YY/T 0456. 3-2003
基本信息
标准号： YY/T 0456. 3-2003
中文名称：血细胞分析仪应用试剂. 第3部分:稀释液
标准类别：医药行业标准(YY)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
YY/T 0456. 3-2003.
4.8.1原装稀释液:白细胞(WBC)计數的相对偏差应不超过土10%，红细胞(RBC)计数的相对偏差应不超过士5%,血红蛋白(HGB)含且的相对偏差应不超过士5%,血小板(PLT)计数的相对偏差应不超过士15% ,平均红细胞体积(MCV)的相对偏差应不超过士5%。
4.8.2替代稀释液:白细胞(WBC)计数.红细胞(RBC)计数、血红蛋白(HGB)含量、血小板(PLT)计数、平均红细胞体积(MCV)均应落在由原装试剂所得结果的X土2SD范围之内。
4.9 菌落数
微生物数量<50 CFU/m1.
4.10批间差
pH值批间差应≤0.20+电导率批间差应≤0.50 mS/cm; 渗透浓度批间差应≤10 m mol/L (10 mOsm/kg).
4.11稳定性
稀释液应规定有效期,取到期后三个月内的留样检测4.1.4. 4~4.9,结果应符合各项目规定的要求。
5试验方法
5.1外观检查
稀释液摇匀后取出适量放人比色管中.对光日视检查,应符合4.1的要求。
5.2外 部标志检查
目视检查产品包装外部标志,应符合4.2的要求。
5.3 净含测定
用适用的通用量具量取或称净重后根据其密度计算出体积,结果应符合4.3的要求。
5.4 pH 测定
取适量稀释液,按(GB/T 9724-1988规定方法测定其pH值。连续测定三次,其平均值应符合4.4的要求。
5.5电导率测定
按仪器说明书对电导率仪进行调试和校准，再按电导率仪的操作说明书规定的步骤和方法测定稀释液在25%:士1心:时的电导率值。连续测定三次,其平均值应符合4.5的要求。
5.6 渗透浓度测定
用校准后的冰点渗透浓度仪按仪器操作说明书规定的步骤和方法测定稀释液的渗透依度俏。连续测定三次,其平均值应符合4. 6的要求。
5.7 空白值测定
使用全白动或半自动血细胞分析仪时,先将分析仪内部原有试剂排空,引人待测稀释液,进行空白测定。连续测定二次,各指标所得结果的最大值应符合4.7的要求。
5.8准确性测定
5.8.1原装稀释液;按照血细胞分析仪操作说明书的规定,以定值血作为标本在分析仪上用待测稀释液进行测定,连续测定三次,测定结果取平均值。平均俏与定值血标示值的相对偏差应符合4.8.1的
4.8.1原装稀释液:白细胞(WBC)计數的相对偏差应不超过土10%，红细胞(RBC)计数的相对偏差应不超过士5%,血红蛋白(HGB)含且的相对偏差应不超过士5%,血小板(PLT)计数的相对偏差应不超过士15% ,平均红细胞体积(MCV)的相对偏差应不超过士5%。
4.8.2替代稀释液:白细胞(WBC)计数.红细胞(RBC)计数、血红蛋白(HGB)含量、血小板(PLT)计数、平均红细胞体积(MCV)均应落在由原装试剂所得结果的X土2SD范围之内。
4.9 菌落数
微生物数量<50 CFU/m1.
4.10批间差
pH值批间差应≤0.20+电导率批间差应≤0.50 mS/cm; 渗透浓度批间差应≤10 m mol/L (10 mOsm/kg).
