SN/T 4426-2016
基本信息
标准号： SN/T 4426-2016
中文名称：出口食品加工卫生表面取样技术方法
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
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出版信息
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标准简介
SN/T 4426-2016 出口食品加工卫生表面取样技术方法
SN/T4426-2016
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标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4426—2016
出口食品加工卫生表面取样技术方法Methods for sampling technigues from surfaces in the food Industry for export(ISO 18593:2004,Microbiology of food and animal fcedingstuffsHorizontalmethodsforsamplingtechniquesfromsurfaces using contact plates and swabs,MOD)2016-03-09发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2016-10-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T4426—2016
本标准由中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检疫局负责起草
本标准主要起草人：郑晶、郑麟毅、陈舒奕、陈俊玉、雷质文、吴文凡、黄菁菁、陈彬、林杰、黄晓蓉1范围
出口食品加工卫生表面取样技术方法SN/T4426-—2016
本标准规定了使用接触板或拭子对食品工业坏境（和食品加工车间）的表面取样技术方法。本标准适用于食品及食品原料生产环境的卫生表面取样。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可口
是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定SN/T0330出口食品微生物学检验通则3取样说明
3.1由于本方法并非可靠定量及不可仪村
培养后，根据生长菌落的计数结果评3.2将含有适当琼脂培养基的接触板（或玻片）紧贴于测试表面估表面的污染程度。
3.3使用拭子方法，应先标记（如采被检测区域的指定表面后再擦拭。擦拭后折断拭了柄，将用模板）
子中，用手摇勾。
拭了放入含有灭菌稀释液或中和液的试管或瓶子擦拭，取样后应储存于定量的稀释液中（如如果表面采用灭菌的湿润布料或海绵100mL稀释液用于100cm
的取样面积）
文生物计数标准描述的步骤对微生物进行计数，必要时原液可进一步3.4在实验室，将原液按相关微
生物的类型而定。
10倍稀释。培养时间和温度依据被测微3.5使用选择性培养基时，应进行相应的确证试验。通过计算确认菌的数量，得出每平方厘米或每个拭子标菌的菌落形成单位。
3.6取样之后，必要时对表面进行清洁和消毒，清除取样过程中在取样表面残留的营养物质的痕迹。4中和液
更多相关信息见目标微生物检测或计数相关国家标准预计有消毒剂残留的情况时.稀释液和接触板培养基中应加人适当的中和剂来消除消毒剂对微生物生长的抑制效果。
中和液的基础一般为缓冲蛋白陈水、盐陈或其他适当的稀释液（如四分之一浓度林格氏液、pH7.5磷酸盐缓冲液、1g/1.蛋白陈溶液）。5仪器设备和玻璃器血
5.1总则
仪器设备和玻璃器皿般要求见SV/T0330。如果有相同规格的一次性用品，可允许替代重复使1
SN/T4426—2016
用的玻璃器血。
5.2接触板
用于表面采样直径65mm塑料碟，含有定量琼脂培养基（根据日标微生物来选择），琼脂在接触板上应形成半月形凸起状。根据采样表面的种类，使用不同直径或面积的接触板。注：可使用其他任何能接触到取样表面的设备（含有培养基的活动或固定容器），如玻片（5.3）。5.3玻片
合成玻片（7.cm2~10cm）单面或双面覆盖一层生长培养基（根据目标微生物而定）5.4拭子
