SN/T 1248-2015
基本信息
标准号： SN/T 1248-2015
中文名称：国境口岸淋病检验规程
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
下载格式：.zip .pdf
下载大小：4244522
标准分类号
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出版信息
相关单位信息
标准简介
SN/T 1248-2015.Inspection codes for gonorrhea at frontier port.
1范围
SN/T 1248规定了国境口岸实验室淋病检验标本的采集及运送,检验方法和结果报告。
SN/T 1248适用于国境口岸对淋球菌感染的实验室诊断。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
WS268-2007淋病诊断标准
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1淋病gonorrhea
由淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖系统的化脓性感染。
3.2淋球菌gonococcus
引起淋病的病原体,属奈瑟菌属,学名为琳病奈瑟菌。
4标本的采集及运送
4.1标本的采集
4.1.1取材拭子
藻酸钙拭子、普通棉拭子及涤纶拭子均可采用。
4.1.2取材部位
对男性异性恋患者,一般仅采集尿道标本,有口交史者加取咽部标本;对男性接触患者应采集尿道、直肠及咽部标本;对女性患者常规采集宫颈标本,必要时从尿道、直肠.咽部.前庭大腺和尿道旁腺取材。
4.1.3取材方法
从不同的解剖部位取材,有一些特殊的注意事项及方法:
一尿道:对男性患者,先用生理盐水清洗尿道口,将男用取材拭子插人尿道内如2cm~3cm,稍用力转动,保留数秒钟再取出,以采集到黏膜上皮细胞。对女性患者,可抵着耻骨联合轻轻按摩尿道后,用同男性相似的方法取材。
一宫颈:取材前用温水或生理盐水湿润扩阴器,如果宫颈口外面的分泌物较多,先用无菌棉拭子清除过多分泌物。将女用取材拭子插入宫内1cm~2cm,稍用力转动，保留10s~30s后取出。
1范围
SN/T 1248规定了国境口岸实验室淋病检验标本的采集及运送,检验方法和结果报告。
SN/T 1248适用于国境口岸对淋球菌感染的实验室诊断。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
WS268-2007淋病诊断标准
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1淋病gonorrhea
由淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖系统的化脓性感染。
3.2淋球菌gonococcus
引起淋病的病原体,属奈瑟菌属,学名为琳病奈瑟菌。
4标本的采集及运送
4.1标本的采集
4.1.1取材拭子
藻酸钙拭子、普通棉拭子及涤纶拭子均可采用。
4.1.2取材部位
对男性异性恋患者,一般仅采集尿道标本,有口交史者加取咽部标本;对男性接触患者应采集尿道、直肠及咽部标本;对女性患者常规采集宫颈标本,必要时从尿道、直肠.咽部.前庭大腺和尿道旁腺取材。
4.1.3取材方法
从不同的解剖部位取材,有一些特殊的注意事项及方法:
一尿道:对男性患者,先用生理盐水清洗尿道口,将男用取材拭子插人尿道内如2cm~3cm,稍用力转动,保留数秒钟再取出,以采集到黏膜上皮细胞。对女性患者,可抵着耻骨联合轻轻按摩尿道后,用同男性相似的方法取材。
一宫颈:取材前用温水或生理盐水湿润扩阴器,如果宫颈口外面的分泌物较多,先用无菌棉拭子清除过多分泌物。将女用取材拭子插入宫内1cm~2cm,稍用力转动，保留10s~30s后取出。
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标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1248—2015
代替SN/T1248-—2003
国境口岸淋病检验规程
Inspection codes for gonorrhea at frontier port2015-05-26发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2016-01-01实施
