SN/T 1362-2011
基本信息
标准号： SN/T 1362-2011
中文名称：假高粱检疫鉴定方法
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
SN/T 1362-2011 假高粱检疫鉴定方法
SN/T1362-2011
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标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1362—2011
代替SN/T1362-—2004
假高梁检疫鉴定方法
Methods for quarantine and identification of Sorghumhalepense(L.)Pers2011-05-31发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2011-12-01实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准代替SN/T1362—2004《假高梁检疫鉴定方法》。本标准与SN/T1362—2004相比，主要技术变化如下：规范了样品制备过程；
完善了原标准中鉴定方法与依据；-完善了原标准中结实小穗特征；修改了原标准中仪器设备；
修改了原标准中结果判定；
修改了原标准中附录
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局本标准主要起草人：邵秀玲、尼秀媚、宋涛、厉艳、甘琴华、吴兴海、纪瑛、王英超本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T1362-—2004。
TIKANYKACA
SN/T 1362—2011
1范围
假高检疫鉴定方法
本标准规定了进出境植物及植物产品中假高藥的检疫与鉴定方法SN/T1362—2011wwW.bzxz.Net
本标准适用于进出境粮食、种子、芝麻、苗木等植物及其植物产品中混杂假高粱的分离与鉴定，还适用于进出境羊毛、皮张及运输工具等夹带的假高粱的鉴定。规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T0800.1进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
小穗spikelet
构成禾本科植物复花序的基本单位，具一至多朵小花，每个小花外面包着外程和内，内有雄蕊和雌蕊，每个小穗基部一般有两个颖片。3.2
小穗轴rachilla
每个小穗有一短轴，其上着生一至多朵小花。3.3
小花（带颖果）floret
禾本科的花（籽实）连同包被其外的内、外。3.4
squama
禾本科小穗上的小花，其外面具有两片苞片称为程片，在外一片称为外（lemma）包着的内部片称为内程（palea）。
颖果caryopsis
果皮与种皮愈合，不能分离。
颖片glume
禾本科植物小穗基部的苞片，第一颖（存在或退化）位置较低，亦称外颖（outerglume），第二颖位置较高，亦称内颖（interglume）。3.7
芒awn
禾本科小穗上的颖或外程先端伸长成刚毛状物。1
TTKANYKAa
SN/T1362—2011
4原理
4.1分类地位
假高梁SorghumhalepenseL.，隶属禾本科Gramineae，蜀泰属SorghumMoench4.2传播途径
假高梁及其近似物种均以小穗、颖果的形式混杂于植物原粮、种子、芝麻、棉毛、苗木等植物及其植物产品之中，随货物调运而传播；假高梁还可通过人为及运输工具等夹带传播4.3鉴定依据
本标准以假高梁的小穗、片、颖片、颖果的形态特征及其大小作为假高梁形态鉴定的依据；以假高梁染色体核型分析结果作为细胞学方法的鉴定依据；以假高梁及其近似种基因组中的特异序列和突变作为假高梁分子生物学方法的鉴定依据。5仪器和用具
5.1仪器
5.1.1生物显微镜、染色体分析系统、体视显微镜（10X～40X）、扩大镜5.1.2核酸蛋白分析仪、纯水系统、PGR超净工作台、PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶分析成像系统5.1.3电动筛和孔筛：电动筛规格旋转速率100r/min～150r/min，孔筛一般采用圆筛，孔径分别为2.0mm、2.5mm、3.0mm.3.5mm.4.0mm。5.1.4培养箱、水浴锅、电子秤（精度：千分之一）、冰箱、微波炉。5.2用具
