CJ/T 3018.14-1993
基本信息
标准号： CJ/T 3018.14-1993
中文名称：生活垃圾渗沥水 细菌总数的检测 平板菌落计数法
标准类别：城镇建设行业标准(CJ)
标准状态：现行
发布日期：1993-05-03
实施日期：1993-09-01
出版语种：简体中文
下载格式：.rar.pdf
下载大小：161156
相关标签： 生活 垃圾 沥水 细菌 总数 检测 平板 菌落 计数法
标准分类号
中标分类号：环境保护>>污染物排放标准>>Z68城市生活污染源控制标准
关联标准
出版信息
页数：4页
标准价格：8.0 元
相关单位信息
标准简介
CJ/T 3018.14-1993 生活垃圾渗沥水 细菌总数的检测 平板菌落计数法 CJ/T3018.14-1993 标准下载解压密码：www.bzxz.net
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标准内容
中华人民共和国城镇建设行业标准生活垃圾渗沥水
细菌总数的检测
平板菌落计数法
Leachate--Detectan of total
bacterial number-plafe countfor bacterial colonies
CJ/T 3018.14-93
1生题内容与适用范闻
本标难规定了用平板菌落计效法测定渗沥水的细菌总数。本标推适用于从生活垃圾中渗出来的被体。2引用标准
GB6750生活饮用水标准检验法细凿总数GH4789.2食品工生微生物学检验菌数总数测定3术语
细凿总数是指1mL沥水试样在·定条件下培养后所生长的细菌菌落的总数。4原理
每种细菌都有其一定的生理特性，应用不同的皆养物质及其它生趣条件（如温度，培养时间、，需性质等）去满足它，才髓分羽地将各种缅菌培养出亲。在实际工作中，一般都只用一种方法（即在嵩养琼胎脂培养基中，于37C经24h培养）进行细菌总数的翘宦，此，所得结果只包括-一群能在哲养惊脂上发育的晚中温性需氧及兼性厌氛的细菌菌落总数。
5培察基和试剂
本标推所用试剂，除另有说明外，均为符合图家标推或行业标雅的化学纯试剂和生化试鹅，均为蒸馅水或去离子水。5,1水Z醇（C2HsOH）。
5.2氢氧化钠（NaOII），15%（m/m）溶液中华人民共和国建设1993-05-03班准50
1993-09-01 实施
CJ/T3018.14-93
将15g氢氧化钠（NaOH)，100mL水中。5.3营养琼脂
5.3.1成份：蛋白陈
氯化钠
蒸馏水
5.3.2制法
10~20g
1000mL
将上述成份合后，加热溶解，滴加氢算化钠液（5.2）调整pH为7.4～7.6，果漏斗分装约15mL干玻璃试管（6.8），在121℃C高压灭菌20min。冷却后贮存在冷暗于燥处备第。
5.4生理盐火
将8.50~9.50g氯化钳（NaC1）溶于水中，稀释戒1000mL，摇匀。pH值应为4.5~7.0。
6仪器、设备
高压蒸汽灭菌器。
6.2于燥箱：最高工作温度300℃。6.3恒湿培养箱：3611℃。
6.4冰箱。
6.5恒温水浴：46±1℃。
6.6放大镜。
6.7稀释瓶，125mL小口玻璃方瓶。6.8肢璃试管：18×180mlm，乎口。6.9平：直径90mm。
刻度吸管：1mL，10mL，分度至0.1mL。6.10
酒精。
了样品
供细菌总数检测的渗沥水实验室样品量约需100mL，用经灭菌处理过的玻璃瓶采集。采样后应尽快检测，在2h内不能处理时，应置温度为25C处，最长保存时问为6h。8步骤
8.1准备工作
8.1.1工作室及操作台经清扫后，用紫外线灭菌10min。8.1.2玻脑器血置干燥箱中160℃灭菌2h。8.1.3将装有90m生理盐水的烯释瓶和9mL生理盐水的试留，前者瓶口橡皮密村上温纸51
YKNKAca
CJ/T3018.14—93
条，后者管口塞上棉花球，置高压蒸汽灭菌器（6.1)内，于121℃灭菌20mi，冷却待用。8.1.4将营养琼鞘赔养基（5.3.2）置于沸水锅内，融化后随郎转入46土1C恒温水，保温待用。
8.2试样稀释
8.2.1以无菌操作，吸取经充分混勾的试样10mL于盛有90mL.灭菌生理盐水的稀释瓶（含.1.3）中，充分混均后就成110的稀释液。8.2.2吸取1：10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管（8.1.3)混匀而成1：1心0的稀释镀。
B.2.3按上述操作进行10倍避增稀释，每递增稀释1次，随即换用1支1mL灭菌刻度吸管。
8.3倾注平
8.3，1根据试样污染程度大小，选择合适的三个连续释度试样进行倾注平Ⅲ。在分别作10倍递增稀释的同时，随即用该释度的吸管移取1Ⅱ工稀释液于灭菌平内，每个稀释度试样液用2个平Ⅲ。
8.3，2将保温在46℃水裕锅内的营养琼脂培养基倾注于平血内，并立即转动或倾斜乎迅，使稀释液与培养基充分混合。
同时，将营养琼脂培养基倾入加有1㎡L空白灭菌生理盐水的另外2个灭菌平血作空自对照。
8.4平板培养
待琼脂凝固后，翻转平板，使底面向上，置于36土1℃恒湿培养箱内增养24土2h。8.5菌落计数
8，5.1培养后，应立即计数每个平板上的菌落数。如果遇上不能立即计数，应将平Ⅲ存放于5~10℃，但不得超过24h
8.5.2作平板菌落计数时，旧肉眼观紧计数，必要时用放大镜检查，以防遗漏。按30.～300个菌落计数规则计算平板的菌落数。B.6菌落计数规则
8.6.1首先选择平均菌落数在30--300之叫的稍释度，爽以释数报告之（见表1中例1)，
8.6.2若有2个播释度，其平均菌落数均在30～300之间，则视两之比来决定。若其比值小于2，应报告其平均数，岩大于2，则报告其较小的菌落总数（觅表1中阅2或例3.