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
国境口岸淋病检验规程
SN/T1248—2015
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010）68533533
网址spc.net.cn
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印剧开本880X12301/16
2016年1月第一版
印张0.5
字数10千字
2016年1月第一次印刷
印数1-1100
书号：1550662-29506
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准代替SN/T1248—2003《国境口岸淋病检验规程》。本标准与SN/T1248—2003相比，主要技术变化如下：引用了WS268一2007《淋病诊断标准中附录A的部分内容。SN/T1248—2015
对样本的采集及运送等方面进行了调整，增加了对标本采集的取材部位和取材方法等内容的细节描述。
对淋球菌检验的方法进行了规定，包括涂片染色直接显微镜检查，分离培养淋球菌的细胞成分。
在淋球菌的分离培养上，补充完善了常用的2种培养基。将淋球菌的鉴定细化为“初步鉴定”和“确认试验”，描述了鉴定淋球菌的方法本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出人境检验检疫局。
本标准主要起草人：闫荣军、邵柏、于长友、刘福奎、杨启生。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN/T1248—2003。
1范围
国境口岸淋病检验规程
SN/T1248—2015
本标准规定了国境口岸实验室淋病检验标本的采集及运送，检验方法和结果报告。本标准适用于国境口岸对淋球菌感染的实验室诊断。规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。WS268-2007淋病诊断标准
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
淋病gonorrhea
由淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖系统的化脓性感染。3.2
淋球菌gonococcus
引起淋病的病原体，属奈瑟菌属，学名为淋病奈瑟菌。4标本的采集及运送
4.1标本的采集
4.1.1取材拭子
藻酸钙拭子，普通棉拭子及涤纶拭子均可采用。4.1.2
2取材部位
对男性异性恋患者，一般仅采集尿道标本，有口交史者加取咽部标本；对男性接触患者应采集尿道直肠及咽部标本；对女性患者常规采集宫颈标本，必要时从尿道、直肠、咽部、前庭大腺和尿道旁腺取材。4.1.3
3取材方法
从不同的解剖部位取材，有一些特殊的注意事项及方法：尿道：对男性患者，先用生理盐水清洗尿道口，将男用取材拭子插人尿道内如2cm3cm，稍用力转动，保留数秒钟再取出，以采集到黏膜上皮细胞。对女性患者，可抵着耻骨联合轻轻按摩尿道后，用同男性相似的方法取材。一宫颈：取材前用温水或生理盐水湿润扩阴器，如果宫颈口外面的分泌物较多，先用无菌棉拭子1
SN/T1248—2015
清除过多分泌物。将女用取材拭子插人宫内1cm～2cm，稍用力转动，保留10s～30S后取出。
直肠：将取材拭子插人肛管2cm~3cm，向侧方用力，避免接触粪团，从紧靠肛环边的隐窝中取出分泌物。如果拭子碰到粪团，应更换拭子重新取材。阴道：对子宫切除的妇女和青春期前女孩可采集阴道标本。将取材拭子置于阴道后穹隆105~15S，采集阴道分泌。如果处女膜完整.则从阴道口取材一咽部：从咽后壁或扇桃体隐窝采集分泌物。其他部位：血液标本抽取后可立即接种于不含多茴香脑磺酸钠的血液培养基上，或将经肝素抗凝的血液离心，取白细胞层接种于淋球菌选择性固体培养基上。2标本的运送
取材后标本应立即接种。如果不能立即接种，需采用运送系统常用的两种非营养型运送培养基。Amies培养基及Stuart培养基为
美培养基中的标本应在12h内送到实验室，接种于选择性培养基，分离阳性率可达90%以上。超过24则分离阳性率下降，见WS268-2007中A.1.4的规定。
5检验方法
直接显微镜检查
涂片固定
下，制成
取材后将拭子在玻片上稍用力滚动博而均勾的涂
迅速通过火焰2~3次，加热固定
