YY/T 0688.1-2008
基本信息
标准号： YY/T 0688.1-2008
中文名称：临床实验室检测和体外诊断系统感染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性试验设备的性能评价 第1部分:抗菌剂对感染性疾病相关的快速生长需氧菌的体外活性检测的参考方法
标准类别：医药行业标准(YY)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
下载格式：.zip .pdf
下载大小：8473417
相关标签： 临床 实验室 检测 体外 诊断系统 感染 病原体 试验 抗菌剂 试验设备 性能 评价 感染性 快速 生长 活性 参考 方法
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
YY/T 0688.1-2008.Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic test systems-Susceptibility testing of infectious agents and evaluation of performance of antimicrobial susceptibility devices-Part 1: Reference method for testing the in vitro activity of antimicrobial agents against rapidly growing aerobic bacteria involved in infectious diseases.
1范围
YY/T0688的本部分介绍了测定抗菌剂MIC值的-一种参考方法一-肉汤微量稀释法。MIC值仅反映抗菌剂在规定的体外试验条件下的抗菌活性。医生在制定用药方案时,不但要参考MIC结果,还应考虑诸如药物在人体内的药代/药效学参数以及细蒲对抗菌剂的耐药机制等其他因索。对于某种抗.菊剂,根据体外敏感性试验结果(MIC值)可将相应受试荫划分为“敏感(S)”。“中介(1)”和“耐药(R)”。另外,MIC值可用于确定该受试菌株是野生型还是非野生型。尽管解释MIC值的临床意义已超出了
YY/T 0688.1的范晦,但为了适应临床需婴.根据不同抗菌剂细荫组合对方法的基本内容进行调整是必要的。这些调整体现在下列各表格中。为了确保试验结果的叮比性与可靠性,其他药敏试验方法(如常规方法或抗菌剂敏感性试验设备)应该和本参考方法进行比对以确定其准确性.
2术语及定义
下列术语和定义适用于YY/T 0688的本部分。
2.1
抗菌剂antimicrobial agent-类可以抑制或杀死微生物,可能用于抗感染治疗的生物来源的、合成的或半合成的物质的总称。
注:消毒剂、灭菌剂和防腐剂不在此定义范围内。
2.2
抗菌剂属性properties of antimicrobial agents
2.2.1
效价potency受试物中有效抗菌活性成分所占比例，是受试物通过生物学方法所测值与相同质量或体积的参考品通过相同方法测得值的比率。
注:效价的单位有毫克/克(mg/g).国际活性单位/克(IU/g)或百分含量(%,体积分数或质量分數)或受试物的物质的量浓度(mol/L).
2.2.2
浓度concentration抗菌剂在规定体积溶液中的量。
注1;常用毫克/升(mg/L)来表示.
注2:虽然mg/1.= 14g/mL,但不推荐使用1ug/ml.作为单位.
2.3
原液stock solutions用于进一步稀释的初始浓度溶液。
1范围
YY/T0688的本部分介绍了测定抗菌剂MIC值的-一种参考方法一-肉汤微量稀释法。MIC值仅反映抗菌剂在规定的体外试验条件下的抗菌活性。医生在制定用药方案时,不但要参考MIC结果,还应考虑诸如药物在人体内的药代/药效学参数以及细蒲对抗菌剂的耐药机制等其他因索。对于某种抗.菊剂,根据体外敏感性试验结果(MIC值)可将相应受试荫划分为“敏感(S)”。“中介(1)”和“耐药(R)”。另外,MIC值可用于确定该受试菌株是野生型还是非野生型。尽管解释MIC值的临床意义已超出了
YY/T 0688.1的范晦,但为了适应临床需婴.根据不同抗菌剂细荫组合对方法的基本内容进行调整是必要的。这些调整体现在下列各表格中。为了确保试验结果的叮比性与可靠性,其他药敏试验方法(如常规方法或抗菌剂敏感性试验设备)应该和本参考方法进行比对以确定其准确性.
2术语及定义
下列术语和定义适用于YY/T 0688的本部分。
2.1
抗菌剂antimicrobial agent-类可以抑制或杀死微生物,可能用于抗感染治疗的生物来源的、合成的或半合成的物质的总称。
注:消毒剂、灭菌剂和防腐剂不在此定义范围内。
2.2
抗菌剂属性properties of antimicrobial agents
2.2.1
效价potency受试物中有效抗菌活性成分所占比例，是受试物通过生物学方法所测值与相同质量或体积的参考品通过相同方法测得值的比率。
注:效价的单位有毫克/克(mg/g).国际活性单位/克(IU/g)或百分含量(%,体积分数或质量分數)或受试物的物质的量浓度(mol/L).
2.2.2
浓度concentration抗菌剂在规定体积溶液中的量。
注1;常用毫克/升(mg/L)来表示.
注2:虽然mg/1.= 14g/mL,但不推荐使用1ug/ml.作为单位.
