SN∕T 4546-2017
基本信息
标准号： SN∕T 4546-2017
中文名称： 商品化试剂盒检测方法 金黄色葡萄球菌 方法一
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
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标准简介
SN∕T 4546-2017 商品化试剂盒检测方法 金黄色葡萄球菌 方法一
SN∕T4546-2017
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标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4546—2017
代替SN/T1895—2007
商品化试剂盒检测方法
金黄色葡萄球菌
方法一
Commercial kit method-Sta phylococcus aureus--Test method I2017-05-12发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-12-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。SN/T4546-—2017
本标准代替SN/T1895：2007食品中金黄色葡萄球菌的快速计数法PetrifilmTM测试片法》。与SN/T18952007相比，除编辑性修改外主要技术变化如下：.-修改了标准的中英文名称；
修改了附录A：
一增加了计算公式；
-增加了附录B;
除了第二法PetrifilmT测试片MPN法。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫、中国检验检疫科学研究院、大连启元科技发展有限公司。
本标推主要起草人：蒋丹、刘淑艳、孙晓飞、丁健、万超、赵红阳、吴斌，林长军、卢行安、周振亚。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SNV/T1895—2007。
1范围
商品化试剂盒检测方法
金黄色葡萄球菌方法一
SN/T4546—2017
本标准规定厂食品中金黄色葡萄球菌检验测试片（PetrifilmTMStuphytocorcusaureusCountPlate）的检测方法。
本标准适用于出口食品和源料中金黄色葡莹球菌的计数2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB19489实验室生物安全通用要求3生物安全措施
为了保护实验室人员的安全和防止污染，应由具备资格的工作人贯检测。所有培养物和废弃物的处理应按照GB19489有关规定执行。4技术概要
金黄色葡萄球菌测试片法是用一种预先制备的含有指示剂及冷水可溶性凝胶的培养基系统进行微生物培养的方法。
金黄色葡萄球菌测试片STx（StaphExpress CountPlate）含有具有显色功能并经改良的BairdParker培养基，对金黄色葡萄球菌具有很强的选择性。测试片上的紫红色菌落为金黄色葡菊球菌。若出现除紫红色以外的其他颜色，则必须便用含有显色剂和脱氧核糖核酸（DNA）的确认反应片。金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶(DNase)会和反应片中的显色剂形成粉红色幕圈。5设备和材料
除微生物实验室常规火菌及培养设备外，其他设备和材料如下，5.1
恒温培养箱：36℃±1℃。
5.2电子大平：感量0.1g。
均质器(旋刀式或拍击式)或等效的设备。5.3
5.4pH计或精密 nH试纸：精密度 0.1。5.5
移液管：lml（具0.01mL刻度）,10mL(具0.1ml刻度）或移液器及吸头。测试片压板。
放大镜或/和菌落计数器。
SN/T 4546—2017
6培养基和试剂
无菌生理盐水：见附录A的A.1。6.1
6.2磷酸盐缓冲液：见附录A的A.2。6.31mol/LNaOH.见附录A的A.3。6.41mol/LHCl见附录A的A.4。
6.5金黄色葡萄球菌测试片和金黄色葡萄球菌确认反应片。本标准使用的试剂盒由3M公司生产，参考SN/T2775—2011和SN/T3266-2012由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会组织评价。具体评价结果参见附录B。试剂盒储存于2℃～8℃,有效期18个月。7检测程序
检测程序见图！。
25 g(mL) + 225 ml生理盐水
1 mL按种睡，检样勾截加入避试片36℃±1℃
无激落
24 h± 2 h
紫红色菌落
计数金货色葡萄球菌菌落
其他颜色的菊落
在测试片中置入确认反应片
36江i第养1h--3h
36C+1t1h~3h
计氯有粉红色晕的菌落为
金黄色葡萄球菌
图1冷水可溶性金黄色葡萄球菌凝胶测试片快速计数法检测程序8操作步骤
8.1样品制备
SN/T 4546—2017
8.1.1固体和半固体样品：称取25样品置盛有225ml.磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯中，8(00)r/min~l0000r/min均质1i~-2min，或放入盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min~~2min，制成1：10的样品勾液。8.1.2液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225ml.磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混勾，制成1：10的样品匀液。样品勾液的pH值应为6.5~7.5,pH值过低或过高时可分别采用1mol/1.NaOH调节或1mol/lHCl予以调节。如为冷冻产品，应在45℃以下不超过15min，或2℃～5℃不超过18h解冻。8.1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取110样品匀液！ml,沿管壁缓缓注入9ml.磷酸盐缀冲液或生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振试管，使其混合均匀、制成1100的样品匀液，
8.1.4按8.1.3操作程序，依次制成10倍递增系列稀释样品匀液，每递增稀释1次，换用1支1mL无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min，B.2样品匀液的接种和培养
8.2.1根据对样品的污染状况的估计及相关限量要求，选取2个～3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种2张测试片。同时，分别吸取1mL磷酸盐缓冲液或生理盐水加人两张测试片内作为空向对照。8.2.2接种：将金黄色葡球菌测试片置于平划实验台面，揭开上层膜，用吸管吸取1ml样品勾液垂直滴加在测试片的中央，将上层膜缓慢盖下，避免气泡产生和上层膜直接落下，把压饭（平面底朝下）放置在上层膜中央，轻轻地压下，使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上。拿起压板，静置至少1min以使培养基凝固
8.2.3培养：将测试片的透明面朝上，水平置于培养箱内，堆叠片数不超过20片，在36士1℃条件下培养24h=2 h.