装在试管或封套中，带棉花或合成材料（如藻酸盐或人造纤维）的拭子，柄易于折断。拭子应采用独立灭菌包装。所用材料应证实不含抑菌物质。注：对于某些类型的表面，取样后残留的棉絮会污染这些表面的内部零件。5.5布料
湿润、灭菌的编织材料，不含抗菌物质，独立包装丁灭菌塑料袋中，用于大面积表面取样(≥100cm）。
5.6海绵
湿润、火菌、平整的方形海绵，不含抗菌物质，独立包装于灭菌塑料袋中，用于大面积表面取样（≥100cm2）。
5.7容器
如瓶子、试管或烧瓶，适用于灭菌和储存培养基、稀释液、中和剂等。5.8冰盒
具隔热性，在样品运输至实验室途中能使样品保持低温。5.9，刻度吸管
广口吸管，标称容量1mL，分度值0.1ml，或100μL~1000=L可调移液器5.10混匀器
用于混合试管中的液体。
5.11蠕动式均质器或平摇式均质器以蠕动（蠕动式均质器）或振动（平摇式均质器）方式.用无菌塑料袋制备初始悬浊液。5.12培养血
直径65mm塑料培养血。
5.13pH计
读数0.01pH单位，在25℃土1℃时测量精度达到±0.1pH单位。2
5.14模板
SN/T4426—2016
由耐腐蚀材料制成（如一块中空面积为20cm～100cm2的不锈钢薄片），易于清洁和灭菌。6取样方法
6.1总则
实验室接收的样品应为表面的典型测试样，运输和储存过程中不得被更换，不含有消毒剂残留。消毒剂通常按接触消毒时间为5min～15nin的效果进行配制。根据消毒规范，在用子或接触板评估消毒清洁程序的效果前，等待一段时间。由于消毒剂种类繁多，没有一种中和剂能够中和所有种类的消毒剂，不同类型消毒剂可用相应的中和剂进行中和。一般情况下，山梨糖醇酐单油酸酯溶液和卵磷脂溶液可用于中和残留的消毒剂（如季铵化合物、两性霉素）。硫代硫酸钠溶液可用于中和含卤素基团的消毒剂。过氧化氢酶可用于中和含过氧化氢的消毒剂。
大部分情况下，可按表1中成分配制中和剂。配制蛋白陈（1g/L）溶液或氯化钠（8.5g/L）溶液，121℃灭菌15min，作为中和剂的溶剂。表1大部分情况下可用的中和剂
山梨糖醇酐单油酸酯
卵磷脂
硫代硫酸钠
L-组氮酸
皂角苷
6.2接触板法
接触板或玻片从运输容器中取出后，将带有琼脂的一面稳固的按压于测试表面，避免发生位移。在接触时问10s，压力相当于500g的情况下效果最佳。接种完毕后立即收好接触板或玻片，放回运输容器中。
6.3拭子或布料/海绵法
6.3.1拭子法
去除无菌包装后，将拭子末端浸人含稀释液的试管，在试管壁上挤压拭子末端以去除多余水分。拭子未端在待测表面20cm~100cm面积内快速移动.同时用拇指和食指按正确角度来回旋转拭子。将拭子放人含有稀释液的试管，并用无菌方式将柄剪断。6.3.2布料/海绵法
打开装有布料或海绵的塑料袋或容器，用灭菌手术钳或带有灭菌手套的手取出布料或海绵，用稀释液充分湿润。在潮湿表面取样，则不必进行上述步骤。从两个相互垂直方向对选择的表面进行取样，布料或海绵的每个面采用一个方向。取样后将布料或海绵放人灭菌容器中，加人稀释液并盖好，保证布料或海绵保持湿润。3
SN/T4426—2016
6.3.3指定微生物的定性检测
如果取样用于指定微生物（如单核增生李斯特氏菌或金英色葡萄球菌）的定性检测，则取样面积应为1000cm2。若因取样表面总面积限制，则取样面积最少不小于100cm\。取样后将拭子、布料或海绵放人相应增菌肉汤中混勾。
7样品运输
拭子法取样的样品应放在1℃～4℃冰盒内：4h内送达实验室。实验室应在第一时间按第8章进行检测，不得拖延超过24h。
接触板或玻片用确保无污染方式，4h内送达实验室。8检验程序
8.1接触板法
将接触板于36℃±1℃培养48h±2h。8.2拭子法（含布料/海绵法）
8.2.1平板法
用混勾器将含有拭子的试管完全混匀30s，调节混匀速度使试管中液面高出原液面底部2cm~3cm。
塑料袋中加入一定量稀释液或中和液（如每100cm加入根据擦拭面积，在装有布料或海绵的100ml.稀释液或中和液），用动式均质客处理1min，或用平摇式均质器振荡30，制成原液。若擦拭好的布料或海绵是置于灭菌容器中，则在容器中加人不泄漏的条件下混匀30s。
定量的稀释液或中和液，盖紧容器，在保证液体如果预计微生物数量较多，可按6B4789.2中的10倍梯度稀释步骤，用蛋白陈水对原液进一步10倍稀释至可计数浓度。
根据选择计数方法，取1mL原液加入培养用于平板倾注计数，或取0.1mL加入含计数培养基的培养血进行涂布。每个稀释度均按此法操作，每个稀释度做两个平行，在琼脂表面干燥前保持平皿处于水平位置。待琼脂表面干燥后，翻转培养Ⅲ,36℃±1℃培养48h土2h。也用滴板法替代上述平板法。