2.3
原液stock solutions用于进一步稀释的初始浓度溶液。
标准图片预览
标准内容
ICS11.100
中华人民共和国医药行业标准
YY/T0688.1-2008
临床实验室检测和体外诊断系统感染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性试验设备的性能评价第1部分：抗菌剂对感染性疾病相关的快速生长需氧菌的体外活性检测的参考方法
Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic test systems-Susceptibility testing of infectious agents and evaluation ofperformance of antimicrobial susceptibility devices-Part 1:Reference method for testing the in vitro activity ofantimicrobial agents against rapidlygrowing aerobic bacteria involved in infectious diseases（1S020776-1:2006,MOD）
2008-10-17发布
国家食品药品监督管理局
2010-01-01实施
术语及定义
试验程序
培养基
抗菌剂
接种菌液的制备
微量稀释盘的接种
微量稀释盘的孵育·
结果的判读
3.8MIC结果可能不能反映抗菌剂真实活性的特殊情况及其处理质量控制
附录A（规范性附录）
对于Mueller-Hinton肉汤的要求参考文献
YY/T0688.1--2008
YY/T0688.1—2008
YY/T0688的本部分修改采用ISO20776-1:2006《临床实验室检测和体外诊断系统感染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性试验设备的性能评价第1部分：抗菌剂对感染性疾病相关的快速生长需氧菌的体外活性检测的参考方法》。本部分与ISO20776-1：2006，差异如下：a）在引言添加“注：已知对某抗菌剂固有耐药的细菌不做敏感性试验”的说明。b）将原文中的\non-sclcctivc nutritivcagarmcdium\译成“非选择性琼脂培养基\（在临床检验实际工作中，非选择性培养基与营养琼脂是两种截然不同的培养基，而试验菌株从储存培养物到工作培养物的所有传代培养用固体培养基均建议使用前者。如此翻译是为了避免与营养琼脂相混淆）。
将“4质量控制.质控菌株的工作培养物可通过储存菌株在非选择性琼脂培养基上再培养c）
获得。”中的“再培养”改为“连续传代培养两次”，“储存菌株”改为“参考菌株的储存培养物”（结合临床检验T作的实际，并严格遵宁CLSI在M7-A6中对菌株储存培养物连续传代培养次数的规定）。
将\质量控制进步的传代培养只能用第一次工作培养物（不能超过一周）进行。.”d)
改为“.质量控制.工作培养物只能再传代一次，且使用时间不能超过一周。...”结合临床检验工作的实际，并严格遵守CLSI在M7-A6中对菌株T作培养物的使用时间及传代培养次数的规定）。
为便于使用，本标准相对于国际标准原文还做了下列编辑性修收：a）将“本国际标准”一词改为“本部分”：b）用小数点“，”代替作为小数点的逗号“，”，c）删除国际标准原文中的前言。本部分的附录A为规范性附录。
本部分由国家食品药品监督管理局提出。本部分由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口I。本部分主要起草单位：北京市医疗器械检验所、南京医科大学附属第一医院。本部分主要起草人：童明庆，王辉。m
YY/T0688.1-2008
抗菌剂体外敏感性试验通常是针对于可能导致疾病的微生物，尤其是那些被认为对频繁使用的抗菌剂呈现耐药性的微生物种属\。除此之外，该试验在细菌耐药性监测及其流行病学研究以及新抗菌剂与现有抗菌剂之间的比较等方面也很重要稀释法常被用来测定抗菌剂的最小抑菌浓度（MICs，minimuminhibitoryconcentrations），是抗菌剂敏感性试验的参考方法。MIC法通常用于细菌耐药性监测、新抗菌剂与现有抗菌剂之间的比较.该法也用于常规方法所得结果不可靠或临床需要定量结果的微生物的敏感性试验。对于稀释法测试，某抗菌剂对于特定微生物的MIC值是通过观察微生物分别在含有系列稀释浓度的该抗菌剂的·系列琼脂平板（琼脂稀释法）上或肉荡（肉汤稀释法）中的可见的生长能力来确定的。抗菌剂的最小抑菌浓度（MIC值）是指在规定的体外条件下，规定的孵育时间内，能抑制某特定微生物出现肉眼可见生长的抗菌剂的最低浓度（以mg/L为单位）。MIC值有助于临床医师了解微生物对抗菌剂的敏感性从而帮助他们制定合理的用药方案。由于所用方法可能显著地影响试验结果，为了确保室内试验结果的可重复性和室间试验结果的可比性，实验室需要进行严格的质量控制及试验程序的标准化。通常情况下，对于给定的抗菌剂和试验菌株，肉汤稀释法的检测结果（MIC值）在MIC实际值土1个倍比稀释度的范围内是可以被接受的。肉汤稀释法：是一种向系列相同体积的含抗菌剂的肉汤培养基其中所含某抗菌剂的浓度通常是以几何级数递增的》中接种已知固定量某微生物以确定该微生物对该抗菌剂的MIC值的方法。肉汤微量稀释法：顾名思义，就是在微量稀释盘中进行肉汤稀释试验。本标准所描述的方法仪适用于需氧菌的纯培养物，这些细菌在Muellcr-Hinton琼脂平板和Mucl-ler-Hinton肉汤（可能需要加人添加剂）中经过夜孵育均易于生长。本标准所描述的肉汤稀释法本质上与法国、德国21、瑞典3]、英国|和美国[5]等许多国家目前所用的方法是一-致的，该法与欧洲抗菌剂敏感性试验委员会（EUCAST）“1所发布的肉汤微量稀释法是同一种方法，所有这些方法都是在Ericsson和Sherris所描述方法的基础上发展而来的。1）已知对某抗菌剂固有耐药的细菌不做敏感性试验。V
1范围
临床实验室检测和体外诊断系统感染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性试验设备的性能评价第1部分：抗菌剂对感染性疾病相关的快速生长需氧菌的体外活性检测的参考方法
YY/T0688.1—2008
YY/T0688的本部分介绍了测定抗菌剂MIC值的一种参考方法---肉汤微量稀释法。MIC值仅反映抗菌剂在规定的体外试验条件下的抗菌活性。医生在制定用药方案时，不但要参考MIC结果，还应考虑诸如药物在人体内的药代/药效学参数以及细菌对抗菌剂的耐药机制等其他因素。对于某种抗菌剂，根据体外敏感性试验结果（MIC值)可将相应受试菌划分为\敏感（S)”、\中介（I)”和“耐药（R）”。另外，MIC值可用于确定该受试菌株是野生型还是非野生型。尽管解释MIC值的临床意义已超出了本部分的范畴，但为了适应临床需要，根据不同抗菌剂-细菌组合对方法的基本内容进行调整是必要的。这些调整体现在下列各表格中。为了确保试验结果的可比性与可靠性，其他药敏试验方法（如常规方法或抗菌剂敏感性试验设备)应该和本参考方法进行比对以确定其准确性。2术语及定义
下列术语和定义适用于YY/T0688的本部分。2.1
抗菌剂antimicrobial agent
类可以抑制或杀死微生物，可能用于抗感染治疗的生物来源的、合成的或半合成的物质的总称。注：消毒剂、灭菌剂和防腐剂不在此定义范围内。2.2
抗菌剂属性properties of antimicrobial agents2.2.1
效价potency
受试物中有效抗菌活性成分所占比例，是受试物通过生物学方法所测值与相同质量或体积的参考品通过相同方法测得值的比率。注：效价的单位有毫克/克（mg/g）、国际活性单位/克（IU/g）或百分含量（%，体积分数或质量分数）或受试物的物质的量浓度（mol/L）)。
