SN/T 5113-2019
基本信息
标准号： SN/T 5113-2019
中文名称：进出口食用动物、饲料中呋喃测定 液相色谱-质谱∕质谱法和液相色谱法
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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相关标签： 进出口 食用动物 饲料 测定 色谱 质谱 质谱法 色谱法
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
标准号：SN/T 5113-2019
标准名称：进出口食用动物、饲料中呋喃测定 液相色谱-质谱∕质谱法和液相色谱法
英文名称：Determination of nitrofuran antibiotics in edible animals and feeds for import and export LC-MS/MS method, LC method
标准格式：PDF
发布时间：2019-09-03
实施时间：2020-03-01
标准大小：11668K
标准介绍：本标准规定了进出口食用动物血清、尿液中硝基呋喃代谢物的液相色谱-质谱/质谱测定方法和饲料中呋喃的液相色谱测定方法
本标准适用于进出口动物血清(牛、猪、鸡)、尿液(牛、猪)中硝基呋喃代谢物的测定，饲料(配合饲料、预混合饲料、浓缩饲料)中呋喃的测定
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
B/T6682分析实验室用水规格和试验方法( neg Iso3696:1987,MOD)
3方法原理
血样、尿样样品中的硝基呋喃代谢物，前处理采用在酸性条件下进行水解，同时用2-硝基苯甲醛进
行过夜衍生化，经乙酸乙酯溶液提取后，用液相色谱-质谱/质谱法测定，内标法进行定量
饲料样品中的呋喃，前处理采用乙腈提取，浓缩定容后，用液相色谱法测定，外标法进行定量。
4试剂和材料
除另有说明外，所用水为GB/T6682规定的一级水。
4.1甲醇、乙腈、乙酸乙酯、正已烷、甲酸：色谱纯。
4.22-硝基苯甲醛、三水合磷酸氢二钾：分析纯
4.3乙酸铵：色谱纯
4.4二甲基亚砜：分析纯。
标准名称：进出口食用动物、饲料中呋喃测定 液相色谱-质谱∕质谱法和液相色谱法
英文名称：Determination of nitrofuran antibiotics in edible animals and feeds for import and export LC-MS/MS method, LC method
标准格式：PDF
发布时间：2019-09-03
实施时间：2020-03-01
标准大小：11668K
标准介绍：本标准规定了进出口食用动物血清、尿液中硝基呋喃代谢物的液相色谱-质谱/质谱测定方法和饲料中呋喃的液相色谱测定方法
本标准适用于进出口动物血清(牛、猪、鸡)、尿液(牛、猪)中硝基呋喃代谢物的测定，饲料(配合饲料、预混合饲料、浓缩饲料)中呋喃的测定
2规范性引用文件
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件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
B/T6682分析实验室用水规格和试验方法( neg Iso3696:1987,MOD)
3方法原理
血样、尿样样品中的硝基呋喃代谢物，前处理采用在酸性条件下进行水解，同时用2-硝基苯甲醛进
行过夜衍生化，经乙酸乙酯溶液提取后，用液相色谱-质谱/质谱法测定，内标法进行定量
饲料样品中的呋喃，前处理采用乙腈提取，浓缩定容后，用液相色谱法测定，外标法进行定量。
4试剂和材料
除另有说明外，所用水为GB/T6682规定的一级水。
4.1甲醇、乙腈、乙酸乙酯、正已烷、甲酸：色谱纯。
4.22-硝基苯甲醛、三水合磷酸氢二钾：分析纯
4.3乙酸铵：色谱纯
4.4二甲基亚砜：分析纯。
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标准内容
ICS65.020
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 5113—2019