8.2.2滴板法
从最高浓度开始，用无菌吸管吸取0.05mL整数倍的原液或稀释液（拭子、布料或海绵法）加人含有培养基且底部已做好标记的平血并涂布，每个稀释度做两个平行，在琼脂表面干燥前保持平血处于水平位置。待琼脂表面干燥后，翻转培养血，36℃士1℃培养48h士2h。8.2.3指定微生物的定性检测
按照相应检测标准的程序对原液进行增菌、分离培养和鉴定。4
菌落计数和检测
接触板法
SN/T4426—2016
培养时间结束后计数触板或玻片上的典型菌落，必要时对目标微生物进行确认。8.3.2拭子法（含布料/海绵法）计数每个平板上的菌落，必要时对日标微生物进行确认。8.3.3滴板法
选取平板上菌落数在5～50的稀释度进行计数9结果计算和表达
9.1接触板法
根据接触板面积和菌落数，计算每平方厘米（cm）的菌落数。9.2拭子法（含布料/海绵法）
9.2.1参照有关标准计算每毫升（mL）原液的菌落数N9.2.2按式（1)计算被测表面每平方厘米式中：
的康浴
-1mL稀释液（或中和液）中的菌落数；XD
试管或均质袋中含有稀释液（或中和液）的量，单位为毫升（mL）；表面取样面积，单位为
可平方厘
米(cm
计数所用稀释度的倒数
9.2.3若用滴板法，按式（2）计算每mL悬浊液中所含的菌落数NVn
式中：
所选择的两个稀释度的菌落数总和，其中一个稀释度菌落数至少为5；每滴接种液体的量（本方达情况下为0.05mL）；第一稀释度的液滴数；
第二稀释度的液滴数；
第一稀释度的稀释因子。
按式（3）计算每平方厘米（cm）的菌落数Ns：Ns
式中：
每毫升原液中所含的菌落数；
试管或均质袋中含有稀释液（或中和液）的量，单位为毫升（ml.）；擦拭取样面积，单位为平方厘米（cm）。·（1）)
·（2）
·（3)
SN/T4426—2016
如果擦拭区域未明确规定，按式（4)计算每个拭子的菌落数NswNsw=NXFXD
式中：
每毫升原液中所含的菌落数；
试管或均质袋中含有稀释液（或中和液）的量，单位为毫升（mL）；-计数所用稀释度的倒数。
结果报告www.bzxz.net
根据计算结果，以CFU/cm2为单位报告测试表面的菌落数。当擦拭区域面积不明确时，结果可以CFU/拭子为单位来进行报告。（4)
，当对指定微生物进行定性检测时，结果报告擦拭区域目标微生物是否检出，如果区域未知，则以10.3
每个拭子为单位报告结果。
10.4由于接触板法和拭子/布料法得出的结果不同.在报告中应说明采用何种方法6
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出口食品加工卫生表面取样技术方法Methods for sampling technigues from surfaces in the food Industry for export(ISO 18593:2004,Microbiology of food and animal fcedingstuffsHorizontalmethodsforsamplingtechniquesfromsurfaces using contact plates and swabs,MOD)2016-03-09发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2016-10-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T4426—2016
本标准由中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检疫局负责起草
本标准主要起草人：郑晶、郑麟毅、陈舒奕、陈俊玉、雷质文、吴文凡、黄菁菁、陈彬、林杰、黄晓蓉1范围
出口食品加工卫生表面取样技术方法SN/T4426-—2016
本标准规定了使用接触板或拭子对食品工业坏境（和食品加工车间）的表面取样技术方法。本标准适用于食品及食品原料生产环境的卫生表面取样。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可口
是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定SN/T0330出口食品微生物学检验通则3取样说明
3.1由于本方法并非可靠定量及不可仪村