4.11稳定性
稀释液应规定有效期,取到期后三个月内的留样检测4.1.4. 4~4.9,结果应符合各项目规定的要求。
5试验方法
5.1外观检查
稀释液摇匀后取出适量放人比色管中.对光日视检查,应符合4.1的要求。
5.2外 部标志检查
目视检查产品包装外部标志,应符合4.2的要求。
5.3 净含测定
用适用的通用量具量取或称净重后根据其密度计算出体积,结果应符合4.3的要求。
5.4 pH 测定
取适量稀释液,按(GB/T 9724-1988规定方法测定其pH值。连续测定三次,其平均值应符合4.4的要求。
5.5电导率测定
按仪器说明书对电导率仪进行调试和校准，再按电导率仪的操作说明书规定的步骤和方法测定稀释液在25%:士1心:时的电导率值。连续测定三次,其平均值应符合4.5的要求。
5.6 渗透浓度测定
用校准后的冰点渗透浓度仪按仪器操作说明书规定的步骤和方法测定稀释液的渗透依度俏。连续测定三次,其平均值应符合4. 6的要求。
5.7 空白值测定
使用全白动或半自动血细胞分析仪时,先将分析仪内部原有试剂排空,引人待测稀释液,进行空白测定。连续测定二次,各指标所得结果的最大值应符合4.7的要求。
5.8准确性测定
5.8.1原装稀释液;按照血细胞分析仪操作说明书的规定,以定值血作为标本在分析仪上用待测稀释液进行测定,连续测定三次,测定结果取平均值。平均俏与定值血标示值的相对偏差应符合4.8.1的
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标准内容
YY/T0467血细胞分析仪赢用试剂分为3部分：第1部分：清洗液
第2部分：溶血剂；
第3部分：稀群腋。
本部分为YY/T 04G7的第3部分：稀释液。YY/T0456.3—2003
本部分适用于血细脑分析仪专用稀释被，该产品足一种具有酸碱缓冲作用、恰当的离子强度和电导率的电解质平衡税，作为人体血细胞计数、体积测量以及白细胞分类计数时的帮释液使用。作为指定血细跑分析仪的专用试剂，该产品使用方法应符合指定而细胞分析仪说明书所规定的方法。本部分的除录A为规范性附录，
部分由国家食品药品监督管理局提出。本部分出全国医用临床捡验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会归口。本部分起草单位：国家食品药品监督管理局北京医疗器械质晟监替检验中心、江西特康科技有限公司。
本郝分主要起卢人：刘晓军、周洪华、章兆园、颜策、张宏。1范围
YY/T 0456.32003
血细胞分析仪应用试剂第3部分：稀释液本部分规定了恤组孢分析假用稀释液的分类与命名、要求、试验方法，检验规则、标志、包浸，运输和存，
本部分适用于电阻抗法而细胞分析议用稀释液，?规范性引用文件
下列文件中多款通过Y/467的本部分的叫用而构成为本部分的条款。凡是注！！期的引用文件.共随后所有的您改单不括勘误的内或够订版不用于空部介，然而，最励根不部分达或协设的冬方讲究是吾可使这些文供的長新版本：以是不注巨期的引用文件，其最新版添适用于术部分，
GB/T1912330包装储运多示标志
GB/T9721J988化学试剂pH值测定通则3分类与命名
3.1稀释液命名
区X区释液
3.2分类
产品型号
稀释液XXX
产型号
在制造商的注血产品标准中应明确说明端整液适用的血细胞分析设具体型号。4要求
4.1外观
降液应为无色透明液体，不得布沉淀、颗粒或察状物，4.2外部标志
稀拜液产晶外部松志应符合7.1的求。4.3净含量
稀释液净含量成符合表1规定，
表 1净含量要求
1 L*V20 L
最大充许负编差
稀释泌在(2:%:±1r)的nH值应不超过标称值的士0.20。标称值减根据适用血细脑分析仪的设计要求生制造商的注册产品标雅！明确规定。4.5 电导率
稀释液在(25℃士1:)的电导率(p)值成不超过标称值的二0.50 mS/cm。标称值应根据适用血细胞分析仪的设计要求在制造商的注册产品标准中明确规定，YY/T 0456. 3—2003
4.6漆遥浓度
稀释液的渗透依皮值应不超过标称的士10mmal/l(士10m()sm/kg)：标称值成根据适用宜细胞分析仪的设计要求在制造商的注册产品标准中明确规定4.7空白值
使用血细胍分析议测定时·测量结果白纠胞计数(WBC0,3×103/1.,红纸胞计数(RBC)≥0. 0X10/I血小板计数(PLT)10×10/L红蛋白含量(HGB)=?/T4.8准确性
4.8.1原装稀释液：白细胞（WH》计数的相对偏差应不超过=13红细胞（RBC)计数的相对偏差应不超过二外,血红蛋H(HGR)含里的机对偏差应不超过土%.血小板(P[)计数的相偏差成不翅过士15%平均红细体积(MCV)的相对偏差应不超过：5%。4.8,2替代稀释液：白细胞(WBC)教红细胞(RH()计数、血红蛋口(H:H)含量、血小板(P1)计数、平均红细胞体和(MCV)均成游在由原装试剂所得结果的文「2S门范围之内，4.9茜落数
微生物数甲.5F/ml.n
4.10批间差
H值批间片应0.2C电导率批间差应050mS/cm:渗透浓度批间差应1mmT(10 m0s./kg).