concentration
抗菌剂在规定体积溶液中的量。注1：常用毫克/升（mg/L）来表示。注2：虽然mg/l,二μg/mL，但不推荐使用ug/ml.作为单位。2.3
原液stocksolutions
用于进一步稀释的初始浓度溶液。1
YY/T0688.1-—2008
最小抑菌浓度minimum inhibitory concentration MIC在规定的体外试验条件下，在规定的孵育时间内，能抑制细菌出现肉眼可见生长的最低浓度。注：常用mg/L表尔。
折点break pointsBP
用以界定受试细菌对某抗菌剂是敏感、中介或耐药的特定的MIC值。注：关于折点的最新解释，可参考应用本参考方法的机构的最新出版物。2.5.1
敏感susceptibleS
受试菌株的生长可被某浓度抗菌剂抑制预示着该抗菌剂的临床推荐剂量能够获得理想的疗效，注1：菌株是在规定的表型测试系统中基于合理的折点被判定为敏感的。注2：折点应根据测试环境的改变（诸如药物常规剂量的改变、新的耐药机制的出现等）做相应调整。2.5.2
中介intermediate
受试菌株的生长可被某浓度抗菌剂抑制，但无法确定该抗菌剂临床推荐剂量的准确疗效。注1：菌株是在规定的表型测试系统中基于合理的折点被判定为中介的。注2：“中介”意味着由受试菌株导致的感染可通过该抗菌剂在思处的生理高集或使用更高剂慰的该抗菌剂来获得要善的治疗。
注3：该级别还提供了一个“缓冲区”，从而避免了小的、不可控的技术因衰所导致的重大的结果解释偏差。注4：折点应根据测试环境的改变（诸如药物常规剂量的改变。新的耐药机制的出现等）做相应调整。2.5.3
耐药resistanceR
受试菌株的生长可被某浓度抗菌剂抑制预示着该抗菌剂的临床推荐剂量不能获得理想的疗效。注1：菌株是在规定的表型测试系统中基于合理的折点被判定为耐药的。注2：折点应根据测试环境的改变（诸如药物常规剂量的改变、新的耐药机制的出现等）做相应调整。2.6
野生型wildtype
对某抗菌剂没有获得性耐药机制的菌株。2.7
参考菌株referencestrains
有特定分类编号的，且抗菌剂敏感性表型和（或）基因型确定及稳定的菌株。注：参考菌株是从菌种保藏机构茯得并作为质量控制，其通常以储存培养物的形式进行保存，试验所用工作培养物均来源于此。
敏感性试验方法
susceptibility testing methods肉汤稀释法brothdilution
是一种确定某微生物对某抗菌剂的MIC值的方法，即：向-·系列含有某抗菌剂（通常倍比稀释）的适当体积的溶液中接种己知适当量的某微生物的接种菌液。注：该方法的自的是确定MIC值。2.8.2
微量稀释法microdilution
在微量稀释盘中进行的肉汤稀释试验，每孔最终工作液体积不超过200uL2
液体培养基broth
用于细菌体外培养的液体培养基。2.10
接种量inoculum
依据接种后终体积计算出的细菌在最终菌药混合物中的数量。注：接种量通常以每毫升的菌落形成单位(CFU/mL)来表示。2.11
inoculumeffect
接种量效应
由接种量的改变所导致的MIC值的变化。3试验程序
3.1概述
YY/T0688.1-2008
本试验是在微量稀释盘中进行的。该方法首先是抗菌剂工作液的配制，然后或者每孔加抗菌剂工作液50μLC同时再加人50μL接种物），或者每孔T作液为100μL（接种物的接种量最多不超过5μL）。3.2培养基
应使用Muellcr-Hinton肉汤（详见附录A）。3.3抗菌剂
3.3.1概述
受试抗菌剂可直接从制造商或通过可靠的商业来源获得，但不能以临床使用的药物制剂作为受试物。所有抗菌剂均应有批号、效价、失效日期及推荐的保存条件细节，如果制造商没有推荐其他的保存条件，一般受试物均在4℃～8℃条件下，保存于密闭、干燥、避光的容器中。抗菌剂的每个包装单位在整个试验过程中均应有干燥剂。注：为避免受试物凝结成块，在打开装有受试物的容器之前，应将其恢复至室温。3.3.2原液的配制
抗菌剂必须用校准过的分析天平称量。配制抗菌剂标准溶液时，可根据受试物的效价，通过下列公式计算出受试物的质量和稀释溶剂的体积。VxP
式中：
p—-原液的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；m--抗菌剂（干粉）的质量，单位为克（g）；P抗菌剂（干粉）的效价，单位为毫克每克(mg/g）；V-一-稀释剂的体积，单位为升(L)。1)
（2）
虽然某些抗菌剂的溶解度有限，但抗菌剂母液的浓度至少应为1000mg/L。原液的实际配制浓度取决于工作液（系列稀释浓度梯度）的配制方法。除非生产商有特殊的配制稀释要求，所有抗菌剂都应该用无菌蒸馏水溶解并稀释。某些抗菌剂需要用特殊的溶剂来溶解（详见表1）。通常配好的抗菌剂工作液没必要进行消毒。如果必要，抗菌剂工作液可采用膜过滤除菌，但除菌前后的工作液应进行组分分析比较以确保抗菌剂样品在除菌过程中未发生吸附损失，如果抗菌剂溶液没有在指定储存条件下的稳定性信息，所有抗菌剂溶液都应该现用现配。3
YY/T0688.1—-2008
抗菌剂
阿米卡星
(amikacin)
阿莫西林
(amoxicillin)
氨苯西林
(ampieillin)
阿奇磊素
(azithromyein)
阿洛西林
(azlocillin）
氮曲南
(aztreonam)
羧芋青莓素
(carbenicillin)
头孢克洛
(cefaelor)
头孢孟多
(eefamandole)
头孢唑嘛
(cefazolin)
头孢地尼
(cefdinir)
头孢托仑
(cefditaren)
头孢吡肪
(cefepime)
头孢他美
(cefetamet)
头孢克脖
(cefixime)
头孢美唑此内容来自标准下载网
(cefmetazole)
头孢尼西
(cefonicid)
头孢哌酮
(cefoperazone)
头孢噻脖
(cefotaxime)
头孢替坦
(cefotetan)
头孢西丁
(cefoxitin)
头孢泊
(cefpodoxime)
头孢丙烯
(cefprozil)
某些抗菌剂原液的制备所需的溶剂和稀释剂表1
蒸馏水
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液(pH=6.0)0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=8.0）95%乙醇或冰酷酸
蒸馏水
饱和NzHCO,，溶液
燕馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)）0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)0.1mol/[.的磷酸盐缓冲液（pH=7.0)蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
二甲基亚
蒸馏水
质量百分比浓度为0.1%的NaHCO，溶液蒸馏水
稀释剂
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)0.1mol/l.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）水
蒸馏水
(1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH-6.0）燕馏水
燕馏水
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液pH=6.0）蒸馏水
