ICS 65.120 B46 DB37 山东省地方标准 DB37/T 3421—2018 混合型饲料添加剂中氟喹诺酮类药物的测定 高效液相色谱法 Determination of fluoroquinolones in mixed feed additives - High performance liquid chromatography 2018-09-14发布 2018-10-14实施 山东省质量技术监督局 发布 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由山东省畜牧兽医局提出。 本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。 本标准主要起草单位：山东省饲料质量检验所。 本标准主要起草人：张芸、孙延军、张玮、宫玲玲、李俊玲。 1 范围 本标准规定了采用高效液相色谱法测定混合型饲料添加剂中氟喹诺酮类药物（诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、甲磺酸达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星）的方法。 本标准适用于以稻壳粉、玉米皮、葡萄糖、玉米淀粉及其混合物（含桔梗、甘草、白术、赤芍、知母、茯苓等）为载体的混合型饲料添加剂中上述药物的测定。 检出限：诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星为0.15 mg/kg，定量限0.5 mg/kg；甲磺酸达氟沙星检出限0.05 mg/kg，定量限0.15 mg/kg。 2 规范性引用文件 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195 动物饲料试样的制备 3 原理 试样中氟喹诺酮类药物经盐酸甲醇溶液提取后，采用高效液相色谱-荧光检测法测定，并采用外标法定量。 4 试剂与材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 4.1 甲醇。 4.2 乙腈：色谱纯。 4.3 乙腈水溶液：乙腈+水=1+9（V/V）。 4.4 盐酸溶液：c(HCl)=0.1 mol/L。 4.5 盐酸甲醇溶液：盐酸溶液+甲醇=8+2（V/V）。 4.6 柠檬酸-乙酸铵缓冲溶液：柠檬酸10.56 g与乙酸铵7.87 g溶于约800 mL水中，用冰乙酸或三乙胺调pH至4.0并定容至1000 mL，过0.22 μm滤膜备用。 4.7 氢氧化钠溶液：c(NaOH)=30 mmol/L。 4.8 标准品：诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、甲磺酸达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星。 4.9 标准储备液（1 mg/mL）：各标准品10 mg溶于NaOH溶液定容，2℃～8℃避光保存，有效期6个月。 4.10 标准工作液I（100 μg/mL）：由储备液稀释制得，2℃～8℃保存。 4.11 标准工作液II（10 μg/mL）：由工作液I稀释制得，2℃～8℃保存。 4.12 标准系列溶液：配制0.01～5 μg/mL系列溶液，现用现配。 5 仪器设备 5.1 高效液相色谱仪（配荧光检测器）。 5.2 分析天平（0.001 g及0.01 mg）。 5.3 涡旋混合器。 5.4 离心机（≥5000 r/min）。 5.5 微孔滤膜（0.22 μm）。 6 样品制备 按GB/T 20195制备试样，粉碎过0.45 mm筛，混匀备用。 7 试验步骤 7.1 提取 称取试样2 g（精确至0.001 g），加入盐酸甲醇溶液10 mL，涡旋振荡10 min后以5000 r/min离心10 min，取上清液过滤备用。 7.2 测定 （液相色谱条件后续内容未完整识别）