SC 1019-1997
基本信息
标准号:
SC 1019-1997
中文名称:荷包红鲤
标准类别:水产行业标准(SC)
标准状态:已作废
出版语种:简体中文
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标准分类号
中标分类号:农业、林业>>水产、渔业>>B52淡水养殖与产品
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相关单位信息
标准简介
SC 1019-1997 荷包红鲤 SC1019-1997 标准下载解压密码:www.bzxz.net
标准内容
SC1019—1997
荷包红鲤是长期人工选育而成的、性状稳定的一个地方品种,为我国所特有。为保护和保存荷包红鲤种质的优良性状,防止变异和退化,特制定本标准。本标准的附录A和附录B是标准的附录。本标准从1997年9月1日起实施。本标准由农业部渔业局提出。
本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位:江西省婺源县荷包红鲤研究所。本标谁主要起草人:张德蜀、刘英喜。237
1范围
中华人民共和国水产行业标准
荷包红!
Red purse-carp
SC 1019-1997
本标准规定了荷包红鲤(Cyprinus carpio Linnaeus)主要生物学性状、生化指标、染色体和核型,以及检测方法。适用于荷包红鲤鉴定。2名称与分类
2.1学名
荷包红鲤(Cyprinus carpio linnaeus)。2.2分类位置
属鲤形目(Cypriniformes),鲤科(Cyprinidae),鲤亚科(Cyprininae),鲤属(Cyprinus),鲤亚属(Cyprinus Linnaeus),种(Cyprinus carpio Linnaeus)。3 主要生物学性状
3.1外部特征
3.1.1形态
头小,尾短,背高,体宽,背部隆起,腹部肥大,形似荷包。体背、体侧全红色,无斑点,腹部白色,外形见图1。
3.1.2可数性状
3.1.2.1背鳍条数:不分支鳍条数3,分支鳍条数16~18。3.1.2.2臀鳍条数:不分支鳍条数3,分支鳍条数5。3.1.2.3鳞式:36
5~~6
3.1.2.4第鳃弓鳃粑数:外侧21~22,内侧27~28。3.1.2.5口须:2对。
3.1.3可量性状
可量性状变动值见表1。
中华人民共和国农业部
1997-03-18批准
1997-09-01实施
体长/体高
2.00~2.30
3.2内部特征
体长/头长
2. 60 ~2. 97
SC 1019-1997
图1荷包红鲤外形
体长/体宽
3.15~3.50
体高/体宽
1.54~~1.70
体长/尾柄长
9.13~10.40
分两室。前室大,后室小,前室长度为后室长度的1.29~3.30倍。3.2.2肋骨
15~16对。
3.2.3下咽齿
为3行。齿式为1·1·3/3·1·1。3.2.4脊椎骨
体长/尾柄高
5.30~~5.77
总数为颅后椎骨、腹椎骨、尾椎骨数之和,即:35~36=4十(16~17)+15。3.2.5腹膜
乳白色。
成鱼肠长与体长比为2.5~3.5:1。3.3生长与繁殖
3.3.1生长
尾柄长/尾柄高
0.42~0.65
SC1019-1997
体重的增长随年龄的增加而增长,体长增长逐渐减缓,体高、体宽增长相应加快。不同年龄组的鱼体长和体重的实测值见表2。表2
年龄\”,龄
体长,mm
体重,8
167~216
252780
205~255
615~~1 350
1)年龄,主要依据鳞片上的年轮数(再生鳞除外)。3.3.2繁殖
235~346
1 185~1 825
3.3.2.1性成熟年龄:雌鱼为2+龄,雄鱼为1+龄,3.3.2.2性腺一年成熟一次,分批产出。3.3.2.3繁殖水温:18~26℃。
3.3.2.4怀卵量:不同年龄个体怀卵量见表3。表3
生化指标
4: 1血清同工酶(LDH)
240~255
250~305
265~335
315~350
4.1.1血清LDH电泳图谱见图2。
4. 1.2血清 LDH各区带扫描图见图 3。图2 血清 LDH 同工酶电泳图谱
1043~1350
1 275~1 715免费标准bzxz.net
1305~2250
2 050~2 675
247375
1 285~~2 655
305~382
1 650~~2 875
绝对怀卵量
210540270790
260 218383 414
321 570~557 760
435760~784420
362-395
2 765~3 370
相对怀卵量
180245
193276
214~340
191322
哪啦啦
图3血清LDH同工酶酶带扫描图
SC1019-1997
4.1.3血清LDH同工酶各区带百分含量见表3。表3
染色体数和核型
5.1体细胞染色体2倍数
2n=100。
5.2核型
中部着丝粒染色体(m组)12对,亚中部着丝粒染色体(sm组)16对,亚端部着丝粒染色体(st组)22对,染色体臂数(NF)78(见图4)。Y
6检测方法
6.1血液分析
6.1.1血清制备
