本标准规定了肉制品中胭脂红着色剂的测定方法。本标准仅适用于含胭脂红着色剂的肉制品中胭脂红的测定。 GB/T 9695.6-1988 肉制品 胭脂红着色剂测定 GB/T9695.6-1988 标准下载解压密码：www.bzxz.net

中华人民共和国国家标准
肉制品胭脂红着色剂测定
Meat products-Methodfordeterminationof artificial colourponceau-4R1主题内容与适用范围
本标准规定了肉制品中脑脂红着色剂的测定方法。本标准适用于仅含脑脂红着色剂的肉制品中脂红的测定。引用标准
GB9695.19肉与肉制品取样方法
3原理
GB/T9695.6-88
试样脱脂后用碱性溶液提取脂红色素,提取液沉淀蛋白质,用聚酰胺粉使胭脂红吸附和解吸而纯化，用比色法测定。4试剂
除另有说明外,所用试剂均为分析纯,所用水为蒸馏水或相当纯度的水。4.1聚酰胺粉(尼龙6):200目。
4.2硫酸(GB625):1:10溶液。
4.3柠檬酸(HG3—1108)：20%溶液。4.4钨酸钠(HGB3172)：10%溶液。4.5石油醚（HG3—1003)：沸程60~90℃。4.6海砂：化学纯，先用1：10盐酸溶液煮沸15min.用水洗至中性，再用5%氢氧化钠溶液煮15min用水洗至中性，于105℃干燥，贮于具塞瓶中，备用。4.7乙醇-氨溶液：取氨水1mL，加70%乙醇至100mL。4.8氢氧化胺(GB631)：1:99溶液。4.9胭脂红标准溶液：
4.9.1胭脂红标准贮备液：称取胭脂红食用色素0.100g.用20%柠檬酸酸化至pH6的水定容至100mL此溶液胭脂红含量为1mg/mL。4.9.2胭脂红标准使用液：临用时吸取标准贮备液5.0mL,用20%柠檬酸酸化至pH6的水定容至50mL此溶液胭脂红含量为0.1mg/mL。5仪器和设备
5.1实验室常规仪器和设备。
5.2绞肉机：孔径不超过4mm。
5.3G3砂芯漏斗。
5.4分光光度计。
6试样
6.1按GB9695.19取样。bZxz.net
6.2至少取有代表性的试样200g，于绞肉机中至少绞两次使其均质化并混匀，试样贮存期间必须防止腐败和成分变化，尽快分析试样。7分祈步骤
7.1提取
称取试样5.0～10.0g置研钵中，加海砂少许，细研磨至粉末状，吹冷风使试样略为干燥,加入石油醚50mL,搅拌,放置片刻,倾出石油醚,如此重复处理三次,除去脂防吹干。加入乙醇-氨溶液提取脂红，通过砂芯漏斗抽滤提取液.反复多次直至脑脂红全部提完，收集全部提取液于250mL锥形瓶中。7.2沉淀蛋白质
在水浴上使提取液浓缩至10mL以下，依次加入1:10硫酸溶液1.0mL和10%钨酸钠溶液
1mL混匀，继续加热5min,沉淀蛋白质。取下，彻底冷却至室温过滤,用少量水洗涤滤纸，滤液准确稀释至50mL或100mL，备用。7.3纯化
吸取滤液25.0mL于100mL锥形瓶中，在水浴上加热到70℃加入聚酰胺粉0.51g，充分搅拌.使脑脂红完全被吸附。将聚酰胺粉全部转入G3砂芯漏斗，缓慢地抽滤。用20%柠檬酸酸化至pH4的70℃水分三次洗涤，每次20mL，再用70℃水多次洗涤至滤液为中性。以上洗涤过程要搅拌。用1：99氨溶液分次解吸全部胭脂红色素，收集全部解吸液，于水浴上驱氨，准确稀释至25mL或50mL，备用。同一试样进行两次测定并做空白试验。7.4测定
分别吸取脑脂红标准使用液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL置50mL容量瓶中稀释至刻度,此时瓶中胭脂红浓度分别为0、4、8、12、16、20μg/mL,上述标准溶液用1cm比色杯，以标准系列空白调节零点，在510nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。试液用1cm比色杯，以试剂空白调节零点，与标准同样条件测定。根据试液的吸光度从标准曲线上查得相应的胭脂红浓度。
8分析结果的计算
c×10**-6
X(g/kg)=
mx×××10**-3
式中：X——试样中胭脂红含量，g/kgc—试液中脂红浓度,ug/mL;
m——试样质量，g;
V1—试样沉淀蛋白质后总体积,mL；V2—试样胭脂红解吸后总体积,mL。当分析结果符合充许差的要求时，则取两次测定的算术平均值作为结果，精确至0.001g/kg。
9允许差
由同一分析者同时或相继进行的两次测定结果之差不得超过0.01g/kg。附加说明：
本标准由中华人民共和国商业部食品局提出。本标准由中国肉类食品综合研究中心归口。本标准由上海市食品公司卫生检测研究中心站负责起草。本标准主要起草人翟为安、费莎、潘珏。中华人民共和国商业部1988-02-25批准1989-03-01实施
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