5.2.1白瓷盘：可采用多种规格的白瓷盘。5.2.2解剖刀、解剖针、镊子、培养血、指形管、广口瓶、双面胶5.2.3标本瓶、标签、原始记录纸、吸水纸、樟脑精、干燥剂5.2.4测微尺、直尺
6实验室检验
6.1样品制备
将取回的混合样品充分混勾，采用四分法、点取法或用分样器进行分样，按照SN/T0800.1制备平均样品，视样品多少，取平均样品的两分之一至四分之三作为检验样品。每份检验样品应不少于2kg；进口种子等样品可根据种类、数量等实际情况决定，送检样品不足1kg的全检。称取并记录检验样品的质量（精确到0.01kg），剩余平均样品加贴标签作为保存样品保存。6.2样品分离
6.2.1总则
当送检样品的最窄处横径大于5mm时，可采用过筛检验法与人工挑选法，当送检样品最窄处横径小于5mm时，应采用人工挑选法。TKANYKAa
6.2.2过筛检验
SN/T1362—2011
室内筛样检验时，至少采用双层筛子筛样。根据样品的直径大小确定套筛规格，从大到小依次套上不同孔径的规格筛和筛底，加人适量样品后盖上筛盖，以回旋法过筛，每筛旋转15次～20次（或用电动振筛机振荡），使样品充分分离后，将各层筛上物及筛下物分别倒人白磁盘内，挑选杂草籽入培养皿。6.2.3人工挑选
将少量检验样品倒入白磁盘内，以保证样品不相互覆盖。用镊子挑捡杂草籽，并放置于培养皿内。6.3鉴定方法
6.3.1总则
对成熟且外部形态特征典型的种子可通过形态鉴定进行结果判定，对成熟度不够、种子受损等形态鉴定无法准确判定的疑似种应通过细胞学方法、分子生物学方法进一步确证。6.3.2镜检形态鉴定
用肉眼或借助放大镜对杂草籽进行分类，将疑似蜀黍属小穗、带颖果、颖果等挑选出来，于体视显微镜下进一步观察。在体视显微镜下，观察其小穗、小穗轴、荐片、颖果的外部形态特征。对外部形态判断模糊的，可用解部刀及解针对种子进行解剖，观察其种脐、种胚的形状及大小等特征。假高粱形态特征见附录A，近似种的形态比较见附录B、附录C。6.3.3细胞学方法
将可疑种子萌发培养，制作染色体玻片镜检观察，并进行核型分析。具体实验步骤见附录D。6.3.4分子生物学方法（LA-PCR方法）将可疑种子的颖果用液氮研磨，利用基因组提取试剂盒提取植物基因组DNA。利用LA-PCR法对Adh1基因进行扩增，条带大小约为2000bp，并将PCR产物测序。具体实验步骤见附录E，假高粱及其近似种的GenBank登录号参见附录F。7结果判定
7.1形态学方法
以成熟小穗的形态特征为依据，符合附录A者可通过形态鉴定直接判定为假高粱，否则结果判定为阴性。
7.2细胞学方法
根据样品的核型公式及核型类型，与表D.4中假高粱的核型相符的样品判定为阳性，否则为阴性。7.3分子生物学
LA-PCR方法的结果判定以测序结果与Genbank比对核酸同源值为准，同源值最高且同源性高于99.5%者结果判定为阳性，否则结果为阴性。3
TTKANYKAa
SN/T1362—2011
3综合判定
根据不同的鉴定方法分别对检测结果进行最终判定。形态鉴定结果为阳性的样品可最终判定为阳性；形态鉴定可疑，分子生物学或细胞学结果有一项为阳性的样品可最终判定为阳性；否则结果判定为阴性。
有害生物含量计算
经鉴定为检疫性有害生物的应按式（1)计算杂草含量：有害生物含量（粒/kg）=p/m
式中：
p试样中有害生物的数量，单位为粒；m
试样质量，单位为千克（kg）。样品保存
鉴定完毕后，将鉴定出的假高粱种子装人种子（样品）瓶等容器内，并加以明确标识发现假高梁的样品由经手人标识确认、样品管理员登记，置放于恒温、恒湿、防鼠处至少保存6个月，以备复验、谈判、仲裁，作为对外交涉之依据，保存期满，经灭生后要善处理4
TKANYKAa
A.1蜀黍属特征
附录A
（规范性附录）
假高梁形态鉴定特征
SN/T1362—2011
蜀黍属别名高粱属，其主要形态特征：小穗李生，但在穗轴顶端之一节则为三枚共生。有柄小穗为雄性或中性，常退化而不孕；无柄小穗为两性结实，背腹压扁，基盘短而钝圆，第一颖下部呈革质，平滑而有光泽。小穗通常有明显的芒，芒自第二外顶端二裂齿间伸出，芒膝曲扭转，极易脱落，第二颖背面有二枚小穗轴，顶端有关节或不明显。A.2假高梁形态特征