4. 11 稳定性
梯释液应规定有效期,取到期后三个月内约率样检测4.1,4.4~4. 9,结果应符合弃项日规定的要求。
5试验方法
5.1外观检查
筛释液摇匀后,取出适量放人比色管中,对光几现检查·应符合4.1的要求。5.2外部标志检查
日视检查产品包装外部标志.应符合4.2的要求.5.3净含量测定
川近用的通州量具量取或称净重后根据其密度计管出体积,结果应符合4.3闪要求5.4pH测定
收适量稀释液,按(/T 9721—1988规定片法测定其 2II值。在续定二欲,H平均值应符合4. 4的要求，
5.5电导率测定
按仪器说明书对导率仪进行调试和较准，再变电导率仪的操作说明书规定的步媒和方法测定稀释在25%士1°时的电导率值。连续测定三次,其平均值应符含.5的要求。5.6满透浓度测定
用校证后的冰点渗透浓度仪按议器操作说明书规定的步频和方点测定稀释液的密透浓度值，连续测定三次，其平购值成符合6的要求，5.7空白值测定
使用全白动或平口动血纲胞分析仪时，先将分析假内部原有试剂押空·引人待谢稀释液，进于空白测定，连续测定一次，各指标所得结来的最大值成合4.7的要求。5.8准确性测定
5.8.1源装稀释液，按照血细胞分析仪操作说明节的规定，以定值血作为标本在分折仪上用待轿释液进行测定,连续测定一改,测定结果取平均值。平均值与定值血标示值的相对偏差应符合 4,8.1 的要求。
YY/T 0456.3—2003
5.8.2替代释液：按照而细胞分析仪操作说明书的规定、在适用的血细胞分析仪1测定同一份正常成人新鲜EDTA·K，抗凝血，以原装进口稀释液10次重复测量的结果计算均值和标谁差，得到血样各参数测量结果的又土2SD范国，再由哲代进口的稀释液对血样测定3次，计算乎均值，销果应符台4.8.2的要求，
5.9菌落数测定
按附录A规定的厅法进行定，结果应符合4.9的要求。5,10批间差两定
取连续三批稀释液各一份，按5.3～5.5规定的方法分别谢定pH、心导率和渗透浓度各指标的最大测量值与最小测量值之益应符骨4.！的要求，5. 11 定性测定
稀液生产过程中每批应原包装留样，取到期后三个月内的留样接5.1～5.9的要求逆行测定，所得结果应符合4. 11的要求。
6检验规则
6.1原则
稀释液应由生产厂的技术检验部门选行检验，合格后方川提交验收，6.2检验
分为出厂检验和型式检验。
6.3出厂检验
6.3.1抽样
一个生产批为一个检验批，从每批中提取生产过程中的第一箱和最后一箱在内的至少三个成品。6, 3.2检验项目
按1.1~4.7的要求逐项检验。
6.3,3判定
有项不合格，即判定该批小合格，6.4型式检验
6.4. 1总测
在下列情况下，应进行型式检验：）新产品授产前（包括老产品转厂生产)：b）正式生产后.如生产工艺有较大改变.可能影响产品性能时，e）停产超过六个月·恢复产时1d）原料改变时，
）连续生产时，每十二个月不少于一次，f）国家监督管理部门进行质量抽时。6.4.2抽样
从出厂检验台格的产品中，随机抽取二个不同的批，每一批号随机抽取一箱。尽家监督管理部门进行质量轴位时·应抽取一批到期后一到二个月内的产品。6.4.3检验项目
按 1,1～1.11各项的要求运检验，6.4.4判定
有一顶不合格，即州定该批不合格。YY/T 0456.3—2003
7标志,标签
稀释没产品外包装上的标志应至少包括以下内奔：a产品名称型号
主要成分净含量；
产品用途,适用仪游;
产部江册号：
执行的产品标准号；
洋意事项：
生产批号.有效期：
制造商名称地址：
产品他装.储语图示标志应符含GH/T19120心C的相应要求。bzxz.net
稀释额产品外包装箱内成附有合格证，合格证应至少他括以下内容：7.2
产品名称利型考：
批号：
检验就代号：
“台格“字样。
包装、运输、贴存
释液州采用适宵的包装穿器，并加盖案均。品他装应能满足个同规定的要求，保证产品包装在长途选输小不受损坏，试剂不泄漏。8.2
