SN/T 1822-2006.Identification of black leaf streak disease (Mycos phaerella fijiensis Morelet) of banana.
1范围
SN/T 1822规定了进境植物检疫中香蕉黑条叶斑病菌的检疫鉴定方法。
SN/T 1822适用于进境芭蕉属植物的芽苗球茎等繁殖材料,香蕉叶片、苞片等包装、填充材料,以及香蕉果实等携带的香蕉黑条叶斑病菌的检疫鉴定。
2原理
香蕉黑条叶斑病菌[Mycosphaerella fijiensis Morelet (Mycos phaerella fijiensis var. diffor-mis)],属子囊菌亚门(Ascomycotina) ,腔菌纲(Loculoascomyetes)，座囊菌目(Dothideales),座囊菌科(Dothideaceae) ,球腔菌属(Mycospharella) ,无性态为斐济假尾孢属(Pseudocercospora fijiensis)该
病与香蕉褐缘灰斑病在病症、病原上既相近又有所不同,鉴定时注意区分(参见附录A)。该病菌可以侵染芭蕉属植物,特别是香蕉和大蕉，主要为害叶片、苞片、吸芽苗、球茎和果实,造成植株叶片早枯,降低果实的品质。该病菌可依据其有性态的子囊座、子囊、子囊孢子以及无性态的分生孢子梗和分生孢子等形态特征,以及受侵染植物的症状特征进行鉴定。
3仪器、试剂
手持式放大镜、双目解剖镜(10X~50X)、显微镜(100X~1 000X)、切片机、刀片、解剖刀、解剖
剪、镊子、记号笔、酒精灯、纱布、烧杯、搪瓷杯、移殖接种针、移殖环、培养皿、三角瓶、棉花塞、玻片、盖玻片、铝铂纸Parafilm膜、超净工作台、乳酚油(由苯酚20 mL、甘油40 mL、乳酸20 mL、蒸馏水20 mL混合配制而成)、次氯酸钠(NaCIO)、酒精.V。蔬菜汁、琼脂粉、碳酸钙(CaCO2)。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1822-2006
2071423
香蕉黑条叶斑病菌检疫鉴定方法Identification of black leaf streak disease(Mycosphaerella fijiensis Morelet) of banana2006-11-10发布
数码防伪
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2007-05-16实施
本标准的附录A、附录B、附录C均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T1822—2006
本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局、中华人民共和国河北出入境检验检疫局、华南热带农业大学。
本标准主要起草人：李捷、李冠雄、黄朝豪、张建军、赵玉平、彭仁。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。1范围
香蕉黑条叶斑病菌检疫鉴定方法本标准规定了进境植物检疫中香蕉黑条叶斑病菌的检疫鉴定方法。SN/T1822—2006
本标准适用于进境芭蕉属植物的芽苗、球茎等繁殖材料，香蕉叶片、苞片等包装、填充材料，以及香蕉果实等携带的香蕉黑条叶斑病菌的检疫鉴定。2原理