染色体组型
尾动脉抽血,离心取血清,置于一15℃冰箱中保存待用。6.1.2血清LDH同工酶分离和百分含量测定*X
6.1.2.1电泳分离:用马铃薯淀粉凝胶电泳分离,可见5条谱带。LDH马铃薯淀粉凝胶电泳方法见附录A(标准的附录)。
6.1.2.2扫描测定:使用扫描光密度仪对电泳图谱进行扫描,并测出各区带含量。6.2染色体检测
6.2.1标本制备
从尾动脉抽血,离心取白细胞,在含小牛血清、植物凝聚素(PHA)的培养液里培养,秋水仙素处理。空气中自然干燥制片,吉姆萨(Giemsa)液染色。Giemsa染色液的配制见附录B(标准的附录)。6.2.2计数
SC1019—1997
在光镜下,选取染色体铺散良好、完整的中期分裂相计算染色体数目,确定2n数。6.2.3形态分类
选择10个以上清晰的染色体中期分裂相,进行显微拍照,按放大照片剪贴配组,进行染色体组型分析,并按以下标准分类:臂比1.0~1.7为中部着丝粒染色体,m组;臂比1.7~~3.0为亚中部着丝粒染色体,sm组;臂比3.0~7.0为亚端部着丝粒染色体,st组;臂比7.0~c为端部着丝粒染色体,t组。m组和sm组染色体臂数为2;st组和t组染色体臂数为1。242
A1器材
SC 1019-1997
附录A
(标准的附录)
LDH马铃薯淀粉凝胶电泳方法
A1.1凝胶板膜框。用有机玻璃自行制备。框内尺寸170mm×130mm×10mm,框底均布4个直径为15mm的圆孔。
A1.2托胶玻璃板,外形尺寸170mm×130mm×3mm,若干块。A1.3弓形金属丝锯。
A1.4水平平板电泳仪。
A1.5其他电泳常规用品。
A2试剂
A2.1EBT电泳缓冲液:0.02mol乙二胺四乙酸钠盐(EDTA),0.5mol硼酸,0.9mol三羟甲基氨基甲烷(tris),pH8.6。
使用时EBT需按下列比例稀释:阳极缓冲液用,作1:5稀释;阴极缓冲液用,作1:7稀释;制淀粉胶缓冲液用,作1:20稀释。
A2.2电泳用的水解淀粉:取马铃薯淀粉100g,加入200mL水解液[丙酮:浓盐酸(HC1)=200:1],混合摇勾,在37~38℃水浴中水解,每隔10min摇匀--次。约1.5h后,立即加入1mol醋酸钠50mL摇匀,终止水解。布氏漏斗(一层滤纸)抽滤,用过量无离子水冲洗过滤6~7次,至滤液无氯离子为止(或pH与冲洗用无离子水一样)。最后用丙酮浸泡脱水,抽滤干,放置37℃下干燥,研细,过100目筛,保存于干燥的广口瓶里备用。
注:水解时间要根据不同厂牌、批号产品的淀粉而定,最好先做小批试验。水解时间不够,制胶过程中,加温后凝胶液浓稠,气泡不易排出;若水解过度则呈稀液状。A2.3LDH酶活性染色液:
浓度为5mg/mL氧化型辅酶1
浓度为1mg/mL氯化硝基四氮唑蓝浓度为1mg/mL盼嗪二甲酯硫酸盐1 mol乳酸钠
0.5mol三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液(pH7.0)0.1mol氯化钠
加双蒸水到25mL。
A3试验步骤
A3.1制备胶板:称取电泳淀粉24g,置三角瓶内,加人200mLEBT缓冲液(1:20稀释),摇匀后,边加热边旋转,升温至90℃后淀粉溶解呈透明粘稀液,并出现小气泡。立即抽气减压(约几分钟),排出气泡,趁热倾入已备好的制胶板膜框内(框底预先垫好托胶玻璃板),稍过量,冷凝后用金属丝锯平,使凝胶与膜框边缘水平。胶层厚约6~7mm。凝胶板冬天在室温过夜,夏秋则在4℃冰箱中放2h后备用。A3.2加样用30mm×4mm的薄金属片(或剃刀片),在凝胶板负极一侧离胶板边缘10mm处沿-直线插割加样缝4~8段,各段相距6~8mm再取4mm×12mm的滤纸片对折,蘸上血清样品(约40 μL),用镊子插入加样缝内,轻轻压平缝。243
SC 1019--1997
A3.3电泳:将已加样的凝胶板,放在水平式电泳槽内,搭上3~5层滤纸电桥,盖上槽盖或胶面复层蜡纸以免水分蒸发。正极加入1:5稀释EBT缓冲液,负级加入1:7稀释EBT缓冲液,电压梯度为7~10V/cm,电流强度为2~2.2mA/cm,在4C冰箱里电泳6~8h。A3.4染色:电泳完毕后,取出胶板,通过框底圆孔顶出胶板,另垫入一块托胶玻璃板,用金属丝锯沿框边水平切去--层胶,同法切取中间胶层,放置LDH酶活性染色液中,37℃温浴显色1h,或50℃温箱里显色2h,蒸馏水漂洗二次,50%~75%乙醇中保存。附录B
(标准的附录)
吉姆萨(Giemsa)染色液配制
B1 Giemsa 染色母液配制
称量G.5gGiemsa粉,量取甘油33mL,在研钵中先用少量甘油与Giemsa粉混合,研磨至无颗粒时再将剩余甘油加入,在56℃条件下保温2h后,加入33mL甲醇,保存于棕色瓶内。B2pH7.2磷酸缓冲液配制
0.2mol磷酸氢二钠(Na2HPO.)溶液72.0 mL加上0.2mol 磷酸二氢钠(NaH,PO,)溶液28.0 mL即成。
B3Giemsa工作染色液配制
取100mLpH7.2磷酸缓冲液,加入3mLGiemsa染色母液即成。241
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