进出口食用动物、饲料中肤喃测定液相色谱-质谱/质谱法和液相色谱法Determination of nitrofuran antibiotics in edible animals and feeds forimportand export-
标准信息服务平台
LC-I/MS method,LC methodwww.bzxz.net
2019-09-03发布
中华人民共和国海关总署
2020-03-01实施
本标准依据GB/T1.1—2009要求的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津海关本标准主要起草人：赵祥平、王飞、柴铭骏、李淑静、杨爽、张俊哲、赵丹、刘洋。SN/T5113—2019
行业标准信息服务平台
1范围
进出口食用动物、饲料中呋喃测定液相色谱-质谱/质谱法和液相色谱法SN/T 5113—2019
本标准规定了进出口食用动物血清、尿液中硝基呋喃代谢物的液相色谱-质谱/质谱测定方法和饲料中呋喃的液相色谱测定方法。本标准适用于进出口动物血清（牛、猪、鸡）、尿液（牛、猪）中硝基呋喃代谢物的测定，饲料（配合饲料、预混合饲料、浓缩饲料)中哺的测定。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（neqISO3696：1987.MOD）3方法原理
血样、尿样样品中的硝基肤随代谢物，前处理采用在酸性条件下进行水解，同时用2-硝基苯甲醛进行过夜衍生化，经乙酸乙酯溶液提取后，用液相色谱-质谱/质谱法测定，内标法进行定量。饲料样品中的呋，前处理来用乙提取，浓缩定容后，用液相色谱法测定，外标法进行定量。4试剂和材料
4.1甲醇、乙腈、乙酸乙酯、正己烷、甲酸：色谱纯。4.22-硝基苯甲醛、三水合磷酸氢二钾：分析纯。4.3乙酸铵：色谱纯。
4.4二甲基亚：分析纯。
4.5标准物质：呋喃西林原药（CAS编码59-87-0.分子量198.14，分子式C.H.N）、随唑酮原药（CAS编码67-45-8.分子量225.16，分子式CHON）、呋哺他酮原药（CAS编码139-91-3，分子量324.33.分子式CH.N,O.）、呋喃妥因原药（CAS编码67-20-9.分子量238.16.分子式C.HM）标准物质，纯度≥98%。
4.6标准物质：呋喃西林代谢物（CAS编码57-56-7，分子量75.07，分子式CH.N；O）、峡喃唑酮代谢物（CAS编码80-65-9.分子量102.09，分子式CH.N,O2）、呋喃他酮代谢物（CAS编码43056-63-9.分子量201.22，分子式CsHN.O）、喃妥因代谢物（CAS编码2827-56-7.分子量151.55，分子式C,HCIN,O2）标准物质，纯度98%。4.71mol/L盐酸溶液的配制：移取浓盐酸16.9mL，用水定容至200ml。4.80.1mol/LK，HPO，溶液的配制：称取K，HPO4，3H.O11.4g，以水溶解，定容至500mL。4.95mol/L的NaOH溶液的配制：称取NaOH100g，以水溶解，定容至500mL。1
SN/T5113—2019
4.10衍生化试剂的配制：37.8mg2-硝基苯甲醛溶于5ml二甲基亚，现用现配4.1110%乙睛-水溶液：量取10mL乙腈与90mL水，混匀。4.122%甲酸：量取2mL甲酸与98mL水.混匀。4.13甲醇一0.5mmol/L乙酸铵溶液（20：80，V/V）：称取38.5mg乙酸铵，用水稀释并定容至800mL.然后加入200mL甲醇，混匀。4.140.05%乙酸铵溶液；称取500mg乙酸铵，用水稀释并定容至1L。4.15哺原药类标准储备液：0.1mg/mL。准确称取适量的标准物质（4.5），用乙睛分别配成0.1mg/mL的标准储备溶液，在一18℃避光保存。4.16呋喃代谢物类标准储备液：0.1mg/mL。准确称取适量的标准物质（4.6），用甲醇分别配成0.1mg/mL的标准储备溶液.在一18℃避光保存。4.17呋哺原药类标准工作溶液：根据需要吸取标准储备溶液（4.15），用乙睛稀释定容至刻度4.18呋哺代谢物类标准工作溶液：根据需要吸取标准储备溶液（4.16），用甲醇稀释定容至刻度。4.19滤膜：0.22um，有机相滤膜。5仪器
5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2