8，6.3若所有稀释度的半均凿落数大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释数报告之（见表1中例4）
8.6.4若所有稀释度的死均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的乎均菌落数乘以稀释倍数报告之（见袭1中例5）
8.6.5若所有稀释度的平-均菌落数均不在30～300之间，其中--部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中例6）。52
8.6.6葛延长菌落
CJ/T3018.14-93
在求一个稀释度的平均菌落数肘，若其中一个平板有较大片状整延菌生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的乎板作为该释度的菌落数，者片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可计数半个平板后乘2以代表全皿菌落数，然后再求该稀释度的平均菌落数。
9报告方式
根据菌落计数，凡菌落数在100以内时，按其实际计数表示，大于100时，取二位有效数字，也可用10的指数形式表示，并以每毫升样品中平板菌蕃个数报告。10本标准未作规定的按GB5750和GB4789.2执行。表1稀释度选择及平板菌落数报告方式例
不同稀释度的平
均蓄落数
多到无
法讲数
多到元
法评数
多到无
法注教
多到无
法计数
多等丢
附加说明：
本标准由建设部标定额研究所提出。两个稀释
度的菌落
数之比
菌落总数wwW.bzxz.Net
个/nL
313000
报告方式
个/mL
或1.6×10+
或3.B×10*
310000
或3.1×105
或2.7×10
或3.1×10t
本标推由建设部城镇环境卫生技术标准归口单位上海市环境卫生管理局归口。本标准由1海市环境卫生设计科研所负责起草。本标谁主要起草人庄启化、章莉娜。本标雅委托上海市环境卫生设计科研所负责解释。53
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细菌总数的检测
平板菌落计数法
Leachate--Detectan of total
bacterial number-plafe countfor bacterial colonies
CJ/T 3018.14-93
1生题内容与适用范闻
本标难规定了用平板菌落计效法测定渗沥水的细菌总数。本标推适用于从生活垃圾中渗出来的被体。2引用标准
GB6750生活饮用水标准检验法细凿总数GH4789.2食品工生微生物学检验菌数总数测定3术语
细凿总数是指1mL沥水试样在·定条件下培养后所生长的细菌菌落的总数。4原理
每种细菌都有其一定的生理特性，应用不同的皆养物质及其它生趣条件（如温度，培养时间、，需性质等）去满足它，才髓分羽地将各种缅菌培养出亲。在实际工作中，一般都只用一种方法（即在嵩养琼胎脂培养基中，于37C经24h培养）进行细菌总数的翘宦，此，所得结果只包括-一群能在哲养惊脂上发育的晚中温性需氧及兼性厌氛的细菌菌落总数。
5培察基和试剂
本标推所用试剂，除另有说明外，均为符合图家标推或行业标雅的化学纯试剂和生化试鹅，均为蒸馅水或去离子水。5,1水Z醇（C2HsOH）。
5.2氢氧化钠（NaOII），15%（m/m）溶液中华人民共和国建设1993-05-03班准50
1993-09-01 实施
CJ/T3018.14-93
将15g氢氧化钠（NaOH)，100mL水中。5.3营养琼脂
5.3.1成份：蛋白陈
氯化钠
蒸馏水
5.3.2制法
10~20g
1000mL
将上述成份合后，加热溶解，滴加氢算化钠液（5.2）调整pH为7.4～7.6，果漏斗分装约15mL干玻璃试管（6.8），在121℃C高压灭菌20min。冷却后贮存在冷暗于燥处备第。
5.4生理盐火
将8.50~9.50g氯化钳（NaC1）溶于水中，稀释戒1000mL，摇匀。pH值应为4.5~7.0。
6仪器、设备
高压蒸汽灭菌器。
6.2于燥箱：最高工作温度300℃。6.3恒湿培养箱：3611℃。
6.4冰箱。
6.5恒温水浴：46±1℃。
6.6放大镜。
6.7稀释瓶，125mL小口玻璃方瓶。6.8肢璃试管：18×180mlm，乎口。6.9平：直径90mm。
刻度吸管：1mL，10mL，分度至0.1mL。6.10
酒精。
了样品