8.2.4确认反应：如果上述测试片上没有菌落生长或菌落全部是紫红色（典型的金黄色葡萄球菌特征），无需进行确认：如果测试片上出现黑色、蓝绿色菌落或紫红色菌落不明显，需使用确认反应片作逊一步确认。
将上层膜掀起，将确认反应片置人测试片的培养范围内，再将上层膜放下覆盖在确认反应片土，用手指以滑动的方式轻轻将测试片与确认反应片压紧，包括确认反应片的边缘，此步骤可使测试片与确认反应片密接触并除去气泡，最后把插人确认反应片的测试片放在36℃土1℃的培养箱内培养1h～3h
9结果计算与报告
9.1判读
9.1.1可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的金黄色葡萄球菌菌落数量。菌落计数以菌落形战单位（colony-lotingunits，CFU）表示。9.1.2在金黄色葡萄球菌测试片上，紫红色的菌落自接计数为金黄色葡萄球菌：需要使用确认反应片作确认时，计数有粉红色晕圈的菌落。没有粉红色晕圈的菌落不是金黄色葡萄球菌.不应被计数。如果3
SN/T4546-2017
整个培养面积呈粉红色面没有明显的晕圈，说明金黄色葡萄球菌大量存在，结果记录为“多不可计”。培养圆形面积边缘上及边缘以外的菌落不作计数。9.2菌落计数与报告
9.2.1选取菌落数在15CFU~150CFU之间的测试片计数金黄色葡球菌菌落总数。低于15CFU的测试片记录具体菌落数，大于150CFU的记录为多不可计。每个稀释度的金黄色葡萄球菌菌落数应采用两个测试片的平均数。
9.2.2若只有一个稀释度的测试片的菌落数在适宜计数范围内，计算两个测试片金黄色葡萄球菌菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每克（或每毫升）样品中金黄色葡萄球菌菌落总数结果。
9.2.3若有两个连续稀释度的测试片菌落数在适宜计数范围内，按式（1）计算。N-Za/(n+oing)d
式中：
样品中金黄色葡萄球菌总数
Z一测试片（含适宜范围菌落数的平板）金黄色葡葡球菌菌落数之和第，稀释度（低稀释倍数)测试片个数：ng
第二稀释度（高稀释倍数）测试片个数：稀释因子(第一稀释度)
9.2.4若所有稀释度测试片上的菌落数都小干15CFU，则应按稀释度最低的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
9.2.5若所有稀释度（包括液体样品原液）的测试片上均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。
9.2.6若所有稀释度的测试片菌落数均不在15CFU～150CFU之间，其中一部分小于15CFU或大于150CFU时，则以最接近15CFU或150CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。计数菌落数大于150CFU的测试片时，可计数一个或两个具有代表性的方格内的菌落数，换算成单个方格内的菌落数后乘以20即为測试片估算的菌落数<圆形生长面为20cm2）。9.3报告
9.3.1金黄色葡萄球菌总数小于100CFU时，按“四舍工人”原则修约，人整数报告。9.3.2金黄位葡萄球菌总数大于或等于100CFU时第3位数字采用四舍五人原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按四舍五人”原则修约后，采用两位有效数字。
9.3.3若空口对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。9.3.4称重取样以CFU/名为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。A.1无菌生理盐水
A.1.1成分
氨化钠
蒸馏水
A.1.2制法
1000ml
附录A
（规范性附录）
培养基和试剂
称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121高压灰菌15minA,2磷酸盐缓冲液