液相色谱仪：配有紫外检测器。5.3
分析天平：感量0.01g，0.0001g。5.4
超声波清洗器。
固相萃取装置。
5.6氨气浓缩仪。
离心机：转速大于等于4000r/min行业标准信
5.8水浴恒温振荡器。
样品的制备与保存
6.1试样的制备
对于饲料样品则取代表性样品1kg·四分对于血样和尿样，取离心后上清，混合均匀，分装标记服务平台
法缩减，取约200g，经粉碎，过0.45mm孔筛，混匀分装磨口瓶。在制样的辑作过程中，应防止样品受到污染或发生目标物含量的变化。6.2试样的保存
将分装后的血样、尿样试样于一18℃保存，饲料4℃冷藏。7测定步骤
7.1提取
血样或尿样：解冻后，离心，取1g（精确至0.01g）上清于15mL离心管中，加人0.5mL1mol/L盐酸溶液（4.7），0.3mL衍生化试剂（4.10）。37℃水浴振荡16小时，避光。衍生化完毕后，分别加入0.1mL5mol/L的NaOH溶液（4.9），1mL0.1mol/L的K,HPO，溶液（4.8）和4mL的乙酸乙酯.涡旋30s，4000r/min，离心5min，取出上层的乙酸乙酯层，备用；再向溶液中加入4ml的乙酸乙酯，涡旋2
30s，4000r/min，离心5min，取出上层的乙酸乙酯层，合并乙酸乙酯层。SN/T5113—2019
饲料：称取2g样品（精确至0.01g）至50mL离心管中，加人20mL乙睛，涡旋1min，超声提取15min，8000r/min离心10min，取出上层的乙睛层，备用：再向饲料中加人20mL乙睛，涡旋1min，超声提取15min，8000r/min离心，10min，取出上层的乙睛层，合并乙睛层。移取乙睛层4mL，N，吹干。
7.2净化
而样或尿样：N2吹十乙酸乙酯层，分别加入1ml的10%乙晴-水溶液（4.11）复溶，涡旋30S，加3mL正已烷涡旋30s，4000r/min.离心5min，取下层过0.22μm滤膜，供液相色谱-质谱/质谱测定。饲料：加2%甲酸（4.12）1mL，超声2min，涡旋1min使其充分溶解，过0.22μm滤膜，供液相色谱测定。
按照上述步骤，制备样品空白提取液，以便配制基质系列标准工作溶液。7.3硝基呋哺代谢物的测定条件
液相色谱条件
硝基呋哺代谢物的液相色谱分离条件如下：a）
色谱柱：C18，1.9μm，2.1×100mm或性能相当者；b）流速：0.3mL/mim；
柱温：25℃；
进样量：5μL；
表1。
流动相：甲醇一0.5mmol/L乙酸铵溶液（20：80，V/V，详见4.13）。梯度洗脱；梯度洗脱条件见表
时间，min
质谱条件
呋类代谢物的梯度洗脱条件
甲醇-0.5m1/L乙酸溶液
准信息服务平
(20 80,V/Y)
硝基呋喃代谢物的质谱分析条件如下：离子源：电喷雾离子源；
b）扫描方式：正离子扫描；
检测方式：多反应监测；
电喷雾电压：5500V；
e）气帘气压力：25psi：
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辅助气压力：GS1：40psi;GS2：45psi离子源温度：600℃；
定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量，定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量见表2（*为定量离子对）。
表2硝基哺类代谢物的定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量被测物名称
13C-SEM
D4-AOZ
13C-AHD
D5-AMOZ
液相色谱-串联质谱测定
定性测定
离子对（m/z)
209.1/166.1
209.1/192.1
212.1/168.1
236.1/104.2
236.1/134.2
240.2/134.0
249.1/178.2
249.1/134.2
252.0/134.0
335.1/262.1
335.1/291.1
340.1/296.2
去簇电压/v
碰撞能量/v
在相同试验条件下，样品溶液中的测物保留时间与基质标准工作溶液中被测物的保留时间比值，偏差在土2.5%之内。并且，待测样品溶液中，被测物中各定性离子相对丰度与浓度接近的基质标准工作溶液中被测物的各定性离子相对丰度的比值，若差不超过表3规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。
