YY/T 0665-2008
标准分类号
关联标准
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相关单位信息
标准简介
YY/T 0665-2008.Mueller hinton agar medium.
1范围
YY/T 0665规定了MH琼脂培养基的质量要求、检验方法、使用说明、标志、标签以及包装、运输、贮存。
YY/T 0665适用于MH琼脂培养基。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T191包装储运图示标志
中华人民共和国药典2005年版(二部)
JJF1070--2000定量包装商品净含量计量检验规则
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1培养基culture medium培养基是指由人工方法配合而成的,专供微生物培养、分离鉴别研究和保存使用的混合营养物制品。
3.2质控菌株quality control strain质控菌株通常指用于培养基质量控制和性能测定的微生物.
3.3菌落形成单位colony forming unit,CFU菌落形成单位是指在活菌培养计数时,由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落,以其表达活菌的数量。
4培养基配方
6检验方法
6.1理化检验
6.1.1外观
采用目测法,在自然光线明亮处目视,应符合5.1.1的规定。
6.1.2 装量
按JJF 1070- 2000,使用通用量具,测定装量,应符合5.1.2的规定。
6.1.3 pH 值
按使用说明配制培养基,灭菌后，在20C~25C时，按中华人民共和国药典pH值测定法或其他适宜固体培养基检测的pH计测定,应符合5. 1.3的规定。
6.1.4千燥失重
按(中华人民共和国药典干燥失重测定法测定,应符合5.1.4的规定。
6.2药敏试验
按附录A试验方法进行,结果应符合5.2的规定。
7使用说明
使用说明至少应当具有下列内容:
a) 产品名称、规格;
b) 配方;
te ))
c) 用途;
d)使用方法:
e)注意事顿:
f)贮存条件 与失效期;
g)生产单位名称 、联系方式。
8标志与标签
标志与标签至少应当具有下列内容:
a)执行标准号:口
b)产品注册证 号:
c)产品名称、规格、数最、批号;
d) 制造厂名称、商标和广此;
e)贮存条件和失效期。
9包装运输、贮存
1范围
YY/T 0665规定了MH琼脂培养基的质量要求、检验方法、使用说明、标志、标签以及包装、运输、贮存。
YY/T 0665适用于MH琼脂培养基。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T191包装储运图示标志
中华人民共和国药典2005年版(二部)
JJF1070--2000定量包装商品净含量计量检验规则
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1培养基culture medium培养基是指由人工方法配合而成的,专供微生物培养、分离鉴别研究和保存使用的混合营养物制品。
3.2质控菌株quality control strain质控菌株通常指用于培养基质量控制和性能测定的微生物.
3.3菌落形成单位colony forming unit,CFU菌落形成单位是指在活菌培养计数时,由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落,以其表达活菌的数量。
4培养基配方
6检验方法
6.1理化检验
6.1.1外观
采用目测法,在自然光线明亮处目视,应符合5.1.1的规定。
6.1.2 装量
按JJF 1070- 2000,使用通用量具,测定装量,应符合5.1.2的规定。
6.1.3 pH 值
按使用说明配制培养基,灭菌后，在20C~25C时，按中华人民共和国药典pH值测定法或其他适宜固体培养基检测的pH计测定,应符合5. 1.3的规定。
6.1.4千燥失重
按(中华人民共和国药典干燥失重测定法测定,应符合5.1.4的规定。
6.2药敏试验
按附录A试验方法进行,结果应符合5.2的规定。
7使用说明
使用说明至少应当具有下列内容:
a) 产品名称、规格;
b) 配方;
te ))
c) 用途;
d)使用方法:
e)注意事顿:
f)贮存条件 与失效期;
g)生产单位名称 、联系方式。
8标志与标签
标志与标签至少应当具有下列内容:
a)执行标准号:口
b)产品注册证 号:
c)产品名称、规格、数最、批号;
d) 制造厂名称、商标和广此;
e)贮存条件和失效期。
9包装运输、贮存
标准图片预览
标准内容
ICS 11.100
中华人民共和国医药行业标准
YY/T0665—2008
MH琼脂培养基