A.2.1结实小穗特征
小穗李生，顶为3枚共生。结实的无柄小穗卵状披针形或椭圆形，背腹扁，腹面具穗轴节间和有柄小穗柄各1枚：无柄小穗长3.5mm~5.0mm，宽1.8mm~2.0mm，厚约为1.5mm，黄褐色红褐色至紫黑色，表面光滑，有光泽。第一颖革质，具油漆光泽，上部具2脊，餐和边缘有纤毛（早落）：第二颖中央脊突，无毛，成舟形。两颖片革质，顶端常呈破碎状，基部圆。小穗轴顶端有关节，小穗系由关节处整齐脱落。片白膜质透明，芒由第二外裂齿间伸出，膝曲扭转，长约12mm，极易断落，有时无芒，杂交种丝克高梁（S.silk）主要来源于澳大利亚，与假高梁在形态上很相似，主要区别为：原始种的丝克高粱较假高粱略窄，小穗轴不易脱落。但该种变异较大，如遇可疑者需通过分子生物学方法进一步确认。
A.2.2颖果特征
颖果长2.6mm~3.2mm，宽1.5mm~1.8mm，厚约1.0mm；倒卵形或椭圆形，暗红褐色或棕色，表面乌暗而无光泽；侧面观，背面钝圆，腹面扁平，全长近等厚，先端钝圆，具宿存花柱2枚；基部钝尖。种脐微小，圆形，深褐色
A.2.3解剖特征
片薄膜质，透明，稍短于小穗，第二外先端二裂，芒从裂齿间伸出，膝曲扭转，芒长9mm～15mm，常折断；胚卵圆形或椭圆形，长为颖果的二分之一至三分之二。TTKANYKAa
SN/T1362-2011
场提晶
二二期）
(un mbudad uniaaos
提晶·
生·一
(aasano
唯基·基二
wug'g~uu0g
dnpros
TTKANYKAC
SN/T1362—2011
*8~gzs
真安编
TTKANYKAC
SN/T1362—2011
联柜米
TKANYKAa
D.1概念
D.1.1染色体类型
附录D
（规范性附录）
假高梁染色体核型分析
SN/T1362—2011
根据着丝粒在染色体上所处的位置，可将中期染色体分为几种类型，见表D.1和图D.1.。表D.1
染色体分类标准
染色体类型
正中部着丝点类型（M)
中部着丝点类型（m）
近中部着丝点类型（Sm）
近端着丝点类型（St)
端着丝点类型(t)
顶端着丝点类型（T）
若丝粒
中若然粒
染色体
染色单体
近中若然粒
染仰体
近端着丝税
染件休
臂比（长臂/短臂）
-改缇痕
蝴若丝粒
染色体
根据着丝粒位置进行的染色体分类图示（引自《细胞生物学》）图D.1
D.1.2染色体
染色体是细胞在有丝分裂时遗传物质存在的特定形式，是间期细胞染色质结构紧密包装的结果。9
SN/T1362—2011
D.1.3核型
染色体组型又称核型（karyotype），是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群（亚种、种、属等）的体细胞内的整套染色体，按它们相对恒定的特征（染色体数目、大小、形态特征）排列起来的图像。核型如用模式图表示则称为组型（idiogram）。D.1.4核型分析
在对染色体进行测量计算的基础上·进行分组、排队、配对，并进行形态分析的过程叫核型分析。D.1.5染色体长度比
最长染色体长度与最短染色体长度的比值。D.1.6臂比(q/p）
长臂长（q)与短臂(p)长的比值。D.1.7核型公式
综合核型分析的结果，将核型的主要特征以公式形式表示。它简明扼要、便于记忆和比较。如牛角椒2n=24=20m+2Sm（SAT)+2St(SAT)。D.2试剂
D.2.1Carnoy固定液：冰醋酸：无水乙醇=1：3（体积比）D.2.2改良苯酚品红：取3g碱性品红溶于10mL70%乙醇中，将其倒入90mL5%苯酚溶液中，再加人冰乙酸和甲醛各10mL，此为原液。取原液20mL加人45%冰乙酸80mL，再加人1g山梨醇，摇勺溶解即可。
D.3染色体制片方法
D.3.1样品萌发
选择籽粒饱满的可疑假高梁种子，清水洁净后去除颖壳，放入铺有双层滤纸、直径为90mm的培养Ⅲ内，每放5粒，加人6mL蒸馏水后置于30℃、湿度80%、光照强度为30001x的连续光照条件下培养。待种子根长至1cm左右，在上午8：00~10：00之间，切下长约0.5cm1.0cm的根尖，进行预处理。
D.3.2预处理
将材料切下依次放入以下溶液：1）0.05%~0.2%秋水仙碱水溶液中处理3h～4h；2）对二氯苯饱和水溶液中处理3h~4h；3）8-羟基奎啉0.002mol/L处理3h4h4）在0℃～3℃下冷冻处理24h
D.3.3固定