相对离子丰度
允许的最大偏差
7.3.3.2定量测定
定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差（>50
>20~50
>10~20
在仪器最佳工作条件下，用基质标准工作溶液分别进样，以各标准溶液中被测组分峰面积为纵坐标，以各标准溶液被测组分浓度（ng/mL）为横坐标，绘制标准工作曲线。用基质标准工作曲线对样品进行定量，应使样品溶液中呋喃类代谢物的响应值在仪器测定的线性范围内。空白基质及添加1.0gkg呋喃类代谢物的多反应监测色谱图参见附录A4
7.4呋哺类原药的测定条件
液相色谱条件
呋喃类原药的液相色谱分离条件如下：色谱柱：C18，1.7μm2.1X50mm或性能相当者。a)
流速：0.3mL/min。
柱温：25℃。
进样量：2uL。
流动相：乙睛一0.05%乙酸铵溶液（4.14）。梯度洗脱：梯度洗脱条件见表4。表4呋喃原药的梯度洗脱条件
时间.min
液相色谱测定
0.05%乙酸铵，%
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乙腈，%
在仪器最佳工作条件下，用基质标准工作溶液分别进样，以各标准溶液中被测组分峰面积为纵坐标，以各标准溶液被测组分浓度（μg/mL）为横坐标，绘制标准工作曲线。用基质标准工作曲线对样品进行定量，应使样品溶液中呋喃原药的响应值在仪器测定的线性范围内。空白基质及添加1.0mg/kg行业标施
呋的色谱图参见附录A。
结果计算
呋喃类代谢物的含量按式（1)计算，结果保留三位有效数字息服务平台
式中：
试样中呋喃类代谢物的残留量，单位为微克每千克（ug/kg）X
一基质标准工作溶液中被测物的浓度，单位为纳克每毫片（ng/mL）V样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。m
呋喃类原药的含量按式（2)计算，结果保留三位有效数字：V
式中：
试样中腩类原药的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；基质标准工作溶液中被测物的浓度，单位为毫克每毫升（ug/mL）；样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。..（2）
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9精密度
对手硝基味哺代谢物，在重复性条件下完成的两个平行测定结果的相对偏差不大于15%：对手哦喃原药，在重复性条件下完成的两个平行测定结果的相对偏差不大于7.5%。10检出限、回收率
10.1检出限
本方法中，食用动物中硝基呋喃代谢物的检出限为1.0μg/kg·饲料中呋喃原药的检出限为1.0mg/kg。
10.2回收率
本方法中，食用动物中硝基呋哺代谢物的回收率范围为70%～110%，饲料中呋哺原药的回必率范围为90%～110%。
10.3回收率
数据参见附录B。
行业标准信息服务平台
:!suajul
Asualul
5005 0-
0:1.2.19.a0.4365
4 0e4-
附录A
（资料性附录）
硝基呋哺代谢物多反应监测色谱图和呋喃原药色谱图
152119:199
Tine/nn
牛血空白基质的多反应监测色谱图209.[* -[66. [
209.1-192. 1
SN/T5113—2019
40552,435,5.57,5.70
业标准信息服务平
Tinr/ mi
236. 1134. 2
Tme/ min
SN/T5113—2019
1.1512114
215. 1*→178. 2
195 215 348285 2.921317254.
249. 1→134. 2
335. 1*→262. 1
335. 1→291. 1
Tinc mn
Tinc/ ni
Time/ in
Tine/ nia
A 44 S8 0
硝基呋哺代谢物添加回收1.0μg/kg（牛血基质）的多反应监测色谱图（标注*的为定量离子对2.21
信服务平台
A35.43601
1551328
w.4pm.4c5.4.22
1.55 1 85
Tiuo/ uit
100m4-
nsrerul
Cse on?