香蕉黑条叶斑病菌[Mycosphaerella fijiensis Morelet（Mycosphaerella fijiensis var.difformis）]，属子囊菌亚门（Ascomycotina），腔菌纲（Loculoascomycetes），座囊菌目（Dothideales），座囊菌科（Dothideaceae），球腔菌属（Mycosphaerella），无性态为斐济假尾孢属（Pseudocercosporafijiensis）。该病与香蕉褐缘灰斑病在病症、病原上既相近又有所不同，鉴定时注意区分（参见附录A）。该病菌可以侵染芭蕉属植物，特别是香蕉和大蕉，主要为害叶片、苞片、吸芽苗、球茎和果实，造成植株叶片早枯，降低果实的品质。该病菌可依据其有性态的子囊座、子囊、子囊孢子以及无性态的分生孢子梗和分生孢子等形态特征，以及受侵染植物的症状特征进行鉴定。3仪器、试剂
手持式放大镜、双目解剖镜（10×～50×）、显微镜（100×～1000×）、切片机、刀片、解剖刀、解剖剪、镊子、记号笔、酒精灯、纱布、烧杯、塘瓷杯、移殖接种针、移殖环、培养皿、三角瓶、棉花塞、玻片、盖玻片、铝铂纸、Parafilm膜、超净工作台、乳酚油（由苯酚20mL、甘油40mL、乳酸20mL、蒸馏水20mL混合配制而成）、次氯酸钠(NaCIO)、酒精、V。蔬菜汁、琼脂粉、碳酸钙（CaCO）。4症状检查
现场检疫时，应认真核查待检货物产地、包装、标记、品名及数量是否与有关单证相符。仔细检查香蕉的吸芽苗、球茎、叶片、苞片和果实，尤其是新叶是否有香蕉黑条叶斑病症状。该病主要为害叶片，初期病状通常在第3或第4张新叶的背面产生直径0.25mm的褪绿斑，随后扩展为3mmX1mm条状的褐黑色条纹，与叶脉平行。中期条纹扩展形成褐色椭圆形病斑，病健交界明显，外圈有窄的黄色晕圈。病斑后期呈黑褐色或黑色，中央组织逐渐干枯变为灰白色；多个病斑相互联合后，叶组织大面积坏死，叶柄变干，整张叶子下垂，提早枯死。对于来自疫区的货物，还应仔细检查装载交通工具和包装材料。然后，直接扦取有可疑症状的部位送实验室检验。
5检验方法
5.1病原菌检查
用解剖针挑取或刀片刮取病斑背面的霉状物或病组织表皮下小黑点制片，在显微镜下直接检查有无病菌的子实体，记录其形态特征，测量分生孢子梗、分生孢子和子囊果及子囊孢子的大小。5.2分离培养
如果发现可疑症状，但不能从病部获得病原菌按5.1检查，应采取分离、培养的方法作进一步鉴定。选择新鲜病组织（吸芽苗、球茎、叶片、苞片或果实的表皮组织），冲洗干净表面泥土等杂物后，在病健交界处切取0.5cm2左右的小块，用70%酒精消毒2s～3s后，置于3%次氯酸钠水溶液中消毒3min~1
SN/T1822—2006
5min，再用灭菌水浸洗3次，用灭菌滤纸吸干水分后移置在Vs蔬菜汁培养基（参见附录B）平板上，于25℃~28℃下培养7d~10d。
6鉴定特征
6.1培养特征
本菌在V蔬菜汁培养基上生长，菌落形态常有两种，一种菌落墨绿色至黑色，生长速度较慢，气生菌丝很少：另一种菌落呈淡灰色，生长速度较快，气生菌丝很茂密。菌丝生长最适温度为25℃～28℃，培养基上的菌落表面淡灰色，基底墨绿色至黑色，分生孢子在菌落边缘呈圈状排列。6.2形态特征
6.2.1有性态
子囊座散生在寄主叶、球茎、果实等的表皮层下，黑褐色，球形至扁球形，有乳头状孔口，直径50um~80μm，平均63um：子囊圆柱形至棍棒形，每个子囊内含8个子囊孢子，双列，子囊间拟侧丝早期消解，子囊双层壁大小为（28.0μm~34.5um）×（6.5um~8.0μm）；子囊孢子双胞，无色，梭形或棍棒状，在分隔处稍缩，大小为（11.5μm~16.5μm）×（2.5μm~5μm），平均13.7μm×3.7μm。参见附录C。
6.2.2无性态
菌丝体内生，分生孢子梗2～8根筷生于子座上，顶端曲膝状，灰白色至浅褐色，0~5个分隔，不分枝，有1个~4个稍变厚的孢痕，大小（16.5m~62.5mm）×（4m~7mm）。分生孢子直立或稍弯曲，倒棍棒状至圆柱棍棒状，有1个一10个分隔，有明显的基脐，从脐端到顶部逐渐狭窄，淡色至橄榄色，大小为（30μm~132μm）×（2.5μm~5μm），平均72.5μm×4μm。参见附录C。6.3生物学特征