用Carnoy固定液固定3h～24h。固定后换人70%酒精中3℃~～8℃下保存。10
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假高梁检疫鉴定方法
Methods for quarantine and identification of Sorghumhalepense(L.)Pers2011-05-31发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2011-12-01实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准代替SN/T1362—2004《假高梁检疫鉴定方法》。本标准与SN/T1362—2004相比，主要技术变化如下：规范了样品制备过程；
完善了原标准中鉴定方法与依据；-完善了原标准中结实小穗特征；修改了原标准中仪器设备；
修改了原标准中结果判定；
修改了原标准中附录
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局本标准主要起草人：邵秀玲、尼秀媚、宋涛、厉艳、甘琴华、吴兴海、纪瑛、王英超本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T1362-—2004。
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1范围
假高检疫鉴定方法
本标准规定了进出境植物及植物产品中假高藥的检疫与鉴定方法SN/T1362—2011wwW.bzxz.Net
本标准适用于进出境粮食、种子、芝麻、苗木等植物及其植物产品中混杂假高粱的分离与鉴定，还适用于进出境羊毛、皮张及运输工具等夹带的假高粱的鉴定。规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T0800.1进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
小穗spikelet
构成禾本科植物复花序的基本单位，具一至多朵小花，每个小花外面包着外程和内，内有雄蕊和雌蕊，每个小穗基部一般有两个颖片。3.2
小穗轴rachilla
每个小穗有一短轴，其上着生一至多朵小花。3.3
小花（带颖果）floret
禾本科的花（籽实）连同包被其外的内、外。3.4
squama
禾本科小穗上的小花，其外面具有两片苞片称为程片，在外一片称为外（lemma）包着的内部片称为内程（palea）。
颖果caryopsis
果皮与种皮愈合，不能分离。
颖片glume
禾本科植物小穗基部的苞片，第一颖（存在或退化）位置较低，亦称外颖（outerglume），第二颖位置较高，亦称内颖（interglume）。3.7
芒awn
禾本科小穗上的颖或外程先端伸长成刚毛状物。1
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4原理
4.1分类地位
假高梁SorghumhalepenseL.，隶属禾本科Gramineae，蜀泰属SorghumMoench4.2传播途径
假高梁及其近似物种均以小穗、颖果的形式混杂于植物原粮、种子、芝麻、棉毛、苗木等植物及其植物产品之中，随货物调运而传播；假高梁还可通过人为及运输工具等夹带传播4.3鉴定依据
本标准以假高梁的小穗、片、颖片、颖果的形态特征及其大小作为假高梁形态鉴定的依据；以假高梁染色体核型分析结果作为细胞学方法的鉴定依据；以假高梁及其近似种基因组中的特异序列和突变作为假高梁分子生物学方法的鉴定依据。5仪器和用具
5.1仪器
5.1.1生物显微镜、染色体分析系统、体视显微镜（10X～40X）、扩大镜5.1.2核酸蛋白分析仪、纯水系统、PGR超净工作台、PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶分析成像系统5.1.3电动筛和孔筛：电动筛规格旋转速率100r/min～150r/min，孔筛一般采用圆筛，孔径分别为2.0mm、2.5mm、3.0mm.3.5mm.4.0mm。5.1.4培养箱、水浴锅、电子秤（精度：千分之一）、冰箱、微波炉。5.2用具
5.2.1白瓷盘：可采用多种规格的白瓷盘。5.2.2解剖刀、解剖针、镊子、培养血、指形管、广口瓶、双面胶5.2.3标本瓶、标签、原始记录纸、吸水纸、樟脑精、干燥剂5.2.4测微尺、直尺
