DB61/T1138—2018 水质粪大肠菌群的测定 酶底物法 Water quality Determination of fecal coliforms Enzyme substrate method 发布机构：陕西省质量技术监督局 发布日期：2018-04-12 实施日期：2018-05-12 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009和HJ168—2010规则起草，由陕西省环境监测中心站和陕西省环境保护厅提出，归口单位为陕西省环境保护厅。起草单位为陕西省环境监测中心站。主要起草人包括许锋、张会强、刘敏、周弛、吴卫东、马文鹏、张秦铭、宁西翠、许伊蕾、张静雪。本标准由陕西省环境监测中心站负责解释，首次发布。 联系信息： 单位：陕西省环境监测中心站 电话：029-85429127 地址：陕西省西安市雁塔区西影路106号 邮编：710054 1 范围 本标准规定了水中粪大肠菌群测定的酶底物法的术语和定义、方法原理、试剂与材料、仪器与设备、样品、分析步骤、结果计算与表示、质量保证与质量控制及废物处理要求。适用于地表水、生活污水和废水的检测。当接种量为300 mL时，方法检出限为3 MPN/L，检测范围为3 MPN/L～230 MPN/L；当接种量为100 mL时，方法检出限为10 MPN/L，51孔定量孔板检测范围为10 MPN/L～2005 MPN/L，97孔定量孔板检测范围为10 MPN/L～24196 MPN/L。 2 规范性引用文件 下列文件对本标准的应用必不可少。注明日期的引用文件，其注日期版本适用于本标准；未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本标准。 - GB/T 5750.12 生活饮用水标准检验方法 微生物指标 - GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 3.1 粪大肠菌群（fecal coliforms） 亦称耐热大肠菌群（thermotolerant coliforms），在44.5℃下培养可发酵乳糖产生酸气，为需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。 3.2 最可能数（most probable number, MPN） 基于泊松分布的一种间接计数方法。 4 方法原理 粪大肠菌群在ONPG培养基上培养产生β-D-半乳糖苷酶，可分解底物释放黄色邻硝基苯酚，通过颜色变化进行定性，MPN法进行定量。 5 试剂与材料 5.1 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水符合GB/T 6682一级水标准。 5.2 培养基可选用市售商品化酶底物法试剂，或自配培养基，成分参照附录A。 5.3 硫代硫酸钠（Na2S2O3） 5.4 乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2） 5.5 氯化钠（NaCl） 5.6 硫代硫酸钠溶液：0.10 g/mL，临用现配。 5.7 EDTA-Na2溶液：0.15 g/mL，可存放30天。 5.8 灭菌生理盐水：0.9%（m/v），121℃高压灭菌20分钟备用。 6 仪器与设备 6.1 采样瓶：500 mL棕色磨口玻璃瓶 6.2 恒温培养箱：44.5℃ ±0.5℃ 6.3 高压蒸汽灭菌器：121℃, 0.101 MPa 6.4 冰箱：0~1℃ 6.5 恒温干燥箱：0~300℃ 6.6 程控定量封口机：带51孔和97孔胶托 6.7 51孔和97孔定量孔板：无菌 6.8 100 mL无菌取样瓶 6.9 试管：15 mm × 150 mm