D.45.0.60
.21.04
- ---
209. 1* →16t. 1
209. 1→192. 1
236. 1* 10=. 2
236.1 -134.2
Tine/min
Time/ min
Tio/min
Tine/nin
SN/T 5113—2019
标准信息服务平台
219. 1 →134.2
Tue/uirl
SN/T5113—2019
335. 1*→262.1
385. 1-→291. 1
Time/nn
To/min
硝基呋喃代谢物添加回收1.0μg/kg（猪血基质）的多反应监测色谱图（标注*的为定量离子对）1.95
D17c22049
内 57
2.18243244.3002
Tiue/ min
鸡血空白基质的多反应监测色谱图4.5
业标准信息服务平台
209. 1* *166. 1
33 4,52
Tirc/ n'n
9. 1→192. 1
Tinic/n'n
236.1*101.2
lime/ min
236. 1-→+134. 2
. - =
Tiute/ coin
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进出口食用动物、饲料中肤喃测定液相色谱-质谱/质谱法和液相色谱法Determination of nitrofuran antibiotics in edible animals and feeds forimportand export-
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LC-I/MS method,LC methodwww.bzxz.net
2019-09-03发布
中华人民共和国海关总署
2020-03-01实施
本标准依据GB/T1.1—2009要求的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津海关本标准主要起草人：赵祥平、王飞、柴铭骏、李淑静、杨爽、张俊哲、赵丹、刘洋。SN/T5113—2019
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1范围
进出口食用动物、饲料中呋喃测定液相色谱-质谱/质谱法和液相色谱法SN/T 5113—2019
本标准规定了进出口食用动物血清、尿液中硝基呋喃代谢物的液相色谱-质谱/质谱测定方法和饲料中呋喃的液相色谱测定方法。本标准适用于进出口动物血清（牛、猪、鸡）、尿液（牛、猪）中硝基呋喃代谢物的测定，饲料（配合饲料、预混合饲料、浓缩饲料)中哺的测定。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（neqISO3696：1987.MOD）3方法原理
血样、尿样样品中的硝基肤随代谢物，前处理采用在酸性条件下进行水解，同时用2-硝基苯甲醛进行过夜衍生化，经乙酸乙酯溶液提取后，用液相色谱-质谱/质谱法测定，内标法进行定量。饲料样品中的呋，前处理来用乙提取，浓缩定容后，用液相色谱法测定，外标法进行定量。4试剂和材料
4.1甲醇、乙腈、乙酸乙酯、正己烷、甲酸：色谱纯。4.22-硝基苯甲醛、三水合磷酸氢二钾：分析纯。4.3乙酸铵：色谱纯。
4.4二甲基亚：分析纯。
4.5标准物质：呋喃西林原药（CAS编码59-87-0.分子量198.14，分子式C.H.N）、随唑酮原药（CAS编码67-45-8.分子量225.16，分子式CHON）、呋哺他酮原药（CAS编码139-91-3，分子量324.33.分子式CH.N,O.）、呋喃妥因原药（CAS编码67-20-9.分子量238.16.分子式C.HM）标准物质，纯度≥98%。
4.6标准物质：呋喃西林代谢物（CAS编码57-56-7，分子量75.07，分子式CH.N；O）、峡喃唑酮代谢物（CAS编码80-65-9.分子量102.09，分子式CH.N,O2）、呋喃他酮代谢物（CAS编码43056-63-9.分子量201.22，分子式CsHN.O）、喃妥因代谢物（CAS编码2827-56-7.分子量151.55，分子式C,HCIN,O2）标准物质，纯度98%。4.71mol/L盐酸溶液的配制：移取浓盐酸16.9mL，用水定容至200ml。4.80.1mol/LK，HPO，溶液的配制：称取K，HPO4，3H.O11.4g，以水溶解，定容至500mL。4.95mol/L的NaOH溶液的配制：称取NaOH100g，以水溶解，定容至500mL。1
SN/T5113—2019
4.10衍生化试剂的配制：37.8mg2-硝基苯甲醛溶于5ml二甲基亚，现用现配4.1110%乙睛-水溶液：量取10mL乙腈与90mL水，混匀。4.122%甲酸：量取2mL甲酸与98mL水.混匀。4.13甲醇一0.5mmol/L乙酸铵溶液（20：80，V/V）：称取38.5mg乙酸铵，用水稀释并定容至800mL.然后加入200mL甲醇，混匀。4.140.05%乙酸铵溶液；称取500mg乙酸铵，用水稀释并定容至1L。4.15哺原药类标准储备液：0.1mg/mL。准确称取适量的标准物质（4.5），用乙睛分别配成0.1mg/mL的标准储备溶液，在一18℃避光保存。4.16呋喃代谢物类标准储备液：0.1mg/mL。准确称取适量的标准物质（4.6），用甲醇分别配成0.1mg/mL的标准储备溶液.在一18℃避光保存。4.17呋哺原药类标准工作溶液：根据需要吸取标准储备溶液（4.15），用乙睛稀释定容至刻度4.18呋哺代谢物类标准工作溶液：根据需要吸取标准储备溶液（4.16），用甲醇稀释定容至刻度。4.19滤膜：0.22um，有机相滤膜。5仪器