6实验室检验
6.1样品制备
将取回的混合样品充分混勾，采用四分法、点取法或用分样器进行分样，按照SN/T0800.1制备平均样品，视样品多少，取平均样品的两分之一至四分之三作为检验样品。每份检验样品应不少于2kg；进口种子等样品可根据种类、数量等实际情况决定，送检样品不足1kg的全检。称取并记录检验样品的质量（精确到0.01kg），剩余平均样品加贴标签作为保存样品保存。6.2样品分离
6.2.1总则
当送检样品的最窄处横径大于5mm时，可采用过筛检验法与人工挑选法，当送检样品最窄处横径小于5mm时，应采用人工挑选法。TKANYKAa
6.2.2过筛检验
SN/T1362—2011
室内筛样检验时，至少采用双层筛子筛样。根据样品的直径大小确定套筛规格，从大到小依次套上不同孔径的规格筛和筛底，加人适量样品后盖上筛盖，以回旋法过筛，每筛旋转15次～20次（或用电动振筛机振荡），使样品充分分离后，将各层筛上物及筛下物分别倒人白磁盘内，挑选杂草籽入培养皿。6.2.3人工挑选
将少量检验样品倒入白磁盘内，以保证样品不相互覆盖。用镊子挑捡杂草籽，并放置于培养皿内。6.3鉴定方法
6.3.1总则
对成熟且外部形态特征典型的种子可通过形态鉴定进行结果判定，对成熟度不够、种子受损等形态鉴定无法准确判定的疑似种应通过细胞学方法、分子生物学方法进一步确证。6.3.2镜检形态鉴定
用肉眼或借助放大镜对杂草籽进行分类，将疑似蜀黍属小穗、带颖果、颖果等挑选出来，于体视显微镜下进一步观察。在体视显微镜下，观察其小穗、小穗轴、荐片、颖果的外部形态特征。对外部形态判断模糊的，可用解部刀及解针对种子进行解剖，观察其种脐、种胚的形状及大小等特征。假高粱形态特征见附录A，近似种的形态比较见附录B、附录C。6.3.3细胞学方法
将可疑种子萌发培养，制作染色体玻片镜检观察，并进行核型分析。具体实验步骤见附录D。6.3.4分子生物学方法（LA-PCR方法）将可疑种子的颖果用液氮研磨，利用基因组提取试剂盒提取植物基因组DNA。利用LA-PCR法对Adh1基因进行扩增，条带大小约为2000bp，并将PCR产物测序。具体实验步骤见附录E，假高粱及其近似种的GenBank登录号参见附录F。7结果判定
7.1形态学方法
以成熟小穗的形态特征为依据，符合附录A者可通过形态鉴定直接判定为假高粱，否则结果判定为阴性。
7.2细胞学方法
根据样品的核型公式及核型类型，与表D.4中假高粱的核型相符的样品判定为阳性，否则为阴性。7.3分子生物学
LA-PCR方法的结果判定以测序结果与Genbank比对核酸同源值为准，同源值最高且同源性高于99.5%者结果判定为阳性，否则结果为阴性。3
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3综合判定
根据不同的鉴定方法分别对检测结果进行最终判定。形态鉴定结果为阳性的样品可最终判定为阳性；形态鉴定可疑，分子生物学或细胞学结果有一项为阳性的样品可最终判定为阳性；否则结果判定为阴性。
有害生物含量计算
经鉴定为检疫性有害生物的应按式（1)计算杂草含量：有害生物含量（粒/kg）=p/m
式中：
p试样中有害生物的数量，单位为粒；m
试样质量，单位为千克（kg）。样品保存
鉴定完毕后，将鉴定出的假高粱种子装人种子（样品）瓶等容器内，并加以明确标识发现假高梁的样品由经手人标识确认、样品管理员登记，置放于恒温、恒湿、防鼠处至少保存6个月，以备复验、谈判、仲裁，作为对外交涉之依据，保存期满，经灭生后要善处理4
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A.1蜀黍属特征
附录A
（规范性附录）
假高梁形态鉴定特征
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蜀黍属别名高粱属，其主要形态特征：小穗李生，但在穗轴顶端之一节则为三枚共生。有柄小穗为雄性或中性，常退化而不孕；无柄小穗为两性结实，背腹压扁，基盘短而钝圆，第一颖下部呈革质，平滑而有光泽。小穗通常有明显的芒，芒自第二外顶端二裂齿间伸出，芒膝曲扭转，极易脱落，第二颖背面有二枚小穗轴，顶端有关节或不明显。A.2假高梁形态特征
A.2.1结实小穗特征