A.2.1成分
磷酸二氢钾（KH.PO,）
蒸馏水
A.2.2制法
SN/T 45462017
贮存液：称取34.0名的磷酸二氢钾落于500mL蒸缩水中，用大药175mL的1mol/L氢氧化钠溶存于冰箱中。
液调节pH，用蒸馏水稀释至1000mL后赠稀释液：取贮存液1.25mL，用蒸淘水稀至100mL.分装于适宜容器中，121℃高压灭菌15minA.3无菌1mol/LNaOH
A.3.1成分
蒸馏水
称取40g氢氧化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min，A.4无菌1m0l/LHCl
蒸馏水
SN/T4546—2017
移取浓盐酸90mL，用蒸馅水释释至1000ml.，121℃高压灭菌15min。B.1
线性和准确度
附录B
（资料性附录）
3MPetrifilm金黄色葡萄球菌检验测试片（3MPetrifilmTStaphylococcusaureusCountPlate)评价结果表[3.1给出了测试片方法和参考方法（GB4789.2—2010)的线性关系。裘B.1
测试片方法和参考方法（GB4789.2--2010）的线性关系食品种类
家禽类
肉制品
鱼类和海产品
乳制品
T0.05(15) =2.131
食品基体
油炸腿排
调味熟制鸡肉
腌制鸡腿肉
调味肝串
香卤风翅
齿凤爪
鱿鱼丝
烤鱿鱼头
全脂奶粉
椰汗饼干
凤梨酥
克草莓麦片
表B.2给出了5类食品的线性美系。表B.2
食品种类
家高类
肉制品
角类和海产品
og优范围
0.98~3.95
1.11~-3.72
0.95-3.68
线性方程
-1.0116+C.C996
y-0.9857x-c.1241
J-1.008 8r 0.116 5
y-1.0112-0.1747
J-1.044 82-0.249 4
y-1.1332.-0.421 1
y-0.9765-0.1932
J=1.054 30.416 0
y=0.9765z0.0087
-0.973 8.r-0.183 7
3=0.957元0.187
y=0.997 7x -0,168
y=1.00182-0.2026
y=0.826 7r +0.153 5
y-1.0141x-0,2333
5类食品的线性关系表
线性方程
3-0.99281-0.1096
3-1.0639-0.2836
y= 9.076 7.r --0.160 3
SN/T 4546-2017
相关系数（R）
T检验值
相关系数(R2）
1）本评价结果仅适用了3M公可生的金黄色葡萄球菌测试片（3MPetrifilrnMStaphylncoccusaureusCountPlate)
SN/T 4546--2017
食品种类
乳制品
所有食品
L.oR值范围
1.13～3.77
测试片法菌落数的对数破；
参考片法菌落数的对数值。
表B.2(续）
线性方
J-C.9759I-0.17R9
#=1.000 1r- 0.173 2
3-1,(03 1元0.185
相系数（R）
通过选择5个食品种类，15个食品类型的样品的验证，3M金黄色葡萄球菌测试片获得的数据与基准方法（GB4789.10—2019)的测定结果无显善差异。B.2
耐变性
选用两个污染水平样品对培养基温度和培养时间两个变量进行耐变性试验，经验证培养温度选择35°℃和37℃，培养时间选择22h和26h对检测结果的标准差与在重复性条件下得到的标准偏差没有明显差别，表明说明书巾对培养温度36℃土1℃和培养时间24h士2h的耐变性范国不影响检测结果，见表B.3。
表B.3耐变性试验结果
实验条件
37℃.22h
35℃.22h
35℃.25h
批间差异
菌株添
加水平
高浓度
抵浓度
高浓度
低浓度
高浓度
低浓度
高浓度
低浓度
测试结果
平均值
标准偏差
取3个不同批号的测试片对两个污染浓度的样品进行批间变异实验，二个不同批号测试片测试结果的标准偏差与重复性条件下待到的标准偏差没有明显差别，说明不同批号产品无明显差异，结果见表B.4.
