SN/T 3144-2011
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SN/T 3144-2011 出口动物源食品中抗球虫药物残留量检测方法 液相色谱-质谱质谱法
SN/T3144-2011
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标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准Wcnnzi.com
057SN85034
出口动物源食品中抗球虫药物残留量检测方法
液相色谱-质谱/质谱法
Deterinination of coceidiostat residues in foodstnffs of animal origin for export-LC-MS/MS method
20 11-09-09 发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2012-04-01实施
SN/T 31442011
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的资任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并口。本标雄起草華位,中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳大学本标准主要起草人:岳振峰、康海宁,肖陈贵、赵凤娟、陈小、沈金始,葛丽雅、叶刚、郑宗坤、商丽。
激脂糖通尿能素病
1范围
出口动物源食品中抗球虫药物残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法SN/T3144—2011
本标规定动物源食品中20种抗球虫药物残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法本标准适用于鸡肉、鸡肝、鸡蛋羟吡啶,氨丙琳、乙氧酰胺苯甲酯,紫、地克珠利、硝米特1种抗球鬼、中甲然三嗪酮、甲基三嗪酮、甲基2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是
件。凡是不注日期的引用文件,其6B/T6682分析实验室用才
3方法提要
采用乙睛提取试样中残留的
谱质谱/质谱检测和确证,外标法4试剂和材料
除另有说明外所用试剂均
4.1乙膀:高效液相色谱纯。
4.2甲醇:高效波相色谱纯。
4.3N,N.二甲基用酰胶:高效相色让4.4正已烷,
4.5甲酸:高效液相色纯。
乙酸铵:高效液相色谱纯。
盐霉素、莫能菌素、拉沙洛菌素、氯套琳、麥笔喹酯硝托胺、马杜霉肉、鸡浒,鸡蛋、牛肉、牛肝和牛奶药物残留量的测定:
日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文于本文件。
提敢被经胶壮净化,浓缩.液相色一级水。
4.7无水硫酸钠:优级纯,650℃灼烧4h.骨于下燥器中备用。4.80.005mo1/L乙酸袋水液(含0.05%弹酸>:雅确称取0.8854x乙酸铵(4.6).用水萍解洗转移至000mL容量瓶中,加人0.500ml.甲酸(4.5),用水定容至刻度线。4.9标推物质:抗球虫类药物标准品(具体信息见附录A)。4.10标准储备液的配制:分别准确称取经纯度折算后的量的每种标准物质,用甲醇(4.2)配制成剂度为100ng/1.的标准储备溶液难落于甲醇的标推品,先用N,N-甲基带既胺腰(4.3)溶解,再用甲醇稀释至刻度。该溶液应配制于棕色容量瓶中,18℃以下避光可保存12个月。4.11视合标准中间工作溶液的配制根括需要分别准确移取一定体积的每种标准储备液,用甲醇稀释成适当浓度的混合标准中间工作液。该溶液应配制于棕色容量瓶中,一18℃以下避光可保存6个月。1
品超有
SN/T 3144—2011
4.12崔胶固相萃瑕小柱:500m,6mL。磷胶柱使用前先加人约0.5cm高度的无水硫酸钠<4.7),用5mL乙腈活化,保持核休湿润
4.13微孔膜,0.22热m,有机相型,5仪器和设备
5.1液相色谱质谱/质谐仪:配有电喷雾离子源(ESI),5.2旋转蒸发浓缩仪