5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2
液相色谱仪：配有紫外检测器。5.3
分析天平：感量0.01g，0.0001g。5.4
超声波清洗器。
固相萃取装置。
5.6氨气浓缩仪。
离心机：转速大于等于4000r/min行业标准信
5.8水浴恒温振荡器。
样品的制备与保存
6.1试样的制备
对于饲料样品则取代表性样品1kg·四分对于血样和尿样，取离心后上清，混合均匀，分装标记服务平台
法缩减，取约200g，经粉碎，过0.45mm孔筛，混匀分装磨口瓶。在制样的辑作过程中，应防止样品受到污染或发生目标物含量的变化。6.2试样的保存
将分装后的血样、尿样试样于一18℃保存，饲料4℃冷藏。7测定步骤
7.1提取
血样或尿样：解冻后，离心，取1g（精确至0.01g）上清于15mL离心管中，加人0.5mL1mol/L盐酸溶液（4.7），0.3mL衍生化试剂（4.10）。37℃水浴振荡16小时，避光。衍生化完毕后，分别加入0.1mL5mol/L的NaOH溶液（4.9），1mL0.1mol/L的K,HPO，溶液（4.8）和4mL的乙酸乙酯.涡旋30s，4000r/min，离心5min，取出上层的乙酸乙酯层，备用；再向溶液中加入4ml的乙酸乙酯，涡旋2
30s，4000r/min，离心5min，取出上层的乙酸乙酯层，合并乙酸乙酯层。SN/T5113—2019
饲料：称取2g样品（精确至0.01g）至50mL离心管中，加人20mL乙睛，涡旋1min，超声提取15min，8000r/min离心10min，取出上层的乙睛层，备用：再向饲料中加人20mL乙睛，涡旋1min，超声提取15min，8000r/min离心，10min，取出上层的乙睛层，合并乙睛层。移取乙睛层4mL，N，吹干。
7.2净化
而样或尿样：N2吹十乙酸乙酯层，分别加入1ml的10%乙晴-水溶液（4.11）复溶，涡旋30S，加3mL正已烷涡旋30s，4000r/min.离心5min，取下层过0.22μm滤膜，供液相色谱-质谱/质谱测定。饲料：加2%甲酸（4.12）1mL，超声2min，涡旋1min使其充分溶解，过0.22μm滤膜，供液相色谱测定。
按照上述步骤，制备样品空白提取液，以便配制基质系列标准工作溶液。7.3硝基呋哺代谢物的测定条件
液相色谱条件
硝基呋哺代谢物的液相色谱分离条件如下：a）
色谱柱：C18，1.9μm，2.1×100mm或性能相当者；b）流速：0.3mL/mim；
柱温：25℃；
进样量：5μL；
表1。
流动相：甲醇一0.5mmol/L乙酸铵溶液（20：80，V/V，详见4.13）。梯度洗脱；梯度洗脱条件见表
时间，min
质谱条件
呋类代谢物的梯度洗脱条件
甲醇-0.5m1/L乙酸溶液
准信息服务平
(20 80,V/Y)
硝基呋喃代谢物的质谱分析条件如下：离子源：电喷雾离子源；
b）扫描方式：正离子扫描；
检测方式：多反应监测；
电喷雾电压：5500V；
e）气帘气压力：25psi：
SN/T5113—2019
辅助气压力：GS1：40psi;GS2：45psi离子源温度：600℃；
定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量，定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量见表2（*为定量离子对）。
表2硝基哺类代谢物的定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量被测物名称
13C-SEM
D4-AOZ
13C-AHD
D5-AMOZ
液相色谱-串联质谱测定
定性测定
离子对（m/z)
209.1/166.1
209.1/192.1
212.1/168.1
236.1/104.2
236.1/134.2
240.2/134.0
249.1/178.2
249.1/134.2
252.0/134.0
335.1/262.1
335.1/291.1
340.1/296.2
去簇电压/v
碰撞能量/v
在相同试验条件下，样品溶液中的测物保留时间与基质标准工作溶液中被测物的保留时间比值，偏差在土2.5%之内。并且，待测样品溶液中，被测物中各定性离子相对丰度与浓度接近的基质标准工作溶液中被测物的各定性离子相对丰度的比值，若差不超过表3规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。
相对离子丰度
允许的最大偏差
7.3.3.2定量测定
定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差（>50