菌株浓度
高浓度
低浓度
2013-03-KH
2013-04-KA
2013-09-KC
总平均值
201303KH
2013-04-KA
201309-KC
总平均值
批间变异试验结果
测定结果（log值）
平均值
SN/T 4546—2017
标准偏差
SN/T4546-2017
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
商品化试剂盒检测方法
金黄色葡萄球酋方法
SN/T 4546--2017
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010）68533533
网址spe.net.cn
中国标准出版社藥皇岛印刷厂印刷+
开本880×12301/16
印张1字数20千字
2018年5月第一版
2018年5月第一次印刷bzxZ.net
印数1—500
书号：155066·2-32956定价18.00元
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代替SN/T1895—2007
商品化试剂盒检测方法
金黄色葡萄球菌
方法一
Commercial kit method-Sta phylococcus aureus--Test method I2017-05-12发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-12-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。SN/T4546-—2017
本标准代替SN/T1895：2007食品中金黄色葡萄球菌的快速计数法PetrifilmTM测试片法》。与SN/T18952007相比，除编辑性修改外主要技术变化如下：.-修改了标准的中英文名称；
修改了附录A：
一增加了计算公式；
-增加了附录B;
除了第二法PetrifilmT测试片MPN法。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫、中国检验检疫科学研究院、大连启元科技发展有限公司。
本标推主要起草人：蒋丹、刘淑艳、孙晓飞、丁健、万超、赵红阳、吴斌，林长军、卢行安、周振亚。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SNV/T1895—2007。
1范围
商品化试剂盒检测方法
金黄色葡萄球菌方法一
SN/T4546—2017
本标准规定厂食品中金黄色葡萄球菌检验测试片（PetrifilmTMStuphytocorcusaureusCountPlate）的检测方法。
本标准适用于出口食品和源料中金黄色葡莹球菌的计数2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB19489实验室生物安全通用要求3生物安全措施
为了保护实验室人员的安全和防止污染，应由具备资格的工作人贯检测。所有培养物和废弃物的处理应按照GB19489有关规定执行。4技术概要
金黄色葡萄球菌测试片法是用一种预先制备的含有指示剂及冷水可溶性凝胶的培养基系统进行微生物培养的方法。
金黄色葡萄球菌测试片STx（StaphExpress CountPlate）含有具有显色功能并经改良的BairdParker培养基，对金黄色葡萄球菌具有很强的选择性。测试片上的紫红色菌落为金黄色葡菊球菌。若出现除紫红色以外的其他颜色，则必须便用含有显色剂和脱氧核糖核酸（DNA）的确认反应片。金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶(DNase)会和反应片中的显色剂形成粉红色幕圈。5设备和材料
除微生物实验室常规火菌及培养设备外，其他设备和材料如下，5.1
恒温培养箱：36℃±1℃。
5.2电子大平：感量0.1g。
均质器(旋刀式或拍击式)或等效的设备。5.3
5.4pH计或精密 nH试纸：精密度 0.1。5.5
移液管：lml（具0.01mL刻度）,10mL(具0.1ml刻度）或移液器及吸头。测试片压板。
放大镜或/和菌落计数器。
SN/T 4546—2017
6培养基和试剂
无菌生理盐水：见附录A的A.1。6.1
6.2磷酸盐缓冲液：见附录A的A.2。6.31mol/LNaOH.见附录A的A.3。6.41mol/LHCl见附录A的A.4。
6.5金黄色葡萄球菌测试片和金黄色葡萄球菌确认反应片。本标准使用的试剂盒由3M公司生产，参考SN/T2775—2011和SN/T3266-2012由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会组织评价。具体评价结果参见附录B。试剂盒储存于2℃～8℃,有效期18个月。7检测程序
检测程序见图！。
25 g(mL) + 225 ml生理盐水
1 mL按种睡，检样勾截加入避试片36℃±1℃
无激落
24 h± 2 h
紫红色菌落
计数金货色葡萄球菌菌落
其他颜色的菊落
在测试片中置入确认反应片
36江i第养1h--3h
36C+1t1h~3h
计氯有粉红色晕的菌落为
金黄色葡萄球菌
图1冷水可溶性金黄色葡萄球菌凝胶测试片快速计数法检测程序8操作步骤
8.1样品制备
SN/T 4546—2017
8.1.1固体和半固体样品：称取25样品置盛有225ml.磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯中，8(00)r/min~l0000r/min均质1i~-2min，或放入盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min~~2min，制成1：10的样品勾液。8.1.2液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225ml.磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混勾，制成1：10的样品匀液。样品勾液的pH值应为6.5~7.5,pH值过低或过高时可分别采用1mol/1.NaOH调节或1mol/lHCl予以调节。如为冷冻产品，应在45℃以下不超过15min，或2℃～5℃不超过18h解冻。8.1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取110样品匀液！ml,沿管壁缓缓注入9ml.磷酸盐缀冲液或生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振试管，使其混合均匀、制成1100的样品匀液，
8.1.4按8.1.3操作程序，依次制成10倍递增系列稀释样品匀液，每递增稀释1次，换用1支1mL无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min，B.2样品匀液的接种和培养
8.2.1根据对样品的污染状况的估计及相关限量要求，选取2个～3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种2张测试片。同时，分别吸取1mL磷酸盐缓冲液或生理盐水加人两张测试片内作为空向对照。8.2.2接种：将金黄色葡球菌测试片置于平划实验台面，揭开上层膜，用吸管吸取1ml样品勾液垂直滴加在测试片的中央，将上层膜缓慢盖下，避免气泡产生和上层膜直接落下，把压饭（平面底朝下）放置在上层膜中央，轻轻地压下，使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上。拿起压板，静置至少1min以使培养基凝固
8.2.3培养：将测试片的透明面朝上，水平置于培养箱内，堆叠片数不超过20片，在36士1℃条件下培养24h=2 h.