5.1.2革兰氏染色
加热过度使细胞形态扭
将结晶紫溶液铺满在涂片的涂膜面上，菜色1
自然干燥后将涂片（涂抹面向上）min，流水经轻冲
洗。将碘液铺满涂膜面上，染色脱色，至涂膜无金
蓝色脱下对正
1min，流水轻轻冲洗。用乙醇或内于涂片的厚薄，应避免过度脱色，流水车水纸轻轻吸干。
3观察结果
般需108~20sC时间长短取决
用减性复红或沙黄染液复染1min.流水冲洗后用吸神洗。
在光学显微镜（1000×油镜）下检查涂片，菌为革兰氏阴性菌，常成对排列，菌体呈肾形，两菌长轴平行，接触面平坦或稍凹，位于中性粒细胞内。5.1.4结果报告wwW.bzxz.Net
中性粒细胞内见到形态典型的成对的革兰氏阴性双球菌为阳性：中性粒细胞外见到形态典型的成对的革兰氏阴性双球菌为可疑：有或无中性粒细胞但无革兰氏阴性双球菌为阴性（可仅报告中性粒细胞数）。
5.2淋球菌的分离培养
5.2.1培养基
常用的选择性培养基有Thayer-Martin（T-M)培养基、含抗生素的血液琼脂或巧克力琼脂培养基。培养基的成分及配制.按照WS268一2007中A.3的规定。2
5.2.2培养条件
SN/T1248—2015
淋球菌为需氧菌，初代分离需要CO，接种标本后，立即将平皿置于36℃，含5%~10%COz、湿润（70%湿度）的环境中培养。
5.2.3检验结果
培养24h后检查平血，此时没有菌生长的平血应维续培养至48h，仍无菌生长才可作出淋球菌培养阴性的报告，对选择性培养基上分离的可疑菌落应做进一步鉴定。5.3淋球菌的鉴定
5.3.1菌落特征
选择性培养基上分离出的淋球菌菌落大小及形态随培养基及培养时间的不同可有差异，在巧克力培养基平血上培养24h后菌落直径大约为0.5mm1mm呈圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色菌落。培养48h后菌落直径可达3mm，边缘平滑或锯齿状，表面粗糙。5.3.2氧化酶试验
将氧化酶试剂滴加于可疑菌落上，10s15s内出现深紫红色（二甲基对苯二胺）或深紫蓝色（四甲基对苯二胺），即为阳性反应。氧化酶试剂对细胞有毒性，可迅速杀死淋球菌。因此，需保留菌株时应注意不要将试剂滴于全部可疑菌落上，留一部分菌落作转种5.3.3革兰染色
取单个可疑菌落制备涂片作革兰染色，在显微镜下检查。24h新鲜菌落可见到呈典型肾形的革兰氏阴性双球菌（约占25%），其余呈单球，四连或八登形，为阳性结果。超过48h的较老培养物，因细菌自溶，革兰氏染色常难以说明问题5.4确认试验
5.4.1总则
对于取自泌尿生殖道的标本，在选择性培养基上分离出氧化酶阳性的革兰阴性双球菌，一般可诊断为淋球菌，准确性98%。但对取自泌尿生殖道以外部位的标本或涉及医疗法律案例的分离株，应对培养的菌株经糖发酵试验或荧光抗体试验进一步鉴定、确证。5.4.2糖发酵试验
取在非选择性（不含抗生素）巧克力琼脂或血液琼脂培养基上过夜生长的纯培养淋球菌（2接种环），在0.4mL缓冲平衡盐指示溶液中制成浓厚菌悬液。取5支小试管，在14管中分别加人20%过滤灭菌的葡萄糖，麦芽糖，乳糖及照糖各0.05mL。第5管不加糖，作为阴性对照管。每管加人0.1mL缓冲平衡盐指示溶液。每管加0.05mL菌悬液，充分混勾。置37℃水浴箱中孵育4h，观察结果。淋球菌只发酵葡萄黏，不发酵其他糖类。仅葡萄糖管颜色由红变为黄色为淋球菌，为阳性结果。5.4.3荧光抗体染色法
用接种环取数个菌落（可用初代分离菌）涂布于玻片上，加一滴生理盐水，制备成涂片，干燥后加热固定。将30μL荧光抗体试剂加于涂膜上，放于一湿盒中，置37℃15min，用蒸馏水轻轻冲洗涂片，洗去未结合的抗体。涂片置空气中干燥，加一滴封固液，盖上盖玻片，在荧光显微镜下观察结果。在荧光SN/T1248—2015
显微镜下见到发苹果绿色荧光的双球菌为链球菌阳性。6结果报告
淋球菌阳性感染的报告
符合5.3.1.5.3.2、5.3.3，可对淋病作出初步诊断，如有某些形态不符合淋球菌的特点时，利用5.4.2、5.4.3，可对淋病作出明确诊断。6.2
淋球菌阴性感染的报告
与5.3.1、5.3.2、5.3.3、5.4.2、5.4.3.各项均不符合，应报告为淋球菌阴性感染。书号：155066·2-29506
SN/T1248-2015
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代替SN/T1248-—2003
国境口岸淋病检验规程
