ICS 65.020.20 B04 DB12 天津市地方标准 DB12/T 885—2019 植物提取物中原花青素的测定 紫外/可见分光光度法 Determination of polysaccharide in Lily Bulbus — UV/VIS spectrophotometry 2019-03-25发布 2019-05-01实施 天津市市场监督管理委员会发布 前言 本标准依据GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由天津市农业科学院提出并归口，由天津市农业质量标准与检测技术研究所起草。 本标准主要起草人：刘征辉、赵琳琳、魏静娜、张强、赵云平、薛天凯、徐石勇、郑贵忠。 1 范围 本标准规定了采用紫外/可见分光光度法测定植物提取物中原花青素含量的原理、试剂材料、仪器设备、分析步骤、分析结果表述和精密度。 本标准适用于植物提取物中原花青素的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡注日期的引用文件，仅注日期版本适用；凡不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 原花青素本身无色，经热酸处理后可生成红色花青素离子，通过分光光度法测定其吸光度，从而计算样品中原花青素含量。 4 试剂和材料 4.1 试剂 甲醇（CH₃OH）、正丁醇、盐酸（HCl，35%～37%）、硫酸铁铵（NH₄Fe(SO₄)₂·12H₂O）、水（符合GB/T 6682一级水要求）。 4.2 试剂配制 盐酸-正丁醇溶液：正丁醇50 mL中加入盐酸5 mL，定容混匀备用。 2 mol/L盐酸溶液：盐酸20 mL加水至100 mL。 硫酸铁铵溶液：2.0 g硫酸铁铵溶于2 mol/L盐酸溶液，经水浴溶解后定容至100 mL。 4.3 标准品 原花青素标准品纯度≥95%或标准物质证书产品。 4.4 标准溶液配制 原花青素储备液（1.0 mg/mL）：10 mg定容至10 mL甲醇溶液。 标准工作液：配制0～250 μg/mL系列浓度标准溶液用于标准曲线绘制。 5 仪器和设备 紫外分光光度计（110～900 nm）、超声波提取仪、涡旋混合仪、分析天平（0.01 mg）、安瓶、封口钳、容量瓶等。 6 分析步骤 6.1 供试品溶液制备：样品经甲醇超声提取后定容，必要时稀释取上清液。 6.2 测定 6.2.1 标准曲线绘制：标准溶液加入显色试剂后密封加热40 min，在546 nm测吸光度，绘制标准曲线。 6.2.2 样品测定：按同样方法处理样品溶液并测定吸光度，通过标准曲线计算含量。 6.3 结果计算 按标准公式计算原花青素含量（公式略）。