8.2.4确认反应：如果上述测试片上没有菌落生长或菌落全部是紫红色（典型的金黄色葡萄球菌特征），无需进行确认：如果测试片上出现黑色、蓝绿色菌落或紫红色菌落不明显，需使用确认反应片作逊一步确认。
将上层膜掀起，将确认反应片置人测试片的培养范围内，再将上层膜放下覆盖在确认反应片土，用手指以滑动的方式轻轻将测试片与确认反应片压紧，包括确认反应片的边缘，此步骤可使测试片与确认反应片密接触并除去气泡，最后把插人确认反应片的测试片放在36℃土1℃的培养箱内培养1h～3h
9结果计算与报告
9.1判读
9.1.1可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的金黄色葡萄球菌菌落数量。菌落计数以菌落形战单位（colony-lotingunits，CFU）表示。9.1.2在金黄色葡萄球菌测试片上，紫红色的菌落自接计数为金黄色葡萄球菌：需要使用确认反应片作确认时，计数有粉红色晕圈的菌落。没有粉红色晕圈的菌落不是金黄色葡萄球菌.不应被计数。如果3
SN/T4546-2017
整个培养面积呈粉红色面没有明显的晕圈，说明金黄色葡萄球菌大量存在，结果记录为“多不可计”。培养圆形面积边缘上及边缘以外的菌落不作计数。9.2菌落计数与报告
9.2.1选取菌落数在15CFU~150CFU之间的测试片计数金黄色葡球菌菌落总数。低于15CFU的测试片记录具体菌落数，大于150CFU的记录为多不可计。每个稀释度的金黄色葡萄球菌菌落数应采用两个测试片的平均数。
9.2.2若只有一个稀释度的测试片的菌落数在适宜计数范围内，计算两个测试片金黄色葡萄球菌菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每克（或每毫升）样品中金黄色葡萄球菌菌落总数结果。
9.2.3若有两个连续稀释度的测试片菌落数在适宜计数范围内，按式（1）计算。N-Za/(n+oing)d
式中：
样品中金黄色葡萄球菌总数
Z一测试片（含适宜范围菌落数的平板）金黄色葡葡球菌菌落数之和第，稀释度（低稀释倍数)测试片个数：ng
第二稀释度（高稀释倍数）测试片个数：稀释因子(第一稀释度)
9.2.4若所有稀释度测试片上的菌落数都小干15CFU，则应按稀释度最低的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
9.2.5若所有稀释度（包括液体样品原液）的测试片上均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。
9.2.6若所有稀释度的测试片菌落数均不在15CFU～150CFU之间，其中一部分小于15CFU或大于150CFU时，则以最接近15CFU或150CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。计数菌落数大于150CFU的测试片时，可计数一个或两个具有代表性的方格内的菌落数，换算成单个方格内的菌落数后乘以20即为測试片估算的菌落数<圆形生长面为20cm2）。9.3报告
9.3.1金黄色葡萄球菌总数小于100CFU时，按“四舍工人”原则修约，人整数报告。9.3.2金黄位葡萄球菌总数大于或等于100CFU时第3位数字采用四舍五人原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按四舍五人”原则修约后，采用两位有效数字。
9.3.3若空口对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。9.3.4称重取样以CFU/名为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。A.1无菌生理盐水
A.1.1成分
氨化钠
蒸馏水
A.1.2制法
1000ml
附录A
（规范性附录）
培养基和试剂
称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121高压灰菌15minA,2磷酸盐缓冲液
A.2.1成分
磷酸二氢钾（KH.PO,）
蒸馏水
A.2.2制法
SN/T 45462017
贮存液：称取34.0名的磷酸二氢钾落于500mL蒸缩水中，用大药175mL的1mol/L氢氧化钠溶存于冰箱中。
液调节pH，用蒸馏水稀释至1000mL后赠稀释液：取贮存液1.25mL，用蒸淘水稀至100mL.分装于适宜容器中，121℃高压灭菌15minA.3无菌1mol/LNaOH
A.3.1成分
蒸馏水