Mueller hinton agar medium
2008-04-25 发布
国家食品药品监督管理局
2009-06-01实施
YY/T 0665—2008
本标准是在参考《中华人民共和国药典》2005年版（二部）、WS231一2002用于纸片扩散法抗生素敏感试验的脱水Mueller-Hinton琼脂的检验规程》及临床和实验室标准协会[CLSI，原美国国立临床实验室标准化委员会（NCCLS)发布的抗微生物药物敏感性试验执行标准（第15版）的基础上，结合中国国情及实际情况和要求而制定
本标准附录A为规范性附录。
本标准由国家食品药品监督管理局提出。本标推由中国药品生物制品检定所归口。本标罹由中国药品生物制品检定所负责起草。本标准主要起节人：孙彬裕、康国华、曲守方、刘艳、高尚先1
1范围
MH琼脂培养基
YY/T 0665—2008
本标准规定了MH琼脂培养基的质量要求、检验方法、使用说明，标志标签以及包装、运输、贮存。本标罹遁用于MH琼脂培养基。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标谁达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标推。GB/T191包装储运图示标志
中华人民共和国药典2005年版（一部）JF1070：2000定量包装商品净含量计量检验规则3术语和定义
下列术诺和定义适用于本标准。3.1
培养基culture medium
培养基是指由人工方法配合而成的，专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存使用的混合营养物制品。3.2
质控菌株qualitycontrolstrain质控菌株通常指用于培养基质量控制和性能测定的微生物。3.3
菌落形或单位colany frming unit,CFU菌落形成单位是指在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，以其表达活菌的数量。4培养基配方
单位:g/L
酸水解酪蛋白
可溶性淀粉
牛肉漫出粉
参考配方中琼脂的含量均可根据凝胶强度适当调节。5质量要求
5.1理化要求
5.1.1 外观
应为均一的浅黄色粉末。
13, 0-~17. 0
YY/T0665-—2008
5.1.2装量
应不低于标示量。
5.1.3pH值
灭菌后，20℃～25℃时，该培养基pH值应为7.4士0.2。5.1.4干燥失重
应不超过6.0%。
5.2药敏试验
按照临床和实验室标准协会[CLSI.原美国国立临床实验室标准化委员会（NCCLS)】发布的抗微生物药物敏感性试验执行标准（第15版）要求，培养基接种质控菌应生长良好，抑菌圈应符合表1的要求。表1药敏试验抑苗圈允许范围
大肠埃希氏菌
纸片抗
抗生素名称
氨卡青霉素
(Ampicillin)
哌拉西林
(Piperacilin)
庆大霉素
(Gentamycin)
环丙沙星
TCC25922)
抑菌圈直径/m
(Ciprofloxacin)
氧霉素
(Chlorampnenicol)
青霉素
(Penicillin)
四环索
(Tetracycline)
头孢他啶
(Ceftazidime)
氧氟钞星
（Ofloxacin)
复合磺胺
(Trimethaprim Sulf
amethcxazole)
29--33
23-~29
金黄色葡萄球菌
(ATCC25923)
抑菌图直经/mm
24--28
24--32
铜绿假单胞菌
(ATCC27853)
抑菌圈直径/mm
25~-33
大肠埃希氏茵
(ATCC35218)
神菌圈直径/mm
纸片直径
临床和实验室标准协会[CLSI，原美国国立临床实验室标准化委员会（NCCLS)I发布的抗微生物药物敏感性试验执行标准（第15版）中规定为6mm，这也是美国所采用的纸片的直径，即该抗生素对该菌无抑制作用，不产生抑菌图。但是由于菌株产生变异，会被抑制，该项实验一定要进行以确证菌株未产生变异。而各国的纸片直径会有所不同，故此按表中所进行规定。2
6检验方法
6.1理化检验
6.1.1外观
采用目测法，在自然光线明亮处目视，应符合5.1.1的规定。6.1.2装量
按JJF10702000，使用通用量具，测定装量，应符合5.1.2的规定。6.1.3pH值
YY/T0665—2008
按使用说明配制培养基，灭菌后，在20℃～25℃时，按中华人民共和国药典pH值测定法或其他适宜固体培养基检测的pH计测定，应符合513的规定6.1.4干燥失重
按中华人民共和国
6.2药敏试验
更于燥失重测定法测定，应符合5.1.4的规定按附录A试验方进
行，结果应待合
使用说明
使用说明至少应单
首具有下列肉容
产品名
用途，
规格：
注意事
贮存条件与失效期；
生产单位名称、联系方式
标志与标签
标志与标签至少应当具有下列内容执行标准号
产品注册证