产品作符合规定的条件下贮存。.3
A.1培养基的制备
A.1.1 原料
每上 0 m.培养基应收：
牛肉膏：3g：
蛋口陈：108
氯化钠:5 B:
原胎：15g~20g：
水:1 00c mL
A.1.2制备
附录A
（规范性附录）
菌落数测定方法
YY/T 0456, 3—2003
A.1.2.1将称鼠的原料用水溶解在锥形瓶内,用2-~3层纱布过滤,补足所失水分：A. 1. 2. 2 用 1 mo1/I. 的氨氧化钠或盐酸溶被将培养基 pH 值调节到 7. 0 ~-7. 2 之问-然后用寒塞瓶,外包牛皮纸封[1。茗不能及时灭菌,应放冰箱2℃--8保存。A.2灭菌
将取祥件用橡皮塞塞，之后将所有取样等外包一层牛皮纸，用细绳扎成一拥。将培差血、吸答等其他所需物品分别用牛皮纸包好。然后与制备好的培养基一起在 121℃灭菌 20 min。A.3取样
带好酒精灯.取样烊等物品。点燃酒精灯.打开稀释液桶盖，将酒精灯火焰靠近，从释液桶中倒出5m~10m稀饿到取样管中，并将取样管管口及橡皮暴用火焰旋转式烤1s~25最后塞紧抖口。A,4接种
A.4. 1接种前先用.05%~-0.1%的新消尔灭浸泡双于,之后将培养血、培养苯、择品、吸管等放人净台,并将每个培养血做上相碰的标记,每个样品需做阅个归行对照且。归做个空自对照。A.4.2加样：用吸管吸取1mL样品，注人到相成培差Ⅱ中，空口对照不样品。A. 4. 3加人普通琼脂培养基:将 15 mL,~29 ml.的普通琼脂培养基(45℃左右)归人到培养训l中,以刚好盖血底为宜。死加空自对照亚,其他样品加好之后立即盖上Ⅲ差,轻轻摇动培养肌，使船品琼脂混匀。
A.4.年待所有的普道琼脂培养基冷却凝固府·重新用牛皮纸包好培养肌·并在纸外写明接种11邸·倒置=35℃～37℃的恒温培养箱内培养。A.5结果记录
每厢24上观察一次，记录H在24h、48h而生长的菌落数及岚落的人小,形态、题色等.单最终记录48h后的菌落数。
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第2部分：溶血剂；
第3部分：稀群腋。
本部分为YY/T 04G7的第3部分：稀释液。YY/T0456.3—2003
本部分适用于血细脑分析仪专用稀释被，该产品足一种具有酸碱缓冲作用、恰当的离子强度和电导率的电解质平衡税，作为人体血细胞计数、体积测量以及白细胞分类计数时的帮释液使用。作为指定血细跑分析仪的专用试剂，该产品使用方法应符合指定而细胞分析仪说明书所规定的方法。本部分的除录A为规范性附录，
部分由国家食品药品监督管理局提出。本部分出全国医用临床捡验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会归口。本部分起草单位：国家食品药品监督管理局北京医疗器械质晟监替检验中心、江西特康科技有限公司。
本郝分主要起卢人：刘晓军、周洪华、章兆园、颜策、张宏。1范围
YY/T 0456.32003
血细胞分析仪应用试剂第3部分：稀释液本部分规定了恤组孢分析假用稀释液的分类与命名、要求、试验方法，检验规则、标志、包浸，运输和存，
本部分适用于电阻抗法而细胞分析议用稀释液，?规范性引用文件
下列文件中多款通过Y/467的本部分的叫用而构成为本部分的条款。凡是注！！期的引用文件.共随后所有的您改单不括勘误的内或够订版不用于空部介，然而，最励根不部分达或协设的冬方讲究是吾可使这些文供的長新版本：以是不注巨期的引用文件，其最新版添适用于术部分，
GB/T1912330包装储运多示标志
GB/T9721J988化学试剂pH值测定通则3分类与命名
3.1稀释液命名
区X区释液
3.2分类
产品型号
稀释液XXX
产型号
在制造商的注血产品标准中应明确说明端整液适用的血细胞分析设具体型号。4要求
4.1外观