小穗李生，顶为3枚共生。结实的无柄小穗卵状披针形或椭圆形，背腹扁，腹面具穗轴节间和有柄小穗柄各1枚：无柄小穗长3.5mm~5.0mm，宽1.8mm~2.0mm，厚约为1.5mm，黄褐色红褐色至紫黑色，表面光滑，有光泽。第一颖革质，具油漆光泽，上部具2脊，餐和边缘有纤毛（早落）：第二颖中央脊突，无毛，成舟形。两颖片革质，顶端常呈破碎状，基部圆。小穗轴顶端有关节，小穗系由关节处整齐脱落。片白膜质透明，芒由第二外裂齿间伸出，膝曲扭转，长约12mm，极易断落，有时无芒，杂交种丝克高梁（S.silk）主要来源于澳大利亚，与假高梁在形态上很相似，主要区别为：原始种的丝克高粱较假高粱略窄，小穗轴不易脱落。但该种变异较大，如遇可疑者需通过分子生物学方法进一步确认。
A.2.2颖果特征
颖果长2.6mm~3.2mm，宽1.5mm~1.8mm，厚约1.0mm；倒卵形或椭圆形，暗红褐色或棕色，表面乌暗而无光泽；侧面观，背面钝圆，腹面扁平，全长近等厚，先端钝圆，具宿存花柱2枚；基部钝尖。种脐微小，圆形，深褐色
A.2.3解剖特征
片薄膜质，透明，稍短于小穗，第二外先端二裂，芒从裂齿间伸出，膝曲扭转，芒长9mm～15mm，常折断；胚卵圆形或椭圆形，长为颖果的二分之一至三分之二。TTKANYKAa
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场提晶
二二期）
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D.1概念
D.1.1染色体类型
附录D
（规范性附录）
假高梁染色体核型分析
SN/T1362—2011
根据着丝粒在染色体上所处的位置，可将中期染色体分为几种类型，见表D.1和图D.1.。表D.1
染色体分类标准
染色体类型
正中部着丝点类型（M)
中部着丝点类型（m）
近中部着丝点类型（Sm）
近端着丝点类型（St)
端着丝点类型(t)
顶端着丝点类型（T）
若丝粒
中若然粒
染色体
染色单体
近中若然粒
染仰体
近端着丝税
染件休
臂比（长臂/短臂）
-改缇痕
蝴若丝粒
染色体
根据着丝粒位置进行的染色体分类图示（引自《细胞生物学》）图D.1
D.1.2染色体
染色体是细胞在有丝分裂时遗传物质存在的特定形式，是间期细胞染色质结构紧密包装的结果。9
SN/T1362—2011
D.1.3核型
染色体组型又称核型（karyotype），是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群（亚种、种、属等）的体细胞内的整套染色体，按它们相对恒定的特征（染色体数目、大小、形态特征）排列起来的图像。核型如用模式图表示则称为组型（idiogram）。D.1.4核型分析
在对染色体进行测量计算的基础上·进行分组、排队、配对，并进行形态分析的过程叫核型分析。D.1.5染色体长度比
最长染色体长度与最短染色体长度的比值。D.1.6臂比(q/p）
长臂长（q)与短臂(p)长的比值。D.1.7核型公式
综合核型分析的结果，将核型的主要特征以公式形式表示。它简明扼要、便于记忆和比较。如牛角椒2n=24=20m+2Sm（SAT)+2St(SAT)。D.2试剂
D.2.1Carnoy固定液：冰醋酸：无水乙醇=1：3（体积比）D.2.2改良苯酚品红：取3g碱性品红溶于10mL70%乙醇中，将其倒入90mL5%苯酚溶液中，再加人冰乙酸和甲醛各10mL，此为原液。取原液20mL加人45%冰乙酸80mL，再加人1g山梨醇，摇勺溶解即可。
D.3染色体制片方法
D.3.1样品萌发
选择籽粒饱满的可疑假高梁种子，清水洁净后去除颖壳，放入铺有双层滤纸、直径为90mm的培养Ⅲ内，每放5粒，加人6mL蒸馏水后置于30℃、湿度80%、光照强度为30001x的连续光照条件下培养。待种子根长至1cm左右，在上午8：00~10：00之间，切下长约0.5cm1.0cm的根尖，进行预处理。
D.3.2预处理
将材料切下依次放入以下溶液：1）0.05%~0.2%秋水仙碱水溶液中处理3h～4h；2）对二氯苯饱和水溶液中处理3h~4h；3）8-羟基奎啉0.002mol/L处理3h4h4）在0℃～3℃下冷冻处理24h
D.3.3固定
用Carnoy固定液固定3h～24h。固定后换人70%酒精中3℃~～8℃下保存。10
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