产品名称、规格数量批号：
制造厂名称、商标和广正：
贮存条件和失效期。
包装、运输、购存
9.1包装
包装储运图示标志应符合GB/T191的规定。包装容器应保证密封性良好，不易破碎。9.2运输
培养基在运输过程中，应防潮，应防止重物堆压，避免阳光直射和雨雪浸淋，防止与酸碱物质接触，防止内外包装破损。
9.3贮存
产品应置阴凉于保处赔存。
YY/T0665-2008
A,1质控菌株
附录A
（规范性附录）
MH琼脂培养基药敏试验方法
大肠埃希氏菌（Escherichiacoli)（ATC25922金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus)（ATCC25923）铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginasa)（ATCC27853）大肠埃希氏菌（Escherichiacoli)（ATCC35218）培养基药敏试验所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代）,并采用适宜的菌种保蔽技术，以保证试验菌株的生物学特性。不应同时操作2个以上菌株。
A.2方法
A.2. 1无菌操作要求
培养基药敏试验虚严格遵守无菌操作，防止薇生物污染。稀释液，培养基、实验器真等灭菌时，虚按照中华人民获和国药典中水菌法的要求，聚用验证台格的灭荫程序灭菌。
A.2.2菌种复苏
启开质控菌种,用0.9%无菌氯化钠溶液 0.3 nL制成菌悬液，加至营养琼脂斜面培养基中，置36℃±1℃培养 18 h～20 h
A.2.3菌种传代
刮取上述复苏后的质控菌种的新鲜培养物，加至营养琼脂斜面培养基中，36℃土1℃培养24h。A.2.4菌种增茜培养
刮取上述传代后的质控菌种的新鲜培养物，加至营养琼脂斜面培养基中,36℃士1℃培养18 h21 h.
A.2.5菌基液制备
将上述增菌培养后的质控菌种的新鲜培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成均匀菌液，并稀释至浊度为 0. 5麦氏标准单位(即约 1. 5× 108 CFIUJ/mL)的菌悬获，作为工作菌液A. 2. 6培养基制备
将待检MH琼脂培养基，用燕馏水或去离子水按照说明上标山的浓度配制成溶羧，121℃灭菌15 tmin后,冷却至45℃～50℃左右,混勾后迅速加人每个平血（直径为 90 mm),制成 4 mm厚度的平Ⅲ。待冷却至室温凝固后进行检测。A.2.7培养基接种
检测时，用无菌棉拭浸取工作菌液（在管壁内轻轻转压除去过多菌液）轻轻均勾涂抹到待检MHI琼脂培养基表面，每一平血涂抹三饮,每次涂抹后均需将平血转动60°,再行下一次涂抹,最后沿平血壁圆周涂抹一次，使细菌呈融合的菌苔生长。每一质控菌株接种2～3个平-Ⅲ。A. 2. 8放量药敏纸片
上述平血于室温放置片刻，待培养基表面稍干后,用无菌镊子将药敏纸片均匀贴布于培养基表面(5片/血）,各纸片间心间距不得少于24mm,纸片距平血边不得小于15mm。一目纸片接触培养基表面，即不可移动。在15min～30 min内将接种过质控菌并加好药敏纸片的培养基，骨36℃上1'℃培养4
培养18h20h。
观察记录结果
观察抑菌圈火小，同时测量并记录抑菌圈直径。YY/T0665--2008
YY/T0665—2008
蔡考文
[1]WS/T 231--2002用于纸片扩散法抗生素敏感试验的脱水 Mueller-Hinton琼脂的检验规程[2_抗微生物药物敏感性试验执行标准（第15版).临床和实验室标准协会「CLSI,原美国国立临床实验室标准化委员会（NCCLS)发布[3]美国微生物临床手册
YY/T 0665-2008
中华人民共和国医药
行业标推
MH 琼脂培养基
YY/T 0665-—2008
中国标准出版社出版发行
北京复兴门外三里河北街16号www.bzxz.net
邮政编码：100C45
网址 www, spe. net. cn
电话：6852394668517548
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销
开本 88G×1230 1/16
印张 0.75
字数 1 千字
2008 年 8 月第一版 2008 年 8 月第一次印刷书号：155066·2-18976定价14.00元由本社发行中心调换
如有印装差错
版权专有侵权必究
举报电话：（010)68533533
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紅衰張科5鳍湖
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1桌60婴
8002--G990 /X
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中华人民共和国医药行业标准