供细菌总数检测的渗沥水实验室样品量约需100mL，用经灭菌处理过的玻璃瓶采集。采样后应尽快检测，在2h内不能处理时，应置温度为25C处，最长保存时问为6h。8步骤
8.1准备工作
8.1.1工作室及操作台经清扫后，用紫外线灭菌10min。8.1.2玻脑器血置干燥箱中160℃灭菌2h。8.1.3将装有90m生理盐水的烯释瓶和9mL生理盐水的试留，前者瓶口橡皮密村上温纸51
YKNKAca
CJ/T3018.14—93
条，后者管口塞上棉花球，置高压蒸汽灭菌器（6.1)内，于121℃灭菌20mi，冷却待用。8.1.4将营养琼鞘赔养基（5.3.2）置于沸水锅内，融化后随郎转入46土1C恒温水，保温待用。
8.2试样稀释
8.2.1以无菌操作，吸取经充分混勾的试样10mL于盛有90mL.灭菌生理盐水的稀释瓶（含.1.3）中，充分混均后就成110的稀释液。8.2.2吸取1：10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管（8.1.3)混匀而成1：1心0的稀释镀。
B.2.3按上述操作进行10倍避增稀释，每递增稀释1次，随即换用1支1mL灭菌刻度吸管。
8.3倾注平
8.3，1根据试样污染程度大小，选择合适的三个连续释度试样进行倾注平Ⅲ。在分别作10倍递增稀释的同时，随即用该释度的吸管移取1Ⅱ工稀释液于灭菌平内，每个稀释度试样液用2个平Ⅲ。
8.3，2将保温在46℃水裕锅内的营养琼脂培养基倾注于平血内，并立即转动或倾斜乎迅，使稀释液与培养基充分混合。
同时，将营养琼脂培养基倾入加有1㎡L空白灭菌生理盐水的另外2个灭菌平血作空自对照。
8.4平板培养
待琼脂凝固后，翻转平板，使底面向上，置于36土1℃恒湿培养箱内增养24土2h。8.5菌落计数
8，5.1培养后，应立即计数每个平板上的菌落数。如果遇上不能立即计数，应将平Ⅲ存放于5~10℃，但不得超过24h
8.5.2作平板菌落计数时，旧肉眼观紧计数，必要时用放大镜检查，以防遗漏。按30.～300个菌落计数规则计算平板的菌落数。B.6菌落计数规则
8.6.1首先选择平均菌落数在30--300之叫的稍释度，爽以释数报告之（见表1中例1)，
8.6.2若有2个播释度，其平均菌落数均在30～300之间，则视两之比来决定。若其比值小于2，应报告其平均数，岩大于2，则报告其较小的菌落总数（觅表1中阅2或例3.
8，6.3若所有稀释度的半均凿落数大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释数报告之（见表1中例4）
8.6.4若所有稀释度的死均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的乎均菌落数乘以稀释倍数报告之（见袭1中例5）
8.6.5若所有稀释度的平-均菌落数均不在30～300之间，其中--部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中例6）。52
8.6.6葛延长菌落
CJ/T3018.14-93
在求一个稀释度的平均菌落数肘，若其中一个平板有较大片状整延菌生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的乎板作为该释度的菌落数，者片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可计数半个平板后乘2以代表全皿菌落数，然后再求该稀释度的平均菌落数。
9报告方式
根据菌落计数，凡菌落数在100以内时，按其实际计数表示，大于100时，取二位有效数字，也可用10的指数形式表示，并以每毫升样品中平板菌蕃个数报告。10本标准未作规定的按GB5750和GB4789.2执行。表1稀释度选择及平板菌落数报告方式例
不同稀释度的平
均蓄落数
多到无
法讲数
多到元
法评数
多到无
法注教
多到无
法计数
多等丢
附加说明：
本标准由建设部标定额研究所提出。两个稀释
度的菌落
数之比
菌落总数wwW.bzxz.Net
个/nL
313000
报告方式
个/mL
或1.6×10+
或3.B×10*
310000
或3.1×105
或2.7×10
或3.1×10t
本标推由建设部城镇环境卫生技术标准归口单位上海市环境卫生管理局归口。本标准由1海市环境卫生设计科研所负责起草。本标谁主要起草人庄启化、章莉娜。本标雅委托上海市环境卫生设计科研所负责解释。53
YKoNTKAca=
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