分生孢子发育最适温度为23℃～25℃，相对湿度为100%。子囊孢子发育最适温度为26℃，相对湿度为95%。
病菌远距离主要通过种植材料进行传播，分生孢子和子囊孢子在有雨露的高湿条件下，便可萌发，由气孔侵人寄主组织引起发病。由子囊果释放出的子囊孢子与叶面的水膜接触3h后便可发芽侵人寄主，病害的潜育期一般为16d～24d。高湿温暖的天气条件适宜此病发生，尤其是在高湿和25℃～30℃时病斑扩展最快，气温低于20℃时病菌虽能侵染，但病斑不扩展，不能形成褐色斑。7结果判定
以香蕉黑条叶斑病菌在芭焦属植物上产生的症状，有性态的子囊座、子囊、子囊孢子以及无性态的分生孢子梗和分生孢子的形态特征等作为鉴定依据，进行综合判定。若发现在芭蕉属植物上产生的病症与第4章中所描述症状一致，且形态特征与第6章相符，即判定为香焦黑条叶斑病菌。未发现符合第4章和第6章症状特征的，判定为不带香蕉黑条叶斑病菌。8样品保存
发病的繁殖材料应及时销毁。同时应选择适当的材料制成永久玻片。必要时，可将分离获得的菌种转接种于V蔬菜汁斜面培养基置4℃~8℃冰箱保存，并严格防止扩散。病害
国内分布
孢子梗
有性态
无性态
附录A
（资料性附录）
香蕉黑条叶斑病与褐缘灰斑病区别黑条叶斑病
局部发生
Mycosphaerella fijiensis MoreletPseudocercospora fijiensis
(Morelet)Deighton
着生叶背面，多2根～8根簇生，灰白色至浅褐色，0个～5个分隔，不分支具膝状节，有1个～4个稍加厚的孢痕。
直立或稍弯曲，棍棒状，有1个～10个分隔，有明显的基脐，从脐端到顶部逐渐狭窄，淡色至橄榄色，[30μm~132(72.5μm)】×[2.5μm~5(4)μmJ。SN/T1822—2006
褐缘灰斑病
广泛发生
Mycosphaerella musicola LeachPseudocercos pora musae(Zimn.)Deighton着生叶表面，3根～10根生，无色，多数无隔膜，直立或膝状弯曲，无明显孢痕。圆柱形至倒棍棒形，1个～5个隔膜，（10um~80μm）×（2μm~4μm）。鼠尾状，无色有分隔。附录B
（资料性附录）
10%V。蔬菜汁培养基
10mLV。蔬菜汁，加蒸馏水90mL，碳酸钙（CaCOs）0.02g，琼脂粉2g，充分混合后分装置于121℃下高压蒸汽灭菌15min~20min。SN/T1822—2006
一子囊腔（示子囊及拟侧丝)：
2—子袋：
一子囊孢子。
附录C
（资料性附录）
香蕉黑条叶斑病菌的形态特征图香蕉黑条叶斑病菌有性态（引自《植物病害诊断》）图C.1
香蕉黑条叶斑病菌无性态（分生孢子梗和分生孢子）（仿Deighton）图C.2
书号：155066·2-17490
SN/T1822-2006
定价：
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
香蕉黑条叶斑病菌检疫鉴定方法SN/T1822—2006
中国标准出版社出版
北京复兴门外三里河北街16号
邮政编码：100045
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电话：68523946
68517548
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本880×12301/16印张0.5
字数9千字
2007年3月第一版2007年3月第一次印刷印数1—2000
书号：155066·2-17490Www.bzxZ.net
定价6.00元
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