5.3超声波水浴。
5.4固相萃取装置。
5.5均质器。
5.6摊涡混均器,
5. 7 分析天平:感量 0. 1. ng和10. 01 g,5.8
移液器:10 μL~J00 μ1. 和 100 μL-1 000 μl-c5.9
聚丙烯离心管:50 mL,15 mL.2 ml.其塞。客量瓶:100 ml.1000mL。
鸡心瓶:300ml.。
离心机:转速可达1200cr/min,可设置离心温度低于10℃。试样制备与保存
注意事项
在糖样的操作过程中·应防止样品污染或发生残留物含量的变化6.2鸡肉、鸡肝、鸡蛋、牛肉、牛肝从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约500号,充分搅择混对,试荐装人精净容器中,密封,并标硼标记,于一18“℃以下冷冻存放。6.3牛奶
从所取全部样品中取出有代表性样品约500,接人活净容器中,密封,并标朗标记,于4它冷戏存放:
7分析步骤
7.1试样握取
7. 1. 1肌肉和肝脏
称取试样5多精至0.01),置于50 mL聚丙烯离心管中:根据样品含水量情况划人5g~10g无水硫酸钠,加人mL乙,均质3min,低温超声提取20in(温度低10℃).3000/n离心3min(蕴度低于10℃),取上清被。残盗再人15ml.Z睛,重复上述提取过程次,9500r/min离心5 min后合并上清液(温度低于 10 ℃),加人 10 mL乙睛饱和正己烷被液举取两次,弃去正己婉层,待净化。
iiKacaoiaiKAca
7.1.2鸡蛋、牛奶
SN/T 3144---2011
称取试样5g(精碗牵0.01g),于50mL聚两烯离心管中,加人15nl乙躺,旋涡振荡2min,低温超声提取20min(温度低于10C),3000r/min离心5min(湿度低于10℃),取上清液。残渣再加15mL乙腈:重复上述提取过程--次,9500r/min离心5min后(溢温度低于10℃)合并上清液,乙睛提鞭液中加人足量的无水硫酸钠以除去水分,加人10mL乙饱利正已烷液液萃取两次,弃宏正已烷层,待化。
7.2净化
将乙提取液转入群胶国相萃取小往(4.12),收集流出液,溶被全部通过柱体眉,再加人2m1.乙腊淋洗,合并流出液。将收集的流出液转修到100ml-鸡心瓶中,于40C水浴上减压旋转蒸发至近于,加人1mL乙腈,超声振荡30s,再加入1ml,0.005mol/L乙酸铵水溶被(含0.05%甲酸,1.8),混合匀,转移至2mL离心管中,12000r/min低温高速离心5min温度低于10℃),胶清液过0.22mm有机滤膜、液相色谱-质谱/质谱仪测定。7.3混合基质标准工作溶液的制备称取份5#空白试样(精确至0.01g)于50招1具密离心管中,根据所需要的工作曲线浓度分别加人相应体积的混合中间标准溶液,然后按7.1和?.2操作。7.4测定
液相色谱条件
色谱柱:AcjuityBEHCig色诺柱,50mm×2.1nm(内径),1.7μm,或相当者。7. 4. 1. 1
柱温:40℃,
7. 4. 1. 2
7. 4. 1. 3
进样量10u1
7. 4. 1. 4
流动相、流速及梯度洗脱条件见表1。表 1流动相,流速及梯度洗脱条件时间
质谱条件
7. 4. 2. 1
jel./enin
c.a05 mol/Lz酸铵水溶綫
(含0.05%甲酸)
离子化模式:电喷雾离子源(ESI),ESI稠ESI-两种模武初换扫播。甲醇
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7.4.2.2质谱扫播方式:多反应监测其他参考质谱条件参现附录 B。7.4.3液相色谱-质谱/质谱测定
7.4.3.1定性测定
在相同实验条件下,样品中待测塑质的保留时间,与基质标准落液的保留时间偏差在土2.5%之内:每种化合物的质谱定性离子牟少应包猜:个母离子和两个子离子:月样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质混合标谁工作溶被巾对应的定性离了的相对丰度进行比较,偏差不超过表2规定的范围,则再判定为样品中存在对应表2定
非刘离子丰度/粥
允许的最大偏差/%
7. 4,3.2定量测定
在仪器最伴工作条件下,对混合液浓度为横坐标绘制标准工作曲::....