降液应为无色透明液体，不得布沉淀、颗粒或察状物，4.2外部标志
稀拜液产晶外部松志应符合7.1的求。4.3净含量
稀释液净含量成符合表1规定，
表 1净含量要求
1 L*V20 L
最大充许负编差
稀释泌在(2:%:±1r)的nH值应不超过标称值的士0.20。标称值减根据适用血细脑分析仪的设计要求生制造商的注册产品标雅！明确规定。4.5 电导率
稀释液在(25℃士1:)的电导率(p)值成不超过标称值的二0.50 mS/cm。标称值应根据适用血细胞分析仪的设计要求在制造商的注册产品标准中明确规定，YY/T 0456. 3—2003
4.6漆遥浓度
稀释液的渗透依皮值应不超过标称的士10mmal/l(士10m()sm/kg)：标称值成根据适用宜细胞分析仪的设计要求在制造商的注册产品标准中明确规定4.7空白值
使用血细胍分析议测定时·测量结果白纠胞计数(WBC0,3×103/1.,红纸胞计数(RBC)≥0. 0X10/I血小板计数(PLT)10×10/L红蛋白含量(HGB)=?/T4.8准确性
4.8.1原装稀释液：白细胞（WH》计数的相对偏差应不超过=13红细胞（RBC)计数的相对偏差应不超过二外,血红蛋H(HGR)含里的机对偏差应不超过土%.血小板(P[)计数的相偏差成不翅过士15%平均红细体积(MCV)的相对偏差应不超过：5%。4.8,2替代稀释液：白细胞(WBC)教红细胞(RH()计数、血红蛋口(H:H)含量、血小板(P1)计数、平均红细胞体和(MCV)均成游在由原装试剂所得结果的文「2S门范围之内，4.9茜落数
微生物数甲.5F/ml.n
4.10批间差
H值批间片应0.2C电导率批间差应050mS/cm:渗透浓度批间差应1mmT(10 m0s./kg).
4. 11 稳定性
梯释液应规定有效期,取到期后三个月内约率样检测4.1,4.4~4. 9,结果应符合弃项日规定的要求。
5试验方法
5.1外观检查
筛释液摇匀后,取出适量放人比色管中,对光几现检查·应符合4.1的要求。5.2外部标志检查
日视检查产品包装外部标志.应符合4.2的要求.5.3净含量测定
川近用的通州量具量取或称净重后根据其密度计管出体积,结果应符合4.3闪要求5.4pH测定
收适量稀释液,按(/T 9721—1988规定片法测定其 2II值。在续定二欲,H平均值应符合4. 4的要求，
5.5电导率测定
按仪器说明书对导率仪进行调试和较准，再变电导率仪的操作说明书规定的步媒和方法测定稀释在25%士1°时的电导率值。连续测定三次,其平均值应符含.5的要求。5.6满透浓度测定
用校证后的冰点渗透浓度仪按议器操作说明书规定的步频和方点测定稀释液的密透浓度值，连续测定三次，其平购值成符合6的要求，5.7空白值测定
使用全白动或平口动血纲胞分析仪时，先将分析假内部原有试剂押空·引人待谢稀释液，进于空白测定，连续测定一次，各指标所得结来的最大值成合4.7的要求。5.8准确性测定
5.8.1源装稀释液，按照血细胞分析仪操作说明节的规定，以定值血作为标本在分折仪上用待轿释液进行测定,连续测定一改,测定结果取平均值。平均值与定值血标示值的相对偏差应符合 4,8.1 的要求。
YY/T 0456.3—2003
5.8.2替代释液：按照而细胞分析仪操作说明书的规定、在适用的血细胞分析仪1测定同一份正常成人新鲜EDTA·K，抗凝血，以原装进口稀释液10次重复测量的结果计算均值和标谁差，得到血样各参数测量结果的又土2SD范国，再由哲代进口的稀释液对血样测定3次，计算乎均值，销果应符台4.8.2的要求，
5.9菌落数测定
按附录A规定的厅法进行定，结果应符合4.9的要求。5,10批间差两定
取连续三批稀释液各一份，按5.3～5.5规定的方法分别谢定pH、心导率和渗透浓度各指标的最大测量值与最小测量值之益应符骨4.！的要求，5. 11 定性测定