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH7.0）蒸馏水
蒸馏水
抗菌剂
头孢他啶
(ceftazidirne)
头孢布烯
(ceftibuten)
头孢唑
(ceftizoxime)
ceftobiprole
头孢曲松
(ceftriaxone)
头抱呋辛
(cefuroxime)
头孢噻盼
(cephalothin)
飘酶素
(chloramphenicol)
西诺沙星
(cinoxacin)
环丙沙星
(ciprofloxacin)
克拉著素
(clarithromycin)
克拉维酸
(elavulanic acid)
克林沙星
(elinafloxacin)
克林霉素
(elindamycin)
粘杆菌素。
(colistin)
dalbawancin
达托毒素
(daptomycin)
地红莓素
(dirithromycin)
多尼培南
(doripenem)
强力霉素
(doxycycline)
依诺沙星
(enoxacin)
饱和NaHCO.溶液
表1（续）
1/10（体积分数）的二甲基亚砜水溶液蒸馏水
二甲基亚砜+冰醋酸
蒸馏水
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)0.1mol/L.的磷酸盐缓冲液（pH-6.0）95%（体积分数）乙醇
先加人原液总体积的一半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的1mul/L.NaOH溶液直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
甲醇或冰醋酸
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液(pH=6.0)蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
二甲基亚
蒸馏水
冰酷酸”
0.85%（体积分数）的NaCI溶液
蒸馏水
先加人原液总体积的一半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的0.1mol/L.NaOH溶液直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
蒸馏水
YY/T0688.1—2008
稀释剂
蒸馏水，用涡旋振荡器刷烈振荡混匀0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.5）0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）蒸馏水
蒸馏水和二甲基亚矾
蒸馏水
蒸馏水
0.85%（体积分数）的NaCI落液
蒸馏水
YY/T0688.1--2008
抗菌剂
厄他培南
(ertapenem)
(erythromycin)
法罗培南
(faropenern)
氟罗沙星
(fleroxacin)
夫西地酸
(fusidie acid)
加雷沙星
(garenoxacin)
加替沙星
(gatifloxacin)
gemifloxacin
庆大毒素
(gentamicin)
亚胺培南
(imipenem)
卡那莓素
(kanamycin)
左旋氧氟沙星
(lewofloxacin)
利奈唑烷
(linezolid)
氧碳头孢/劳拉头孢
(loracarbef)
美西林
(mecillinam)
美洛培南
(meropenem)
甲氧西林
(methieillin)
美洛西林
(rmezlocillin)
米诺环素
(minocyeline)
拉氧头孢磷酸氢二铵盐
(moxalactam
diammonium salt)
表1（续）
0.01mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=7.2）95%（体积分数）乙醇或冰醋酸”蒸馏水
先加入原液总体积的一半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的0.1mol/LNaOH溶液直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
95%（体积分数）乙醇
蒸馏水（搅拌溶解）
蒸馏水（搅拌溶解）
蒸馏水
蒸馏水
0.01mol/L.的磷酸盐缓冲液（pH==7.2)蒸馏水
先加入原液总体积的半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的1mol/L.NaOH溶液直至样品落解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.01mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=7.2)蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
用0.04mol/1.的HCI溶解后静置1.5h2h
稀释剂
C.01mol/L的磷酸盐缓冲液（pH-7.2)蒸馅水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.01mol/l.的碟段盐缓冲液（pH=7.2)燕馏水
0.01mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=7.2)0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）抗菌剂
莫西沙星
(moxifloxacin)
莫匹罗星
(mupirocin)
夫西林
(nafeillin)
萘啶酸
(nalidixic acid)
奈替米星
(netilmicin)
呋哺婴因
(nitrofurantoin)
诺氟沙星
(norfloxacin)
氧氟沙星
(ofloxacin)
苯唑西林
(oxacillin)
青霉素
(penicillin)
哌拉西林
(piperacillin）
多粘菌素B
(polymyxinB)
quinupristin-dalfopristin
利福平
(rifampicin)
司帕沙星
(sparfloxacin)
舒巴坦
(sulbactam)
磺酰胺
(sulphonamide)
替考拉宁
(teicoplanin)
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
表1（续）
先加人原液总体积的一半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的1mol/LNa()H溶液真至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
先用最少量的甲基甲酰胺溶解，再用0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH-8.0)将原液总体积补齐
先加人原液总体积的半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的1mol/L.NaOH落液直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
先加人原液总体积的一半的蒸馆水，再缓缓加人最小体积量的1mol/LNaOH溶液直至样品落解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）先加人原液总体积的一半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的1mol/I.NaOH液直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