Inspection codes for gonorrhea at frontier port2015-05-26发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2016-01-01实施
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
国境口岸淋病检验规程
SN/T1248—2015
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010）68533533
网址spc.net.cn
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印剧开本880X12301/16
2016年1月第一版
印张0.5
字数10千字
2016年1月第一次印刷
印数1-1100
书号：1550662-29506
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准代替SN/T1248—2003《国境口岸淋病检验规程》。本标准与SN/T1248—2003相比，主要技术变化如下：引用了WS268一2007《淋病诊断标准中附录A的部分内容。SN/T1248—2015
对样本的采集及运送等方面进行了调整，增加了对标本采集的取材部位和取材方法等内容的细节描述。
对淋球菌检验的方法进行了规定，包括涂片染色直接显微镜检查，分离培养淋球菌的细胞成分。
在淋球菌的分离培养上，补充完善了常用的2种培养基。将淋球菌的鉴定细化为“初步鉴定”和“确认试验”，描述了鉴定淋球菌的方法本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出人境检验检疫局。
本标准主要起草人：闫荣军、邵柏、于长友、刘福奎、杨启生。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN/T1248—2003。
1范围
国境口岸淋病检验规程
SN/T1248—2015
本标准规定了国境口岸实验室淋病检验标本的采集及运送，检验方法和结果报告。本标准适用于国境口岸对淋球菌感染的实验室诊断。规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。WS268-2007淋病诊断标准
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
淋病gonorrhea
由淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖系统的化脓性感染。3.2
淋球菌gonococcus
引起淋病的病原体，属奈瑟菌属，学名为淋病奈瑟菌。4标本的采集及运送
4.1标本的采集
4.1.1取材拭子
藻酸钙拭子，普通棉拭子及涤纶拭子均可采用。4.1.2
2取材部位
对男性异性恋患者，一般仅采集尿道标本，有口交史者加取咽部标本；对男性接触患者应采集尿道直肠及咽部标本；对女性患者常规采集宫颈标本，必要时从尿道、直肠、咽部、前庭大腺和尿道旁腺取材。4.1.3
3取材方法
从不同的解剖部位取材，有一些特殊的注意事项及方法：尿道：对男性患者，先用生理盐水清洗尿道口，将男用取材拭子插人尿道内如2cm3cm，稍用力转动，保留数秒钟再取出，以采集到黏膜上皮细胞。对女性患者，可抵着耻骨联合轻轻按摩尿道后，用同男性相似的方法取材。一宫颈：取材前用温水或生理盐水湿润扩阴器，如果宫颈口外面的分泌物较多，先用无菌棉拭子1
SN/T1248—2015
清除过多分泌物。将女用取材拭子插人宫内1cm～2cm，稍用力转动，保留10s～30S后取出。
直肠：将取材拭子插人肛管2cm~3cm，向侧方用力，避免接触粪团，从紧靠肛环边的隐窝中取出分泌物。如果拭子碰到粪团，应更换拭子重新取材。阴道：对子宫切除的妇女和青春期前女孩可采集阴道标本。将取材拭子置于阴道后穹隆105~15S，采集阴道分泌。如果处女膜完整.则从阴道口取材一咽部：从咽后壁或扇桃体隐窝采集分泌物。其他部位：血液标本抽取后可立即接种于不含多茴香脑磺酸钠的血液培养基上，或将经肝素抗凝的血液离心，取白细胞层接种于淋球菌选择性固体培养基上。2标本的运送
取材后标本应立即接种。如果不能立即接种，需采用运送系统常用的两种非营养型运送培养基。Amies培养基及Stuart培养基为
美培养基中的标本应在12h内送到实验室，接种于选择性培养基，分离阳性率可达90%以上。超过24则分离阳性率下降，见WS268-2007中A.1.4的规定。
