DB12/T987—2020
鲜、冻畜禽肉中磺胺类、喹诺酮类和四环素类兽药残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

发布日期：2020-10-14
实施日期：2020-11-15
发布单位：天津市市场监督管理委员会

前言
本标准依据GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由天津市农业农村委员会提出并归口。
本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所、摩天众创（天津）检测服务有限公司。
本标准主要起草人：李娜、林宏芳、邵辉、李辉、刘磊、张玉婷、郭永泽、绳慧珊、卢娜、冯兆欣、郝玉杰、潘喆。

1 范围
本标准规定了鲜、冻畜禽肉中磺胺类、喹诺酮类和四环素类兽药残留量的测定——液相色谱-串联质谱法的方法提要、试剂和材料、仪器和设备、试样制备与保存、测定步骤、灵敏度、准确度和精密度。本标准适用于鲜、冻畜禽肉中磺胺类、喹诺酮类和四环素类共28种兽药残留的测定。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 方法提要
试样经酸化乙腈提取，提取液浓缩、甲醇定容后，用液相色谱-串联质谱仪（LC-MS/MS）测定，基质外标法定量。

4 试剂和材料
4.1 基本要求
除另有说明外，所用试剂为分析纯。所用水为GB/T 6682规定的一级水。
4.2 试剂
4.2.1 乙腈：色谱纯。
4.2.2 甲醇：色谱纯。
4.2.3 甲酸：色谱纯。
4.2.4 乙酸：色谱纯。
4.2.5 正己烷。
4.2.6 无水硫酸钠。
4.2.7 乙二胺四乙酸二钠（Na2EDTA·2H2O)。
4.2.8 柠檬酸（C6H8O7)。
4.2.9 磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O)。
4.2.10 氢氧化钠（NaOH)。
4.3 溶液配制
4.3.1 氢氧化钠溶液（1 mol/L）：称取4.0g氢氧化钠，用水溶解并定容至100mL。
4.3.2 氢氧化钠溶液（0.03 mol/L）：称取0.12g氢氧化钠，用水溶解并定容至100mL。
4.3.3 Na2EDTA-McIlvaine缓冲溶液（0.1 mol/L）：称取12.9g柠檬酸，10.9g磷酸氢二钠，37.2g乙二胺四乙酸二钠，加900mL水溶解，用1 mol/L氢氧化钠溶液调pH值至4.0，加水定容至1000mL。
4.3.4 0.1%甲酸水：移取0.1mL甲酸加入100mL水中，混匀。
4.3.5 0.1%甲酸甲醇：移取0.1mL甲酸加入100mL甲醇中，混匀。
4.3.6 甲醇-0.1%甲酸（10:90, V/V）：移取10mL甲醇加入90mL0.1%甲酸水溶液中，混匀。
4.4 标准品
磺胺类、喹诺酮类、四环素类标准品：磺胺醋酰、磺胺嘧啶、磺胺吡啶、磺胺噻唑、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺甲噻二唑、磺胺氯哒嗪、磺胺甲噁唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺异恶唑、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺恩替拉、莫西沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、二氟沙星、喹诺酸、氟甲喹、土霉素、金霉素、强力霉素。标准品纯度要求：磺胺类、四环素类标准品纯度≥98.0%；环丙沙星纯度≥95.0%；（达氟）单诺沙星纯度≥94.0%；沙拉沙星纯度≥95.0%；四环素纯度≥96.5%。
4.5 标准溶液配制
4.5.1 标准储备溶液（1000 mg/L）：准确称取10mg各兽药标准品，根据标准品的溶解性不同，磺胺类、四环素类兽药用乙腈溶解并定容至10mL，喹诺酮类兽药先用2mL氢氧化钠溶液溶解，甲醇定容至10mL，于-18℃避光保存，有效期1年。
4.5.2 标准工作溶液：分别吸取28种兽药标准储备液0.25mL于25mL容量瓶，用乙腈稀释并定容配制成浓度为10mg/L的混合标准工作液，于4℃避光保存，有效期1个月。
4.6 材料
4.6.1 十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：40~60μm。
4.6.2 氨基硅烷化硅胶（NH2）：40~60μm。
4.6.3 微孔滤膜（有机相）：0.22μm。
5 仪器和设备