蒸馏水
YY/T0688.1-2008
稀释剂
0.1mal/I.的磷酸盐缓冲液（pH-8.0）蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.1mol/L.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）蒸馏水
YY/T0688.1—2008
抗菌剂
telavancin
泰利番素
(telithrormycin)
四环素
(tetracyeline)
替卡西林
(ticareillin)
替加环素
(tigecyeline)
妥布酶素
(tobramycin)
甲氧芋啶
(irimethoprim)
甲氧啶盐（如乳酸盐）
Ctrimethoprim.if lactate)
内大观霉素
(trospectomycin)
万古酶素
(vancomycin)
甲基亚砜
冰醋酸”
蒸馏水
表1（续）
0.1mol/L.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）蒸馏水
蒸罐水
先加人原液总体积的一半的燕馏水，再缓缓加人最小体积量的0.1mol/L的乳酸或0.1mol/L的盐酸直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
羲馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
C.1mol/L的磷酸盐缓冲藏(pH-6.0）蒸缩水
蒸愉水
注1：关于表1中辫剂及稀释剂的信息主要是经CI.SIC即NCCLS)许可来源于其M100S16文件（抗菌剂敏感性试验执行标准；第16版信息增刊）。由于该部分信息是定期更新的，所以请实验操作者经常查阅可从CI.SI(即NCCLS,940WestValleyRoad,Suite1400,Wayne，PA19087,USA.）获得的最新版本注2：关于所选抗菌剂原液的溶剂及稀释剂的更详细的信息，请参考欧洲药典和美国药典。a如果用冰醋酸作为落剂，具体的溶解步骤为先加人原液总体积的-半的蒸馏水，再逐滴加人冰醋酸直至抗菌剂完全落解，乙酸在原液中的终浓度不应超过2.5mg/1.，冰醋酸即99%（体积分数）的乙酸。b每1.5mgCeitobiprole原液的配制：先加人二甲基亚砜与冰醋酸按体积比10：1混合的混合液110ul.用涡旋振荡器剧烈振荡1min，振荡结束15min后用蒸馏水稀释至总体积1.0ml.。c粘菌素（Colistin)在抗菌剂敏感性试验中的具体形式为粘杆菌素硫酸盐，面不是粘杆菌素的甲基磺酸盐。dDalbavancin起始原液的配制浓度应不超过1600mg/1.，中间的100×原液浓度的储存液应用二甲基亚矾稀释起始原液获得，最终原液为用补加有0.002%（体积分数）的案山梨醇酯-80的阳l离子调整过的MuellerHinIon肉汤（CAMHB》，从而使得最终二甲基亚砜在每孔中的浓度不会超过1%。‘拉氧头孢磷酸氢二铵盐非常稳定，但其中的拉氧头孢儿乎全部以R型异构体存在，而拉氧头孢的临床应用形式为R型与S型异构体的等摩尔混合物，故拉氧头孢磷酸氢二铵盐用0.01mol/l.的HC1充分率解后应静置反应1.5h～2.0h.使其中的R型拉氧头孢转化为R型与S型的等摩尔混合物。3.3.3工作液的配制
试验用抗菌剂工作液浓度范围的选择取决于试验菌株和抗菌剂本身这两方面的因素，所选浓度范围对于相应的参考菌株来说，必须能够确定所有可能得出的终点MIC值。抗菌剂工作液倍比稀释系列通常应用Mucller-Hinton肉汤配制并围绕lmg/L展开。工作液系列不应通过逐步稀释获得。根据表2所述程序，如果抗菌剂溶液没有在指定储存条件下的稳定性信息，所有工作液均应当天配制当天用完。
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。
中华人民共和国医药行业标准
YY/T0688.1-2008
临床实验室检测和体外诊断系统感染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性试验设备的性能评价第1部分：抗菌剂对感染性疾病相关的快速生长需氧菌的体外活性检测的参考方法
Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic test systems-Susceptibility testing of infectious agents and evaluation ofperformance of antimicrobial susceptibility devices-Part 1:Reference method for testing the in vitro activity ofantimicrobial agents against rapidlygrowing aerobic bacteria involved in infectious diseases（1S020776-1:2006,MOD）
2008-10-17发布
国家食品药品监督管理局
2010-01-01实施
术语及定义
试验程序
培养基
抗菌剂
接种菌液的制备
微量稀释盘的接种
微量稀释盘的孵育·
结果的判读
3.8MIC结果可能不能反映抗菌剂真实活性的特殊情况及其处理质量控制
附录A（规范性附录）
对于Mueller-Hinton肉汤的要求参考文献
YY/T0688.1--2008
YY/T0688.1—2008
YY/T0688的本部分修改采用ISO20776-1:2006《临床实验室检测和体外诊断系统感染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性试验设备的性能评价第1部分：抗菌剂对感染性疾病相关的快速生长需氧菌的体外活性检测的参考方法》。本部分与ISO20776-1：2006，差异如下：a）在引言添加“注：已知对某抗菌剂固有耐药的细菌不做敏感性试验”的说明。b）将原文中的\non-sclcctivc nutritivcagarmcdium\译成“非选择性琼脂培养基\（在临床检验实际工作中，非选择性培养基与营养琼脂是两种截然不同的培养基，而试验菌株从储存培养物到工作培养物的所有传代培养用固体培养基均建议使用前者。如此翻译是为了避免与营养琼脂相混淆）。
将“4质量控制.质控菌株的工作培养物可通过储存菌株在非选择性琼脂培养基上再培养c）
获得。”中的“再培养”改为“连续传代培养两次”，“储存菌株”改为“参考菌株的储存培养物”（结合临床检验T作的实际，并严格遵宁CLSI在M7-A6中对菌株储存培养物连续传代培养次数的规定）。
将\质量控制进步的传代培养只能用第一次工作培养物（不能超过一周）进行。.”d)
改为“.质量控制.工作培养物只能再传代一次，且使用时间不能超过一周。...”结合临床检验工作的实际，并严格遵守CLSI在M7-A6中对菌株T作培养物的使用时间及传代培养次数的规定）。
为便于使用，本标准相对于国际标准原文还做了下列编辑性修收：a）将“本国际标准”一词改为“本部分”：b）用小数点“，”代替作为小数点的逗号“，”，c）删除国际标准原文中的前言。本部分的附录A为规范性附录。
本部分由国家食品药品监督管理局提出。本部分由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口I。本部分主要起草单位：北京市医疗器械检验所、南京医科大学附属第一医院。本部分主要起草人：童明庆，王辉。m