YY/T0665—2008
MH琼脂培养基
Mueller hinton agar medium
2008-04-25 发布
国家食品药品监督管理局
2009-06-01实施
YY/T 0665—2008
本标准是在参考《中华人民共和国药典》2005年版（二部）、WS231一2002用于纸片扩散法抗生素敏感试验的脱水Mueller-Hinton琼脂的检验规程》及临床和实验室标准协会[CLSI，原美国国立临床实验室标准化委员会（NCCLS)发布的抗微生物药物敏感性试验执行标准（第15版）的基础上，结合中国国情及实际情况和要求而制定
本标准附录A为规范性附录。
本标准由国家食品药品监督管理局提出。本标推由中国药品生物制品检定所归口。本标罹由中国药品生物制品检定所负责起草。本标准主要起节人：孙彬裕、康国华、曲守方、刘艳、高尚先1
1范围
MH琼脂培养基
YY/T 0665—2008
本标准规定了MH琼脂培养基的质量要求、检验方法、使用说明，标志标签以及包装、运输、贮存。本标罹遁用于MH琼脂培养基。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标谁达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标推。GB/T191包装储运图示标志
中华人民共和国药典2005年版（一部）JF1070：2000定量包装商品净含量计量检验规则3术语和定义
下列术诺和定义适用于本标准。3.1
培养基culture medium
培养基是指由人工方法配合而成的，专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存使用的混合营养物制品。3.2
质控菌株qualitycontrolstrain质控菌株通常指用于培养基质量控制和性能测定的微生物。3.3
菌落形或单位colany frming unit,CFU菌落形成单位是指在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，以其表达活菌的数量。4培养基配方
单位:g/L
酸水解酪蛋白
可溶性淀粉
牛肉漫出粉
参考配方中琼脂的含量均可根据凝胶强度适当调节。5质量要求
5.1理化要求
5.1.1 外观
应为均一的浅黄色粉末。
13, 0-~17. 0
YY/T0665-—2008
5.1.2装量
应不低于标示量。
5.1.3pH值
灭菌后，20℃～25℃时，该培养基pH值应为7.4士0.2。5.1.4干燥失重
应不超过6.0%。
5.2药敏试验
按照临床和实验室标准协会[CLSI.原美国国立临床实验室标准化委员会（NCCLS)】发布的抗微生物药物敏感性试验执行标准（第15版）要求，培养基接种质控菌应生长良好，抑菌圈应符合表1的要求。表1药敏试验抑苗圈允许范围
大肠埃希氏菌
纸片抗
抗生素名称
氨卡青霉素
(Ampicillin)
哌拉西林
(Piperacilin)
庆大霉素
(Gentamycin)
环丙沙星
TCC25922)
抑菌圈直径/m
(Ciprofloxacin)
氧霉素
(Chlorampnenicol)
青霉素
(Penicillin)
四环索
(Tetracycline)
头孢他啶
(Ceftazidime)
氧氟钞星
（Ofloxacin)
复合磺胺
(Trimethaprim Sulf
amethcxazole)
29--33
23-~29
金黄色葡萄球菌
(ATCC25923)
抑菌图直经/mm
24--28
24--32
铜绿假单胞菌
(ATCC27853)
抑菌圈直径/mm
25~-33
大肠埃希氏茵
(ATCC35218)
神菌圈直径/mm
纸片直径
临床和实验室标准协会[CLSI，原美国国立临床实验室标准化委员会（NCCLS)I发布的抗微生物药物敏感性试验执行标准（第15版）中规定为6mm，这也是美国所采用的纸片的直径，即该抗生素对该菌无抑制作用，不产生抑菌图。但是由于菌株产生变异，会被抑制，该项实验一定要进行以确证菌株未产生变异。而各国的纸片直径会有所不同，故此按表中所进行规定。2
6检验方法
6.1理化检验
6.1.1外观
采用目测法，在自然光线明亮处目视，应符合5.1.1的规定。6.1.2装量
按JJF10702000，使用通用量具，测定装量，应符合5.1.2的规定。6.1.3pH值
YY/T0665—2008
按使用说明配制培养基，灭菌后，在20℃～25℃时，按中华人民共和国药典pH值测定法或其他适宜固体培养基检测的pH计测定，应符合513的规定6.1.4干燥失重
按中华人民共和国
6.2药敏试验
更于燥失重测定法测定，应符合5.1.4的规定按附录A试验方进
行，结果应待合
使用说明
使用说明至少应单
首具有下列肉容
产品名
用途，
规格：
注意事
