DB32/T4840—2024 大球盖菇菌种生产技术规程 ICS 65.020.20 CCS B29 江苏省地方标准 发布与实施信息： 2024-09-12 发布 2024-10-12 实施 江苏省市场监督管理局 发布 中国标准出版社 出版 前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 本文件某些内容可能涉及专利，发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由江苏省园艺标准化技术委员会提出、归口并组织实施。 起草单位：江苏江南生物科技有限公司、江苏省农业科学院、丹阳市园艺推广站、镇江市标准化研究中心。 主要起草人：李辉平、姜雅、张凯、曲绍轩、姜建新、曹娟、束霖平、张丹凤、王琳、顾梦婷。 1 范围 本文件规定了大球盖菇（Stropharia rugosoannulata）菌种生产的基本要求，以及母种、原种、栽培种、记录与留样等要求。 本文件适用于大球盖菇菌种生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过规范性引用构成本文件必不可少的条款。注日期引用文件仅该版本适用，不注日期引用文件其最新版本（含修改单）适用。 GB 4806.7 食品安全国家标准 食品接触用塑料材料及制品 GB 5749 生活饮用水卫生标准 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 基本要求 技术人员、场地选择、厂房设置与布局、设备设施、使用品种和种源应符合NY/T 528规定。 5 母种 5.1 容器与培养基 培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：马铃薯200g（浸出汁）、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL，pH自然。 5.2 灭菌与制备 培养基分装量不超过试管容量1/4，在121℃灭菌30min。 灭菌结束后温度降至65℃±5℃时，在洁净环境中制备斜面，斜面长度不超过试管的2/3。 5.3 接种培养 按NY/T 528规定执行并做好标记。接种后试管置于23℃～25℃避光培养，待菌丝长满斜面2/3以上。 6 原种 6.1 固体原种 6.1.1 容器 容器应符合NY/T 528规定，塑料制品应符合GB 4806.7规定。 6.1.2 培养料 可采用以下配方： （1）谷粒98%，碳酸钙2%，含水量60%～62%； （2）木屑78%，麸皮20%，碳酸钙2%，含水量60%～62%。 6.1.3 灭菌 按NY/T 528规定配制后分装原种瓶（袋），在121℃～123℃灭菌2h。 6.1.4 接种培养 冷却至26℃以下接种，置培养室23℃～25℃避光培养，空气相对湿度55%～65%，二氧化碳浓度低于0.5%。菌丝长满瓶（袋）后结束培养。 6.1.5 质量检验 培养完成后进行质量检验，检查要求见附录A。 6.2 液体原种 6.2.1 摇瓶液体原种 培养基：马铃薯200g（浸出液）、稻壳100g（浸出液）、葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g，加水至1000mL，pH自然。 灭菌：装液量不超过摇瓶容量2/5，121℃灭菌30min。 接种培养：将母种切割为3mm～5mm菌块接入，每100mL接种10粒。25℃静置培养2d后转振荡培养箱，25℃、150r/min振荡培养5～7d。 质量检验：按附录B要求执行。 6.2.2 发酵罐液体原种 培养基参考配方：每1000mL水中加入玉米粉7.5g、黄豆粉5g、葡萄糖20g、蛋白胨2g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g。