。10.2回收率
本标准方法的回收率在92%～105%之间。（1)
使用标准方法的名称：
棉样编号：
棉样来源：
试验次数
平均值
试验员：
H期：
复核：bzxz.net
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附录Ａ
（提示的附录）
棉花含糖率试验报告单
棉花品种：
试验日期：
棉花含糖率，%
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