纵坐标,混合基质标推工作溶
品游液中待测物的响应值均应
在仪器测定的线性范国内,用本方法检测确证存在的特测然物,建议采用其他定量方法进行测定。抗球虫药物标准溶液的多反应监测(MRM)复7.4.4空白试验
除不加标准外,按上述测定步
8结果计算和表述
按式(1)诈算试样中检测日标袋
武中:
#图您见团
试样中捡测目标化合物残留:单位为登克每于克(mng/kg);-由回栏出线计算得到的上机试样溶波中国标化合物含量,单位为整克每开(汀);样品溶液最终定容体积,单位为垒升(mL);最终样品溶被所代表的试样质基,单位为克(g)。m
9方法的测定低限和回收率
9.1测定低限
本方法的汇定低瑕:拉沙洛菌素为0.005m1名/kg;盐索,莫能菌索、氯羟吡啶、氨丙啉,常山酮,甲芋噬嘛和癸氧唑酯均为 0.0l.mg/kg:甲基盐霉素、乙筑酰胺举甲酯均为 0. 02 mg/kg;马杜霉素、4,4-二硝燕均二萃豚(尼卡巴嗪残留标示物)地克殊利,克拉珠利,甲基三嗪酮,甲基三嗪期酮,甲基三嗪开亚4
irKacadaiKAca
砜、二硝托胺、硝米特、阿克落胺均为0.05mg/kg9.2回收率
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在三个添加水平下,鸡肉、鸡肝、鸡蛋、牛肉、牛肝和牛奶中抗球虫药物的回收率数据参见附录D。5
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中交名称
盐馨素
甲基盐霉蒙
爽能菌索
拉沙洛菌索
马杜霉索
氮羟吡啶
常山菊
乙氧苯甲
1,-三基均二苯程
(虑卡巴嗪残留标示物)
地克珠利
克拢殊利
甲基兰嗪
邦基兰综酮亚矾
甲基三嗪酮霸
二梢托胺
硝米特
阿克洛殿
附录A
(规范性附录)
标准品信息
表A,
标准品信亲
英文名称
Ealinomycin
Narasin
Manensin
Lasaloeid
Maduramicin &mmoniam
Clopidoi
Amproliun
Halofuginone
Nequinate
Deroquinate
Ethopabate
4.n'-Dinitrocarbenilide
Diclazuril
Clazuril
Toltrazuri
Toltrazuril sultoxide
Toltrazuril sulfone
Zaalene
Nitemide
Aklozide
irKacaaiKAca
CAS编号
53003-10-4
55132-13-9
17650-79-R
25999-31-9
84878-61-5
2971-90-6
121-25-5
55837-20-2
13997-19-8
18507-89-6
1959-6-3
587-90-6
101831-37-2
101833-36-1
69004-03-1
690G4-15-5
69004-01-2
158-01-6
121-8B1-3
3011·89-0
附录B
(资料性附录)
参考质谱条件
电哦雾电压:3000V.
辅助气流速:700L/小。
碰撞气:氩气。
幕游气流速:50L/m
离子源温度:105℃。
辅气溢度:350℃
定性离子对、定量离子对、采集时间、锥孔电乐及碰撞能见表B.1。抗球虫药物测定的质谱参数
电离模式
化合物名称
盐缩案
甲基盐霉素
草能菌
拉沙洛菌索
马杜鹤
氯轻既啶
常山酮
单喉嘛
爱氧哇酯
密考保留时间
773431
773>265
787431#
7872~531
693161*
893>449
513>377 *
613>959
9407878*
940>896
192101×
192>87
243≥150 *
416188
116398
365331*
356201
438204 *
418372
采集时间
萧孔电压
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1)非商业性声明:附录B所列参考质谱条件是在WatersQirattroPremiet型液质联用仪上完成的,此处列出试验用仪器型号仅为提供参考、并不涉及商业目伪,鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器7
品a品
就通器品佳
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化合名称
电离模式
乙.氧酰胺萃甲醋
4.4-二础基
均二举滕(尼卡
巴嗪残留标示物)
地克珠利
克拉珠利
卵基三嗪酮
甲基三葡碱
中草三嗪酮很
二硝托腰
硝米籽
阿克落胺
参考保開时间