YY/T0688.1-2008
抗菌剂体外敏感性试验通常是针对于可能导致疾病的微生物，尤其是那些被认为对频繁使用的抗菌剂呈现耐药性的微生物种属\。除此之外，该试验在细菌耐药性监测及其流行病学研究以及新抗菌剂与现有抗菌剂之间的比较等方面也很重要稀释法常被用来测定抗菌剂的最小抑菌浓度（MICs，minimuminhibitoryconcentrations），是抗菌剂敏感性试验的参考方法。MIC法通常用于细菌耐药性监测、新抗菌剂与现有抗菌剂之间的比较.该法也用于常规方法所得结果不可靠或临床需要定量结果的微生物的敏感性试验。对于稀释法测试，某抗菌剂对于特定微生物的MIC值是通过观察微生物分别在含有系列稀释浓度的该抗菌剂的·系列琼脂平板（琼脂稀释法）上或肉荡（肉汤稀释法）中的可见的生长能力来确定的。抗菌剂的最小抑菌浓度（MIC值）是指在规定的体外条件下，规定的孵育时间内，能抑制某特定微生物出现肉眼可见生长的抗菌剂的最低浓度（以mg/L为单位）。MIC值有助于临床医师了解微生物对抗菌剂的敏感性从而帮助他们制定合理的用药方案。由于所用方法可能显著地影响试验结果，为了确保室内试验结果的可重复性和室间试验结果的可比性，实验室需要进行严格的质量控制及试验程序的标准化。通常情况下，对于给定的抗菌剂和试验菌株，肉汤稀释法的检测结果（MIC值）在MIC实际值土1个倍比稀释度的范围内是可以被接受的。肉汤稀释法：是一种向系列相同体积的含抗菌剂的肉汤培养基其中所含某抗菌剂的浓度通常是以几何级数递增的》中接种已知固定量某微生物以确定该微生物对该抗菌剂的MIC值的方法。肉汤微量稀释法：顾名思义，就是在微量稀释盘中进行肉汤稀释试验。本标准所描述的方法仪适用于需氧菌的纯培养物，这些细菌在Muellcr-Hinton琼脂平板和Mucl-ler-Hinton肉汤（可能需要加人添加剂）中经过夜孵育均易于生长。本标准所描述的肉汤稀释法本质上与法国、德国21、瑞典3]、英国|和美国[5]等许多国家目前所用的方法是一-致的，该法与欧洲抗菌剂敏感性试验委员会（EUCAST）“1所发布的肉汤微量稀释法是同一种方法，所有这些方法都是在Ericsson和Sherris所描述方法的基础上发展而来的。1）已知对某抗菌剂固有耐药的细菌不做敏感性试验。V
1范围
临床实验室检测和体外诊断系统感染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性试验设备的性能评价第1部分：抗菌剂对感染性疾病相关的快速生长需氧菌的体外活性检测的参考方法
YY/T0688.1—2008
YY/T0688的本部分介绍了测定抗菌剂MIC值的一种参考方法---肉汤微量稀释法。MIC值仅反映抗菌剂在规定的体外试验条件下的抗菌活性。医生在制定用药方案时，不但要参考MIC结果，还应考虑诸如药物在人体内的药代/药效学参数以及细菌对抗菌剂的耐药机制等其他因素。对于某种抗菌剂，根据体外敏感性试验结果（MIC值)可将相应受试菌划分为\敏感（S)”、\中介（I)”和“耐药（R）”。另外，MIC值可用于确定该受试菌株是野生型还是非野生型。尽管解释MIC值的临床意义已超出了本部分的范畴，但为了适应临床需要，根据不同抗菌剂-细菌组合对方法的基本内容进行调整是必要的。这些调整体现在下列各表格中。为了确保试验结果的可比性与可靠性，其他药敏试验方法（如常规方法或抗菌剂敏感性试验设备)应该和本参考方法进行比对以确定其准确性。2术语及定义
下列术语和定义适用于YY/T0688的本部分。2.1
抗菌剂antimicrobial agent
类可以抑制或杀死微生物，可能用于抗感染治疗的生物来源的、合成的或半合成的物质的总称。注：消毒剂、灭菌剂和防腐剂不在此定义范围内。2.2
抗菌剂属性properties of antimicrobial agents2.2.1
效价potency
受试物中有效抗菌活性成分所占比例，是受试物通过生物学方法所测值与相同质量或体积的参考品通过相同方法测得值的比率。注：效价的单位有毫克/克（mg/g）、国际活性单位/克（IU/g）或百分含量（%，体积分数或质量分数）或受试物的物质的量浓度（mol/L）)。
concentration
抗菌剂在规定体积溶液中的量。注1：常用毫克/升（mg/L）来表示。注2：虽然mg/l,二μg/mL，但不推荐使用ug/ml.作为单位。2.3
原液stocksolutions
用于进一步稀释的初始浓度溶液。1
YY/T0688.1-—2008
最小抑菌浓度minimum inhibitory concentration MIC在规定的体外试验条件下，在规定的孵育时间内，能抑制细菌出现肉眼可见生长的最低浓度。注：常用mg/L表尔。
折点break pointsBP
用以界定受试细菌对某抗菌剂是敏感、中介或耐药的特定的MIC值。注：关于折点的最新解释，可参考应用本参考方法的机构的最新出版物。2.5.1
敏感susceptibleS
受试菌株的生长可被某浓度抗菌剂抑制预示着该抗菌剂的临床推荐剂量能够获得理想的疗效，注1：菌株是在规定的表型测试系统中基于合理的折点被判定为敏感的。注2：折点应根据测试环境的改变（诸如药物常规剂量的改变、新的耐药机制的出现等）做相应调整。2.5.2
中介intermediate
受试菌株的生长可被某浓度抗菌剂抑制，但无法确定该抗菌剂临床推荐剂量的准确疗效。注1：菌株是在规定的表型测试系统中基于合理的折点被判定为中介的。注2：“中介”意味着由受试菌株导致的感染可通过该抗菌剂在思处的生理高集或使用更高剂慰的该抗菌剂来获得要善的治疗。
注3：该级别还提供了一个“缓冲区”，从而避免了小的、不可控的技术因衰所导致的重大的结果解释偏差。注4：折点应根据测试环境的改变（诸如药物常规剂量的改变。新的耐药机制的出现等）做相应调整。2.5.3
耐药resistanceR
受试菌株的生长可被某浓度抗菌剂抑制预示着该抗菌剂的临床推荐剂量不能获得理想的疗效。注1：菌株是在规定的表型测试系统中基于合理的折点被判定为耐药的。注2：折点应根据测试环境的改变（诸如药物常规剂量的改变、新的耐药机制的出现等）做相应调整。2.6
野生型wildtype
对某抗菌剂没有获得性耐药机制的菌株。2.7
参考菌株referencestrains
有特定分类编号的，且抗菌剂敏感性表型和（或）基因型确定及稳定的菌株。注：参考菌株是从菌种保藏机构茯得并作为质量控制，其通常以储存培养物的形式进行保存，试验所用工作培养物均来源于此。
敏感性试验方法
susceptibility testing methods肉汤稀释法brothdilution
是一种确定某微生物对某抗菌剂的MIC值的方法，即：向-·系列含有某抗菌剂（通常倍比稀释）的适当体积的溶液中接种己知适当量的某微生物的接种菌液。注：该方法的自的是确定MIC值。2.8.2
微量稀释法microdilution
在微量稀释盘中进行的肉汤稀释试验，每孔最终工作液体积不超过200uL2
液体培养基broth
用于细菌体外培养的液体培养基。2.10
接种量inoculum
依据接种后终体积计算出的细菌在最终菌药混合物中的数量。注：接种量通常以每毫升的菌落形成单位(CFU/mL)来表示。2.11
inoculumeffect
接种量效应
由接种量的改变所导致的MIC值的变化。3试验程序
3.1概述
YY/T0688.1-2008
本试验是在微量稀释盘中进行的。该方法首先是抗菌剂工作液的配制，然后或者每孔加抗菌剂工作液50μLC同时再加人50μL接种物），或者每孔T作液为100μL（接种物的接种量最多不超过5μL）。3.2培养基
应使用Muellcr-Hinton肉汤（详见附录A）。3.3抗菌剂
3.3.1概述