稀液生产过程中每批应原包装留样，取到期后三个月内的留样接5.1～5.9的要求逆行测定，所得结果应符合4. 11的要求。
6检验规则
6.1原则
稀释液应由生产厂的技术检验部门选行检验，合格后方川提交验收，6.2检验
分为出厂检验和型式检验。
6.3出厂检验
6.3.1抽样
一个生产批为一个检验批，从每批中提取生产过程中的第一箱和最后一箱在内的至少三个成品。6, 3.2检验项目
按1.1~4.7的要求逐项检验。
6.3,3判定
有项不合格，即判定该批小合格，6.4型式检验
6.4. 1总测
在下列情况下，应进行型式检验：）新产品授产前（包括老产品转厂生产)：b）正式生产后.如生产工艺有较大改变.可能影响产品性能时，e）停产超过六个月·恢复产时1d）原料改变时，
）连续生产时，每十二个月不少于一次，f）国家监督管理部门进行质量抽时。6.4.2抽样
从出厂检验台格的产品中，随机抽取二个不同的批，每一批号随机抽取一箱。尽家监督管理部门进行质量轴位时·应抽取一批到期后一到二个月内的产品。6.4.3检验项目
按 1,1～1.11各项的要求运检验，6.4.4判定
有一顶不合格，即州定该批不合格。YY/T 0456.3—2003
7标志,标签
稀释没产品外包装上的标志应至少包括以下内奔：a产品名称型号
主要成分净含量；
产品用途,适用仪游;
产部江册号：
执行的产品标准号；
洋意事项：
生产批号.有效期：
制造商名称地址：
产品他装.储语图示标志应符含GH/T19120心C的相应要求。bzxz.net
稀释额产品外包装箱内成附有合格证，合格证应至少他括以下内容：7.2
产品名称利型考：
批号：
检验就代号：
“台格“字样。
包装、运输、贴存
释液州采用适宵的包装穿器，并加盖案均。品他装应能满足个同规定的要求，保证产品包装在长途选输小不受损坏，试剂不泄漏。8.2
产品作符合规定的条件下贮存。.3
A.1培养基的制备
A.1.1 原料
每上 0 m.培养基应收：
牛肉膏：3g：
蛋口陈：108
氯化钠:5 B:
原胎：15g~20g：
水:1 00c mL
A.1.2制备
附录A
（规范性附录）
菌落数测定方法
YY/T 0456, 3—2003
A.1.2.1将称鼠的原料用水溶解在锥形瓶内,用2-~3层纱布过滤,补足所失水分：A. 1. 2. 2 用 1 mo1/I. 的氨氧化钠或盐酸溶被将培养基 pH 值调节到 7. 0 ~-7. 2 之问-然后用寒塞瓶,外包牛皮纸封[1。茗不能及时灭菌,应放冰箱2℃--8保存。A.2灭菌
将取祥件用橡皮塞塞，之后将所有取样等外包一层牛皮纸，用细绳扎成一拥。将培差血、吸答等其他所需物品分别用牛皮纸包好。然后与制备好的培养基一起在 121℃灭菌 20 min。A.3取样
带好酒精灯.取样烊等物品。点燃酒精灯.打开稀释液桶盖，将酒精灯火焰靠近，从释液桶中倒出5m~10m稀饿到取样管中，并将取样管管口及橡皮暴用火焰旋转式烤1s~25最后塞紧抖口。A,4接种
A.4. 1接种前先用.05%~-0.1%的新消尔灭浸泡双于,之后将培养血、培养苯、择品、吸管等放人净台,并将每个培养血做上相碰的标记,每个样品需做阅个归行对照且。归做个空自对照。A.4.2加样：用吸管吸取1mL样品，注人到相成培差Ⅱ中，空口对照不样品。A. 4. 3加人普通琼脂培养基:将 15 mL,~29 ml.的普通琼脂培养基(45℃左右)归人到培养训l中,以刚好盖血底为宜。死加空自对照亚,其他样品加好之后立即盖上Ⅲ差,轻轻摇动培养肌，使船品琼脂混匀。
A.4.年待所有的普道琼脂培养基冷却凝固府·重新用牛皮纸包好培养肌·并在纸外写明接种11邸·倒置=35℃～37℃的恒温培养箱内培养。A.5结果记录
每厢24上观察一次，记录H在24h、48h而生长的菌落数及岚落的人小,形态、题色等.单最终记录48h后的菌落数。
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