注:为定最离子,对于不同质谱仪B.8质谱分段采集时间:0 min
6.8min8.5 minFST-,7.0m
表B1(续)
蓝斑离子
236192+
236208
501-137*
302>107
405334
参数可:
采樂时间
催孔鹿压
略质诺参数优化到最准:
iiKacaoiaiKAca
.5.Ymin--e.8rmin ESI-+-
243150
1. 205-+ (
1丙啉
416198
7.1180+004
o- rsin
8. 517+004
7.5010.00
15)奠能菌察
940R76
6. 591e+005
7.5010.00
19)马杜霉索
2.158±+004
25)二硝托胺
371>265
rrimin
7. 00 8. 00
31克热利
243>94
3. 899e 1.003
2)氨丙溅
416>398
6.385+004
053>475
F. YH2e 04
7. 50 J0. 00
11)英能菌素
5. 408+004
7. Kh 10. 00
20)马杜器素
236>12
2.654 : 005
山nin
26)乙醛
胺萃甲
405>334
4. 492-- 00M
32>跑克球利
附康C
(资料性附象)
多反应监测色谱图
a, on9e + o86
27)乙就醉
3. 809e+04
33)地克课利
192>87
223销
GEmMa rmin
7. 00 R.O
2834,4'-硝
均二华
429 424
4.397c1004
7. 00 B. 00
34基兰此内容来自标准下载网
7. 50 10. D0
2.46e+004
7. 50 10. 00
1拉菌素
787>491
3.070e+005
mtimin
7. 50 10. ()
甲基盐彝素
9. 0130 +003
23)酷米特
1.28:e+104
基均:举豚
6. 43n0(4
上hnin
7. 00 8. 00
SN/T 3144—2011
386201
2. 105e+004
7. 50 10, 00
5)甲萨噻
613>359
6.240+003
m. Timain
7.5010.00
12)拉沙洛蘭索
7H7>551
2. 178e-005
7. 50 10. 00
18>甲基盐率
224181
5.422:+004
24)二硝托胺
371>300
9. 830:+000
7.00 8.00
30)克拉殊利
46>456
5.R23e:1-001
35)甲茶三嗪醒亚矾,
36)甲苯三嗪醚期
抗球虫标准溶液的多反应监测色谱图:.w..
SN/T 3144—2011
化合物名称
盐蛋素
甲基盐素
莫能國浆
拉莎落酋素
马杜霉索
氯羟吡
薇内味
黄山部
芋唑味
附录D
(资料性附录)
回收率数据
鸡肉、鸡肝、鸡蛋中抗球虫药物不同添加水平回收率数据裘1
恭加水子
回收范围
添加水平
添加水孚
80.0--108
F5.8~1C1
84.0~-106
90.3--106
$2.0--104
80.3~-9.0
%1,0~~105
85.5--102
80.5~-97.0
77.0--100
80.4~-106
81.5--102
83. 0~1c4
73.8~11C:
80,~36
79.2~-104
82.0~-103
E5,G~100
80.8--110
93,0~-110
85. 6 ~-09, 0
86.5~-101
R4. 6--105
50. 5~~109
6.5---110
88,8--106
83.0---109
8C.7--108
60.3~-107
,030
81. 3--98. 0
80. 2 -- 58.2
80.3--108
76. 0~171
80.5---108
80, 7~101
84, 5--- 104
80.8--108
73. $~-107
61, 0~110
80, 7 -~ 10-1
80,0---111
83. 0~-106
81. 5-- 100
iiKacaoiaikAca
回收率范围
81.0--96.0
82. 5~-84, 2
80.5--110
82. 0--94. 2
81,0~.106
81.0~-109
84. 0~157
$1, 0-102
84. 0--102
83. 0--110
B1.2.~97. 2
84.5--1c?
82. 3-99.3
82, k~~3%. 1
83, 0--92. 2
75. 6--56,2
80.0--106
82,3.~108
$0.2--152
名1. 0~-110
hakiuash
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