5检验方法
直接显微镜检查
涂片固定
下，制成
取材后将拭子在玻片上稍用力滚动博而均勾的涂
迅速通过火焰2~3次，加热固定
5.1.2革兰氏染色
加热过度使细胞形态扭
将结晶紫溶液铺满在涂片的涂膜面上，菜色1
自然干燥后将涂片（涂抹面向上）min，流水经轻冲
洗。将碘液铺满涂膜面上，染色脱色，至涂膜无金
蓝色脱下对正
1min，流水轻轻冲洗。用乙醇或内于涂片的厚薄，应避免过度脱色，流水车水纸轻轻吸干。
3观察结果
般需108~20sC时间长短取决
用减性复红或沙黄染液复染1min.流水冲洗后用吸神洗。
在光学显微镜（1000×油镜）下检查涂片，菌为革兰氏阴性菌，常成对排列，菌体呈肾形，两菌长轴平行，接触面平坦或稍凹，位于中性粒细胞内。5.1.4结果报告wwW.bzxz.Net
中性粒细胞内见到形态典型的成对的革兰氏阴性双球菌为阳性：中性粒细胞外见到形态典型的成对的革兰氏阴性双球菌为可疑：有或无中性粒细胞但无革兰氏阴性双球菌为阴性（可仅报告中性粒细胞数）。
5.2淋球菌的分离培养
5.2.1培养基
常用的选择性培养基有Thayer-Martin（T-M)培养基、含抗生素的血液琼脂或巧克力琼脂培养基。培养基的成分及配制.按照WS268一2007中A.3的规定。2
5.2.2培养条件
SN/T1248—2015
淋球菌为需氧菌，初代分离需要CO，接种标本后，立即将平皿置于36℃，含5%~10%COz、湿润（70%湿度）的环境中培养。
5.2.3检验结果
培养24h后检查平血，此时没有菌生长的平血应维续培养至48h，仍无菌生长才可作出淋球菌培养阴性的报告，对选择性培养基上分离的可疑菌落应做进一步鉴定。5.3淋球菌的鉴定
5.3.1菌落特征
选择性培养基上分离出的淋球菌菌落大小及形态随培养基及培养时间的不同可有差异，在巧克力培养基平血上培养24h后菌落直径大约为0.5mm1mm呈圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色菌落。培养48h后菌落直径可达3mm，边缘平滑或锯齿状，表面粗糙。5.3.2氧化酶试验
将氧化酶试剂滴加于可疑菌落上，10s15s内出现深紫红色（二甲基对苯二胺）或深紫蓝色（四甲基对苯二胺），即为阳性反应。氧化酶试剂对细胞有毒性，可迅速杀死淋球菌。因此，需保留菌株时应注意不要将试剂滴于全部可疑菌落上，留一部分菌落作转种5.3.3革兰染色
取单个可疑菌落制备涂片作革兰染色，在显微镜下检查。24h新鲜菌落可见到呈典型肾形的革兰氏阴性双球菌（约占25%），其余呈单球，四连或八登形，为阳性结果。超过48h的较老培养物，因细菌自溶，革兰氏染色常难以说明问题5.4确认试验
5.4.1总则
对于取自泌尿生殖道的标本，在选择性培养基上分离出氧化酶阳性的革兰阴性双球菌，一般可诊断为淋球菌，准确性98%。但对取自泌尿生殖道以外部位的标本或涉及医疗法律案例的分离株，应对培养的菌株经糖发酵试验或荧光抗体试验进一步鉴定、确证。5.4.2糖发酵试验
取在非选择性（不含抗生素）巧克力琼脂或血液琼脂培养基上过夜生长的纯培养淋球菌（2接种环），在0.4mL缓冲平衡盐指示溶液中制成浓厚菌悬液。取5支小试管，在14管中分别加人20%过滤灭菌的葡萄糖，麦芽糖，乳糖及照糖各0.05mL。第5管不加糖，作为阴性对照管。每管加人0.1mL缓冲平衡盐指示溶液。每管加0.05mL菌悬液，充分混勾。置37℃水浴箱中孵育4h，观察结果。淋球菌只发酵葡萄黏，不发酵其他糖类。仅葡萄糖管颜色由红变为黄色为淋球菌，为阳性结果。5.4.3荧光抗体染色法
用接种环取数个菌落（可用初代分离菌）涂布于玻片上，加一滴生理盐水，制备成涂片，干燥后加热固定。将30μL荧光抗体试剂加于涂膜上，放于一湿盒中，置37℃15min，用蒸馏水轻轻冲洗涂片，洗去未结合的抗体。涂片置空气中干燥，加一滴封固液，盖上盖玻片，在荧光显微镜下观察结果。在荧光SN/T1248—2015
显微镜下见到发苹果绿色荧光的双球菌为链球菌阳性。6结果报告
淋球菌阳性感染的报告
符合5.3.1.5.3.2、5.3.3，可对淋病作出初步诊断，如有某些形态不符合淋球菌的特点时，利用5.4.2、5.4.3，可对淋病作出明确诊断。6.2
淋球菌阴性感染的报告
与5.3.1、5.3.2、5.3.3、5.4.2、5.4.3.各项均不符合，应报告为淋球菌阴性感染。书号：155066·2-29506
SN/T1248-2015
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