DB34/T2252-2014 水产品中孔雀石绿残留的检测—胶体金免疫层析法
发布单位：安徽省质量技术监督局
发布日期：2014-12-17
实施日期：2015-01-17
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前言
本标准按照 GB/T1.1-2009 的规则起草，由合肥市渔政监督管理站提出，安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位包括合肥市畜牧水产技术推广中心、合肥市渔业协会和杭州南开日新生物技术有限公司。本标准起草人包括赖年悦、孙德祥、桑丽雅、周作友、徐薇、陈友顺、杨锐、曹海、张军、夏俊华、陈元生、程定文、方凯、钱继银、桂胡积清、戴靖、陈晓荣、徐丽、沈亭海、徐经云和洪家春。

1 范围
本标准规定了水产品中孔雀石绿（Malachite Green, MG）及其代谢物隐色孔雀石绿（Leucomalachite Green, LMG）的检测方法——胶体金免疫层析法的原理、试剂和材料、仪器设备、测定步骤、结果判断及确证方法。适用于鱼、甲鱼、龟肌肉组织和虾、蟹可食用组织的快速筛查。本方法的检出限为 3.0 μg/kg。

2 规范性引用文件
下列文件对于本标准的应用必不可少。注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用；未注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用。
- GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 原理
本方法为竞争抑制法。将氯金酸还原制备金溶胶颗粒并标记抗体。样品中残留的孔雀石绿及其代谢物通过乙酸胺盐溶液和乙醇提取，经净化和氧化转化为孔雀石绿，再与包被抗孔雀石绿抗体的金标微孔结合物反应。样品溶液在硝酸纤维素膜上毛细管迁移，孔雀石绿与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制抗体与检测线抗原结合，从而通过红色条带显色判断阳性或阴性。

4 试剂和材料
4.1 除特殊说明外，所用试剂均为分析纯，水符合 GB/T6682 二级水要求。
4.2 对甲苯磺酸（CH3SO3H）
4.3 盐酸羟胺（CH3NOH·HCl）
4.4 乙酸铵（CH3COONH4）
4.5 乙醇（CH3CH2OH）
4.6 中性氧化铝（Al2O3），层析用，100~200目，悬浮液 pH 7.5。