称取40g氢氧化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min，A.4无菌1m0l/LHCl
蒸馏水
SN/T4546—2017
移取浓盐酸90mL，用蒸馅水释释至1000ml.，121℃高压灭菌15min。B.1
线性和准确度
附录B
（资料性附录）
3MPetrifilm金黄色葡萄球菌检验测试片（3MPetrifilmTStaphylococcusaureusCountPlate)评价结果表[3.1给出了测试片方法和参考方法（GB4789.2—2010)的线性关系。裘B.1
测试片方法和参考方法（GB4789.2--2010）的线性关系食品种类
家禽类
肉制品
鱼类和海产品
乳制品
T0.05(15) =2.131
食品基体
油炸腿排
调味熟制鸡肉
腌制鸡腿肉
调味肝串
香卤风翅
齿凤爪
鱿鱼丝
烤鱿鱼头
全脂奶粉
椰汗饼干
凤梨酥
克草莓麦片
表B.2给出了5类食品的线性美系。表B.2
食品种类
家高类
肉制品
角类和海产品
og优范围
0.98~3.95
1.11~-3.72
0.95-3.68
线性方程
-1.0116+C.C996
y-0.9857x-c.1241
J-1.008 8r 0.116 5
y-1.0112-0.1747
J-1.044 82-0.249 4
y-1.1332.-0.421 1
y-0.9765-0.1932
J=1.054 30.416 0
y=0.9765z0.0087
-0.973 8.r-0.183 7
3=0.957元0.187
y=0.997 7x -0,168
y=1.00182-0.2026
y=0.826 7r +0.153 5
y-1.0141x-0,2333
5类食品的线性关系表
线性方程
3-0.99281-0.1096
3-1.0639-0.2836
y= 9.076 7.r --0.160 3
SN/T 4546-2017
相关系数（R）
T检验值
相关系数(R2）
1）本评价结果仅适用了3M公可生的金黄色葡萄球菌测试片（3MPetrifilrnMStaphylncoccusaureusCountPlate)
SN/T 4546--2017
食品种类
乳制品
所有食品
L.oR值范围
1.13～3.77
测试片法菌落数的对数破；
参考片法菌落数的对数值。
表B.2(续）
线性方
J-C.9759I-0.17R9
#=1.000 1r- 0.173 2
3-1,(03 1元0.185
相系数（R）
通过选择5个食品种类，15个食品类型的样品的验证，3M金黄色葡萄球菌测试片获得的数据与基准方法（GB4789.10—2019)的测定结果无显善差异。B.2
耐变性
选用两个污染水平样品对培养基温度和培养时间两个变量进行耐变性试验，经验证培养温度选择35°℃和37℃，培养时间选择22h和26h对检测结果的标准差与在重复性条件下得到的标准偏差没有明显差别，表明说明书巾对培养温度36℃土1℃和培养时间24h士2h的耐变性范国不影响检测结果，见表B.3。
表B.3耐变性试验结果
实验条件
37℃.22h
35℃.22h
35℃.25h
批间差异
菌株添
加水平
高浓度
抵浓度
高浓度
低浓度
高浓度
低浓度
高浓度
低浓度
测试结果
平均值
标准偏差
取3个不同批号的测试片对两个污染浓度的样品进行批间变异实验，二个不同批号测试片测试结果的标准偏差与重复性条件下待到的标准偏差没有明显差别，说明不同批号产品无明显差异，结果见表B.4.
菌株浓度
高浓度
低浓度
2013-03-KH
2013-04-KA
2013-09-KC
总平均值
201303KH
2013-04-KA
201309-KC
总平均值
批间变异试验结果
测定结果（log值）
平均值
SN/T 4546—2017
标准偏差
SN/T4546-2017
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
商品化试剂盒检测方法
金黄色葡萄球酋方法
SN/T 4546--2017
中国标准出版社出版
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中国标准出版社藥皇岛印刷厂印刷+
开本880×12301/16
印张1字数20千字
2018年5月第一版
2018年5月第一次印刷bzxZ.net
印数1—500
书号：155066·2-32956定价18.00元
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