>20~50
>10~20
在仪器最佳工作条件下，用基质标准工作溶液分别进样，以各标准溶液中被测组分峰面积为纵坐标，以各标准溶液被测组分浓度（ng/mL）为横坐标，绘制标准工作曲线。用基质标准工作曲线对样品进行定量，应使样品溶液中呋喃类代谢物的响应值在仪器测定的线性范围内。空白基质及添加1.0gkg呋喃类代谢物的多反应监测色谱图参见附录A4
7.4呋哺类原药的测定条件
液相色谱条件
呋喃类原药的液相色谱分离条件如下：色谱柱：C18，1.7μm2.1X50mm或性能相当者。a)
流速：0.3mL/min。
柱温：25℃。
进样量：2uL。
流动相：乙睛一0.05%乙酸铵溶液（4.14）。梯度洗脱：梯度洗脱条件见表4。表4呋喃原药的梯度洗脱条件
时间.min
液相色谱测定
0.05%乙酸铵，%
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乙腈，%
在仪器最佳工作条件下，用基质标准工作溶液分别进样，以各标准溶液中被测组分峰面积为纵坐标，以各标准溶液被测组分浓度（μg/mL）为横坐标，绘制标准工作曲线。用基质标准工作曲线对样品进行定量，应使样品溶液中呋喃原药的响应值在仪器测定的线性范围内。空白基质及添加1.0mg/kg行业标施
呋的色谱图参见附录A。
结果计算
呋喃类代谢物的含量按式（1)计算，结果保留三位有效数字息服务平台
式中：
试样中呋喃类代谢物的残留量，单位为微克每千克（ug/kg）X
一基质标准工作溶液中被测物的浓度，单位为纳克每毫片（ng/mL）V样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。m
呋喃类原药的含量按式（2)计算，结果保留三位有效数字：V
式中：
试样中腩类原药的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；基质标准工作溶液中被测物的浓度，单位为毫克每毫升（ug/mL）；样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。..（2）
SN/T5113—2019
9精密度
对手硝基味哺代谢物，在重复性条件下完成的两个平行测定结果的相对偏差不大于15%：对手哦喃原药，在重复性条件下完成的两个平行测定结果的相对偏差不大于7.5%。10检出限、回收率
10.1检出限
本方法中，食用动物中硝基呋喃代谢物的检出限为1.0μg/kg·饲料中呋喃原药的检出限为1.0mg/kg。
10.2回收率
本方法中，食用动物中硝基呋哺代谢物的回收率范围为70%～110%，饲料中呋哺原药的回必率范围为90%～110%。
10.3回收率
数据参见附录B。
行业标准信息服务平台
:!suajul
Asualul
5005 0-
0:1.2.19.a0.4365
4 0e4-
附录A
（资料性附录）
硝基呋哺代谢物多反应监测色谱图和呋喃原药色谱图
152119:199
Tine/nn
牛血空白基质的多反应监测色谱图209.[* -[66. [
209.1-192. 1
SN/T5113—2019
40552,435,5.57,5.70
业标准信息服务平
Tinr/ mi
236. 1134. 2
Tme/ min
SN/T5113—2019
1.1512114
215. 1*→178. 2
195 215 348285 2.921317254.
249. 1→134. 2
335. 1*→262. 1
335. 1→291. 1
Tinc mn
Tinc/ ni
Time/ in
Tine/ nia
A 44 S8 0
硝基呋哺代谢物添加回收1.0μg/kg（牛血基质）的多反应监测色谱图（标注*的为定量离子对2.21
信服务平台
A35.43601
1551328
w.4pm.4c5.4.22
1.55 1 85
Tiuo/ uit
100m4-
nsrerul
Cse on?
D.45.0.60
.21.04
- ---
209. 1* →16t. 1
209. 1→192. 1
236. 1* 10=. 2
236.1 -134.2
Tine/min
Time/ min
Tio/min
Tine/nin
SN/T 5113—2019
标准信息服务平台
219. 1 →134.2
Tue/uirl
SN/T5113—2019
335. 1*→262.1
385. 1-→291. 1
Time/nn
To/min
硝基呋喃代谢物添加回收1.0μg/kg（猪血基质）的多反应监测色谱图（标注*的为定量离子对）1.95
D17c22049
内 57
2.18243244.3002
Tiue/ min
鸡血空白基质的多反应监测色谱图4.5
业标准信息服务平台
209. 1* *166. 1
33 4,52
Tirc/ n'n
9. 1→192. 1
Tinic/n'n
236.1*101.2
lime/ min
236. 1-→+134. 2
. - =
Tiute/ coin
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