培养后，根据生长菌落的计数结果评3.2将含有适当琼脂培养基的接触板（或玻片）紧贴于测试表面估表面的污染程度。
3.3使用拭子方法，应先标记（如采被检测区域的指定表面后再擦拭。擦拭后折断拭了柄，将用模板）
子中，用手摇勾。
拭了放入含有灭菌稀释液或中和液的试管或瓶子擦拭，取样后应储存于定量的稀释液中（如如果表面采用灭菌的湿润布料或海绵100mL稀释液用于100cm
的取样面积）
文生物计数标准描述的步骤对微生物进行计数，必要时原液可进一步3.4在实验室，将原液按相关微
生物的类型而定。
10倍稀释。培养时间和温度依据被测微3.5使用选择性培养基时，应进行相应的确证试验。通过计算确认菌的数量，得出每平方厘米或每个拭子标菌的菌落形成单位。
3.6取样之后，必要时对表面进行清洁和消毒，清除取样过程中在取样表面残留的营养物质的痕迹。4中和液
更多相关信息见目标微生物检测或计数相关国家标准预计有消毒剂残留的情况时.稀释液和接触板培养基中应加人适当的中和剂来消除消毒剂对微生物生长的抑制效果。
中和液的基础一般为缓冲蛋白陈水、盐陈或其他适当的稀释液（如四分之一浓度林格氏液、pH7.5磷酸盐缓冲液、1g/1.蛋白陈溶液）。5仪器设备和玻璃器血
5.1总则
仪器设备和玻璃器皿般要求见SV/T0330。如果有相同规格的一次性用品，可允许替代重复使1
SN/T4426—2016
用的玻璃器血。
5.2接触板
用于表面采样直径65mm塑料碟，含有定量琼脂培养基（根据日标微生物来选择），琼脂在接触板上应形成半月形凸起状。根据采样表面的种类，使用不同直径或面积的接触板。注：可使用其他任何能接触到取样表面的设备（含有培养基的活动或固定容器），如玻片（5.3）。5.3玻片
合成玻片（7.cm2~10cm）单面或双面覆盖一层生长培养基（根据目标微生物而定）5.4拭子
装在试管或封套中，带棉花或合成材料（如藻酸盐或人造纤维）的拭子，柄易于折断。拭子应采用独立灭菌包装。所用材料应证实不含抑菌物质。注：对于某些类型的表面，取样后残留的棉絮会污染这些表面的内部零件。5.5布料
湿润、灭菌的编织材料，不含抗菌物质，独立包装丁灭菌塑料袋中，用于大面积表面取样(≥100cm）。
5.6海绵
湿润、火菌、平整的方形海绵，不含抗菌物质，独立包装于灭菌塑料袋中，用于大面积表面取样（≥100cm2）。
5.7容器
如瓶子、试管或烧瓶，适用于灭菌和储存培养基、稀释液、中和剂等。5.8冰盒
具隔热性，在样品运输至实验室途中能使样品保持低温。5.9，刻度吸管
广口吸管，标称容量1mL，分度值0.1ml，或100μL~1000=L可调移液器5.10混匀器
用于混合试管中的液体。
5.11蠕动式均质器或平摇式均质器以蠕动（蠕动式均质器）或振动（平摇式均质器）方式.用无菌塑料袋制备初始悬浊液。5.12培养血
直径65mm塑料培养血。
5.13pH计
读数0.01pH单位，在25℃土1℃时测量精度达到±0.1pH单位。2
5.14模板
SN/T4426—2016
由耐腐蚀材料制成（如一块中空面积为20cm～100cm2的不锈钢薄片），易于清洁和灭菌。6取样方法
6.1总则
实验室接收的样品应为表面的典型测试样，运输和储存过程中不得被更换，不含有消毒剂残留。消毒剂通常按接触消毒时间为5min～15nin的效果进行配制。根据消毒规范，在用子或接触板评估消毒清洁程序的效果前，等待一段时间。由于消毒剂种类繁多，没有一种中和剂能够中和所有种类的消毒剂，不同类型消毒剂可用相应的中和剂进行中和。一般情况下，山梨糖醇酐单油酸酯溶液和卵磷脂溶液可用于中和残留的消毒剂（如季铵化合物、两性霉素）。硫代硫酸钠溶液可用于中和含卤素基团的消毒剂。过氧化氢酶可用于中和含过氧化氢的消毒剂。
大部分情况下，可按表1中成分配制中和剂。配制蛋白陈（1g/L）溶液或氯化钠（8.5g/L）溶液，121℃灭菌15min，作为中和剂的溶剂。表1大部分情况下可用的中和剂
山梨糖醇酐单油酸酯
卵磷脂
硫代硫酸钠
L-组氮酸
皂角苷
6.2接触板法
接触板或玻片从运输容器中取出后，将带有琼脂的一面稳固的按压于测试表面，避免发生位移。在接触时问10s，压力相当于500g的情况下效果最佳。接种完毕后立即收好接触板或玻片，放回运输容器中。
6.3拭子或布料/海绵法
6.3.1拭子法
去除无菌包装后，将拭子末端浸人含稀释液的试管，在试管壁上挤压拭子末端以去除多余水分。拭子未端在待测表面20cm~100cm面积内快速移动.同时用拇指和食指按正确角度来回旋转拭子。将拭子放人含有稀释液的试管，并用无菌方式将柄剪断。6.3.2布料/海绵法