受试抗菌剂可直接从制造商或通过可靠的商业来源获得，但不能以临床使用的药物制剂作为受试物。所有抗菌剂均应有批号、效价、失效日期及推荐的保存条件细节，如果制造商没有推荐其他的保存条件，一般受试物均在4℃～8℃条件下，保存于密闭、干燥、避光的容器中。抗菌剂的每个包装单位在整个试验过程中均应有干燥剂。注：为避免受试物凝结成块，在打开装有受试物的容器之前，应将其恢复至室温。3.3.2原液的配制
抗菌剂必须用校准过的分析天平称量。配制抗菌剂标准溶液时，可根据受试物的效价，通过下列公式计算出受试物的质量和稀释溶剂的体积。VxP
式中：
p—-原液的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；m--抗菌剂（干粉）的质量，单位为克（g）；P抗菌剂（干粉）的效价，单位为毫克每克(mg/g）；V-一-稀释剂的体积，单位为升(L)。1)
（2）
虽然某些抗菌剂的溶解度有限，但抗菌剂母液的浓度至少应为1000mg/L。原液的实际配制浓度取决于工作液（系列稀释浓度梯度）的配制方法。除非生产商有特殊的配制稀释要求，所有抗菌剂都应该用无菌蒸馏水溶解并稀释。某些抗菌剂需要用特殊的溶剂来溶解（详见表1）。通常配好的抗菌剂工作液没必要进行消毒。如果必要，抗菌剂工作液可采用膜过滤除菌，但除菌前后的工作液应进行组分分析比较以确保抗菌剂样品在除菌过程中未发生吸附损失，如果抗菌剂溶液没有在指定储存条件下的稳定性信息，所有抗菌剂溶液都应该现用现配。3
YY/T0688.1—-2008
抗菌剂
阿米卡星
(amikacin)
阿莫西林
(amoxicillin)
氨苯西林
(ampieillin)
阿奇磊素
(azithromyein)
阿洛西林
(azlocillin）
氮曲南
(aztreonam)
羧芋青莓素
(carbenicillin)
头孢克洛
(cefaelor)
头孢孟多
(eefamandole)
头孢唑嘛
(cefazolin)
头孢地尼
(cefdinir)
头孢托仑
(cefditaren)
头孢吡肪
(cefepime)
头孢他美
(cefetamet)
头孢克脖
(cefixime)
头孢美唑此内容来自标准下载网
(cefmetazole)
头孢尼西
(cefonicid)
头孢哌酮
(cefoperazone)
头孢噻脖
(cefotaxime)
头孢替坦
(cefotetan)
头孢西丁
(cefoxitin)
头孢泊
(cefpodoxime)
头孢丙烯
(cefprozil)
某些抗菌剂原液的制备所需的溶剂和稀释剂表1
蒸馏水
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液(pH=6.0)0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=8.0）95%乙醇或冰酷酸
蒸馏水
饱和NzHCO,，溶液
燕馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)）0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)0.1mol/[.的磷酸盐缓冲液（pH=7.0)蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
二甲基亚
蒸馏水
质量百分比浓度为0.1%的NaHCO，溶液蒸馏水
稀释剂
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)0.1mol/l.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）水
蒸馏水
(1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH-6.0）燕馏水
燕馏水
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液pH=6.0）蒸馏水
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH7.0）蒸馏水
蒸馏水
抗菌剂
头孢他啶
(ceftazidirne)
头孢布烯
(ceftibuten)
头孢唑
(ceftizoxime)
ceftobiprole
头孢曲松
(ceftriaxone)
头抱呋辛
(cefuroxime)
头孢噻盼
(cephalothin)
飘酶素
(chloramphenicol)
西诺沙星
(cinoxacin)
环丙沙星
(ciprofloxacin)
克拉著素
(clarithromycin)
克拉维酸
(elavulanic acid)
克林沙星
(elinafloxacin)
克林霉素
(elindamycin)
粘杆菌素。
(colistin)
dalbawancin
达托毒素
(daptomycin)
地红莓素
(dirithromycin)
多尼培南
(doripenem)
强力霉素
(doxycycline)
依诺沙星
(enoxacin)
饱和NaHCO.溶液
表1（续）
1/10（体积分数）的二甲基亚砜水溶液蒸馏水
二甲基亚砜+冰醋酸
蒸馏水
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0)0.1mol/L.的磷酸盐缓冲液（pH-6.0）95%（体积分数）乙醇
先加人原液总体积的一半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的1mul/L.NaOH溶液直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
甲醇或冰醋酸
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液(pH=6.0)蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
二甲基亚
蒸馏水
冰酷酸”
0.85%（体积分数）的NaCI溶液
蒸馏水
先加人原液总体积的一半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的0.1mol/L.NaOH溶液直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
蒸馏水
YY/T0688.1—2008
稀释剂
蒸馏水，用涡旋振荡器刷烈振荡混匀0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.5）0.1mol/1.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）蒸馏水
蒸馏水和二甲基亚矾
蒸馏水
蒸馏水
0.85%（体积分数）的NaCI落液
蒸馏水
YY/T0688.1--2008
抗菌剂
厄他培南
(ertapenem)
(erythromycin)
法罗培南
(faropenern)
氟罗沙星
(fleroxacin)
夫西地酸
(fusidie acid)
加雷沙星
(garenoxacin)
加替沙星
(gatifloxacin)
gemifloxacin
庆大毒素
(gentamicin)
亚胺培南
(imipenem)
卡那莓素
(kanamycin)
左旋氧氟沙星
(lewofloxacin)
利奈唑烷
(linezolid)
氧碳头孢/劳拉头孢
(loracarbef)
美西林
(mecillinam)
美洛培南
(meropenem)
甲氧西林
(methieillin)
美洛西林
(rmezlocillin)
米诺环素
(minocyeline)
拉氧头孢磷酸氢二铵盐
(moxalactam
diammonium salt)