贮存条件与失效期；
生产单位名称、联系方式
标志与标签
标志与标签至少应当具有下列内容执行标准号
产品注册证
产品名称、规格数量批号：
制造厂名称、商标和广正：
贮存条件和失效期。
包装、运输、购存
9.1包装
包装储运图示标志应符合GB/T191的规定。包装容器应保证密封性良好，不易破碎。9.2运输
培养基在运输过程中，应防潮，应防止重物堆压，避免阳光直射和雨雪浸淋，防止与酸碱物质接触，防止内外包装破损。
9.3贮存
产品应置阴凉于保处赔存。
YY/T0665-2008
A,1质控菌株
附录A
（规范性附录）
MH琼脂培养基药敏试验方法
大肠埃希氏菌（Escherichiacoli)（ATC25922金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus)（ATCC25923）铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginasa)（ATCC27853）大肠埃希氏菌（Escherichiacoli)（ATCC35218）培养基药敏试验所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代）,并采用适宜的菌种保蔽技术，以保证试验菌株的生物学特性。不应同时操作2个以上菌株。
A.2方法
A.2. 1无菌操作要求
培养基药敏试验虚严格遵守无菌操作，防止薇生物污染。稀释液，培养基、实验器真等灭菌时，虚按照中华人民获和国药典中水菌法的要求，聚用验证台格的灭荫程序灭菌。
A.2.2菌种复苏
启开质控菌种,用0.9%无菌氯化钠溶液 0.3 nL制成菌悬液，加至营养琼脂斜面培养基中，置36℃±1℃培养 18 h～20 h
A.2.3菌种传代
刮取上述复苏后的质控菌种的新鲜培养物，加至营养琼脂斜面培养基中，36℃土1℃培养24h。A.2.4菌种增茜培养
刮取上述传代后的质控菌种的新鲜培养物，加至营养琼脂斜面培养基中,36℃士1℃培养18 h21 h.
A.2.5菌基液制备
将上述增菌培养后的质控菌种的新鲜培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成均匀菌液，并稀释至浊度为 0. 5麦氏标准单位(即约 1. 5× 108 CFIUJ/mL)的菌悬获，作为工作菌液A. 2. 6培养基制备
将待检MH琼脂培养基，用燕馏水或去离子水按照说明上标山的浓度配制成溶羧，121℃灭菌15 tmin后,冷却至45℃～50℃左右,混勾后迅速加人每个平血（直径为 90 mm),制成 4 mm厚度的平Ⅲ。待冷却至室温凝固后进行检测。A.2.7培养基接种
检测时，用无菌棉拭浸取工作菌液（在管壁内轻轻转压除去过多菌液）轻轻均勾涂抹到待检MHI琼脂培养基表面，每一平血涂抹三饮,每次涂抹后均需将平血转动60°,再行下一次涂抹,最后沿平血壁圆周涂抹一次，使细菌呈融合的菌苔生长。每一质控菌株接种2～3个平-Ⅲ。A. 2. 8放量药敏纸片
上述平血于室温放置片刻，待培养基表面稍干后,用无菌镊子将药敏纸片均匀贴布于培养基表面(5片/血）,各纸片间心间距不得少于24mm,纸片距平血边不得小于15mm。一目纸片接触培养基表面，即不可移动。在15min～30 min内将接种过质控菌并加好药敏纸片的培养基，骨36℃上1'℃培养4
培养18h20h。
观察记录结果
观察抑菌圈火小，同时测量并记录抑菌圈直径。YY/T0665--2008
YY/T0665—2008
蔡考文
[1]WS/T 231--2002用于纸片扩散法抗生素敏感试验的脱水 Mueller-Hinton琼脂的检验规程[2_抗微生物药物敏感性试验执行标准（第15版).临床和实验室标准协会「CLSI,原美国国立临床实验室标准化委员会（NCCLS)发布[3]美国微生物临床手册
YY/T 0665-2008
中华人民共和国医药
行业标推
MH 琼脂培养基
YY/T 0665-—2008
中国标准出版社出版发行
北京复兴门外三里河北街16号www.bzxz.net
邮政编码：100C45
网址 www, spe. net. cn
电话：6852394668517548
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销
开本 88G×1230 1/16
印张 0.75
字数 1 千字
2008 年 8 月第一版 2008 年 8 月第一次印刷书号：155066·2-18976定价14.00元由本社发行中心调换
如有印装差错
版权专有侵权必究
举报电话：（010)68533533
17bzW.cn脆熊葛干种駕褐顏蝎稚
紅衰張科5鳍湖
17jzw.com脆黛峰臀他沃蜂鹉轰赣
1桌60婴
8002--G990 /X
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