打开装有布料或海绵的塑料袋或容器，用灭菌手术钳或带有灭菌手套的手取出布料或海绵，用稀释液充分湿润。在潮湿表面取样，则不必进行上述步骤。从两个相互垂直方向对选择的表面进行取样，布料或海绵的每个面采用一个方向。取样后将布料或海绵放人灭菌容器中，加人稀释液并盖好，保证布料或海绵保持湿润。3
SN/T4426—2016
6.3.3指定微生物的定性检测
如果取样用于指定微生物（如单核增生李斯特氏菌或金英色葡萄球菌）的定性检测，则取样面积应为1000cm2。若因取样表面总面积限制，则取样面积最少不小于100cm\。取样后将拭子、布料或海绵放人相应增菌肉汤中混勾。
7样品运输
拭子法取样的样品应放在1℃～4℃冰盒内：4h内送达实验室。实验室应在第一时间按第8章进行检测，不得拖延超过24h。
接触板或玻片用确保无污染方式，4h内送达实验室。8检验程序
8.1接触板法
将接触板于36℃±1℃培养48h±2h。8.2拭子法（含布料/海绵法）
8.2.1平板法
用混勾器将含有拭子的试管完全混匀30s，调节混匀速度使试管中液面高出原液面底部2cm~3cm。
塑料袋中加入一定量稀释液或中和液（如每100cm加入根据擦拭面积，在装有布料或海绵的100ml.稀释液或中和液），用动式均质客处理1min，或用平摇式均质器振荡30，制成原液。若擦拭好的布料或海绵是置于灭菌容器中，则在容器中加人不泄漏的条件下混匀30s。
定量的稀释液或中和液，盖紧容器，在保证液体如果预计微生物数量较多，可按6B4789.2中的10倍梯度稀释步骤，用蛋白陈水对原液进一步10倍稀释至可计数浓度。
根据选择计数方法，取1mL原液加入培养用于平板倾注计数，或取0.1mL加入含计数培养基的培养血进行涂布。每个稀释度均按此法操作，每个稀释度做两个平行，在琼脂表面干燥前保持平皿处于水平位置。待琼脂表面干燥后，翻转培养Ⅲ,36℃±1℃培养48h土2h。也用滴板法替代上述平板法。
8.2.2滴板法
从最高浓度开始，用无菌吸管吸取0.05mL整数倍的原液或稀释液（拭子、布料或海绵法）加人含有培养基且底部已做好标记的平血并涂布，每个稀释度做两个平行，在琼脂表面干燥前保持平血处于水平位置。待琼脂表面干燥后，翻转培养血，36℃士1℃培养48h士2h。8.2.3指定微生物的定性检测
按照相应检测标准的程序对原液进行增菌、分离培养和鉴定。4
菌落计数和检测
接触板法
SN/T4426—2016
培养时间结束后计数触板或玻片上的典型菌落，必要时对目标微生物进行确认。8.3.2拭子法（含布料/海绵法）计数每个平板上的菌落，必要时对日标微生物进行确认。8.3.3滴板法
选取平板上菌落数在5～50的稀释度进行计数9结果计算和表达
9.1接触板法
根据接触板面积和菌落数，计算每平方厘米（cm）的菌落数。9.2拭子法（含布料/海绵法）
9.2.1参照有关标准计算每毫升（mL）原液的菌落数N9.2.2按式（1)计算被测表面每平方厘米式中：
的康浴
-1mL稀释液（或中和液）中的菌落数；XD
试管或均质袋中含有稀释液（或中和液）的量，单位为毫升（mL）；表面取样面积，单位为
可平方厘
米(cm
计数所用稀释度的倒数
9.2.3若用滴板法，按式（2）计算每mL悬浊液中所含的菌落数NVn
式中：
所选择的两个稀释度的菌落数总和，其中一个稀释度菌落数至少为5；每滴接种液体的量（本方达情况下为0.05mL）；第一稀释度的液滴数；
第二稀释度的液滴数；
第一稀释度的稀释因子。
按式（3）计算每平方厘米（cm）的菌落数Ns：Ns
式中：
每毫升原液中所含的菌落数；
试管或均质袋中含有稀释液（或中和液）的量，单位为毫升（ml.）；擦拭取样面积，单位为平方厘米（cm）。·（1）)
·（2）
·（3)
SN/T4426—2016
如果擦拭区域未明确规定，按式（4)计算每个拭子的菌落数NswNsw=NXFXD
式中：
每毫升原液中所含的菌落数；
试管或均质袋中含有稀释液（或中和液）的量，单位为毫升（mL）；-计数所用稀释度的倒数。
结果报告www.bzxz.net
根据计算结果，以CFU/cm2为单位报告测试表面的菌落数。当擦拭区域面积不明确时，结果可以CFU/拭子为单位来进行报告。（4)
，当对指定微生物进行定性检测时，结果报告擦拭区域目标微生物是否检出，如果区域未知，则以10.3
每个拭子为单位报告结果。
10.4由于接触板法和拭子/布料法得出的结果不同.在报告中应说明采用何种方法6
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