表1（续）
0.01mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=7.2）95%（体积分数）乙醇或冰醋酸”蒸馏水
先加入原液总体积的一半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的0.1mol/LNaOH溶液直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
95%（体积分数）乙醇
蒸馏水（搅拌溶解）
蒸馏水（搅拌溶解）
蒸馏水
蒸馏水
0.01mol/L.的磷酸盐缓冲液（pH==7.2)蒸馏水
先加入原液总体积的半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的1mol/L.NaOH溶液直至样品落解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.01mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=7.2)蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
用0.04mol/1.的HCI溶解后静置1.5h2h
稀释剂
C.01mol/L的磷酸盐缓冲液（pH-7.2)蒸馅水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.01mol/l.的碟段盐缓冲液（pH=7.2)燕馏水
0.01mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=7.2)0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）抗菌剂
莫西沙星
(moxifloxacin)
莫匹罗星
(mupirocin)
夫西林
(nafeillin)
萘啶酸
(nalidixic acid)
奈替米星
(netilmicin)
呋哺婴因
(nitrofurantoin)
诺氟沙星
(norfloxacin)
氧氟沙星
(ofloxacin)
苯唑西林
(oxacillin)
青霉素
(penicillin)
哌拉西林
(piperacillin）
多粘菌素B
(polymyxinB)
quinupristin-dalfopristin
利福平
(rifampicin)
司帕沙星
(sparfloxacin)
舒巴坦
(sulbactam)
磺酰胺
(sulphonamide)
替考拉宁
(teicoplanin)
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
表1（续）
先加人原液总体积的一半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的1mol/LNa()H溶液真至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
先用最少量的甲基甲酰胺溶解，再用0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH-8.0)将原液总体积补齐
先加人原液总体积的半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的1mol/L.NaOH落液直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
先加人原液总体积的一半的蒸馆水，再缓缓加人最小体积量的1mol/LNaOH溶液直至样品落解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）先加人原液总体积的一半的蒸馏水，再缓缓加人最小体积量的1mol/I.NaOH液直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
蒸馏水
YY/T0688.1-2008
稀释剂
0.1mal/I.的磷酸盐缓冲液（pH-8.0）蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
0.1mol/L.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）蒸馏水
YY/T0688.1—2008
抗菌剂
telavancin
泰利番素
(telithrormycin)
四环素
(tetracyeline)
替卡西林
(ticareillin)
替加环素
(tigecyeline)
妥布酶素
(tobramycin)
甲氧芋啶
(irimethoprim)
甲氧啶盐（如乳酸盐）
Ctrimethoprim.if lactate)
内大观霉素
(trospectomycin)
万古酶素
(vancomycin)
甲基亚砜
冰醋酸”
蒸馏水
表1（续）
0.1mol/L.的磷酸盐缓冲液（pH=6.0）蒸馏水
蒸罐水
先加人原液总体积的一半的燕馏水，再缓缓加人最小体积量的0.1mol/L的乳酸或0.1mol/L的盐酸直至样品溶解，最后用蒸馏水将原液总体积补齐
蒸馏水
羲馏水
蒸馏水
蒸馏水
蒸馏水
C.1mol/L的磷酸盐缓冲藏(pH-6.0）蒸缩水
蒸愉水
注1：关于表1中辫剂及稀释剂的信息主要是经CI.SIC即NCCLS)许可来源于其M100S16文件（抗菌剂敏感性试验执行标准；第16版信息增刊）。由于该部分信息是定期更新的，所以请实验操作者经常查阅可从CI.SI(即NCCLS,940WestValleyRoad,Suite1400,Wayne，PA19087,USA.）获得的最新版本注2：关于所选抗菌剂原液的溶剂及稀释剂的更详细的信息，请参考欧洲药典和美国药典。a如果用冰醋酸作为落剂，具体的溶解步骤为先加人原液总体积的-半的蒸馏水，再逐滴加人冰醋酸直至抗菌剂完全落解，乙酸在原液中的终浓度不应超过2.5mg/1.，冰醋酸即99%（体积分数）的乙酸。b每1.5mgCeitobiprole原液的配制：先加人二甲基亚砜与冰醋酸按体积比10：1混合的混合液110ul.用涡旋振荡器剧烈振荡1min，振荡结束15min后用蒸馏水稀释至总体积1.0ml.。c粘菌素（Colistin)在抗菌剂敏感性试验中的具体形式为粘杆菌素硫酸盐，面不是粘杆菌素的甲基磺酸盐。dDalbavancin起始原液的配制浓度应不超过1600mg/1.，中间的100×原液浓度的储存液应用二甲基亚矾稀释起始原液获得，最终原液为用补加有0.002%（体积分数）的案山梨醇酯-80的阳l离子调整过的MuellerHinIon肉汤（CAMHB》，从而使得最终二甲基亚砜在每孔中的浓度不会超过1%。‘拉氧头孢磷酸氢二铵盐非常稳定，但其中的拉氧头孢儿乎全部以R型异构体存在，而拉氧头孢的临床应用形式为R型与S型异构体的等摩尔混合物，故拉氧头孢磷酸氢二铵盐用0.01mol/l.的HC1充分率解后应静置反应1.5h～2.0h.使其中的R型拉氧头孢转化为R型与S型的等摩尔混合物。3.3.3工作液的配制
试验用抗菌剂工作液浓度范围的选择取决于试验菌株和抗菌剂本身这两方面的因素，所选浓度范围对于相应的参考菌株来说，必须能够确定所有可能得出的终点MIC值。抗菌剂工作液倍比稀释系列通常应用Mucller-Hinton肉汤配制并围绕lmg/L展开。工作液系列不应通过逐步稀释获得。根据表2所述程序，如果抗菌剂溶液没有在指定储存条件下的稳定性信息，所有工作液均应当天配制当天用完。
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。