SN/T 4747.3-2017
基本信息
标准号： SN/T 4747.3-2017
中文名称：进出口食用动物大环内酯类药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
下载格式：.zip .pdf
下载大小：4889767
相关标签： 进出口 食用动物 大环内酯 类药物 残留量 测定 色谱 质谱 质谱法
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
SN/T 4747.3-2017.Determination of macrolide residues of live animals for import and export-LC-MS/MS.
1范围
SN/T 4747.3规定了进出口食用动物中红霉素、螺旋霉素替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素的检测方法。
SN/T 4747.3适用于出入境检验检疫工作中牛、羊、猪、鸡血清和牛、猪、羊尿液中红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉索的检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3试剂 和材料
3.1 甲醇:色谱纯。
3.2乙腈 :色谱纯。
3.3 叔丁基甲醚:分析纯。
3.4 磷酸氢二钠:分析纯。
3.5甲醇-水(1+1)定 容溶液:量取50 mL甲醇(3.1)和50 mL水混合均匀。
3.6标准物质:红霉素 、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素和内标物质罗红霉素(见附录A),纯度≥95%。
3.7标准储备液:0.1 mg/mL.称取3.6所述各标准物质,用甲醇分别配成0.1 mg/mL的标准储备溶液，一15℃~20℃保存。
1范围
SN/T 4747.3规定了进出口食用动物中红霉素、螺旋霉素替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素的检测方法。
SN/T 4747.3适用于出入境检验检疫工作中牛、羊、猪、鸡血清和牛、猪、羊尿液中红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉索的检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3试剂 和材料
3.1 甲醇:色谱纯。
3.2乙腈 :色谱纯。
3.3 叔丁基甲醚:分析纯。
3.4 磷酸氢二钠:分析纯。
3.5甲醇-水(1+1)定 容溶液:量取50 mL甲醇(3.1)和50 mL水混合均匀。
3.6标准物质:红霉素 、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素和内标物质罗红霉素(见附录A),纯度≥95%。
3.7标准储备液:0.1 mg/mL.称取3.6所述各标准物质,用甲醇分别配成0.1 mg/mL的标准储备溶液，一15℃~20℃保存。
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标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4747.3-2017
进出口食用动物大环内酯类药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of macrolide residues of live animals for import and export-LC-MS/MS
2017-05-12发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-12-01实施
本部分为SN/T4747系列标准的第3部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本部分主要起草人：宓捷波、李淑静、黄晨、王飞、张敏、许泓。SN/T4747.3—2017
1范围
进出口食用动物大环内酯类药物残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
SN/T4747.3—2017
SN/T4747的本部分规定了进出口食用动物中红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他莓素、竹桃霉素的检测方法本部分适用于出人境检验检疫工作中牛、羊、猪、鸡血清和牛、猪、羊尿液中红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素的检测。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3试剂和材料
甲醇：色谱纯。
乙：色谱纯。
叔丁基甲醚：分析纯。
磷酸氢二钠：分析纯。
甲醇-水（1+1）定容溶液：量取50mL甲醇（3.1)）和50mL水混合均匀。3.5
标准物质：红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素和内标物质罗红霉素（见附录A），纯度≥95%。3.7标准储备液：0.1mg/mL。称取3.6所述各标准物质，用甲醇分别配成0.1mg/mL的标准储备溶液，-15℃～20℃保存。
3.8混合标准工作溶液：1.0μg/mL。吸取3.7所述各标准储备溶液1mL于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，2℃~8℃保存。
3.9内标储备溶液：0.1mg/mL。称取1.0mg罗红霉素于10mL容量瓶中，用甲醇溶解定容至刻度，混匀。—15℃～-20℃保存。
3.10内标工作溶液：1.0pg/mL。吸取1mL3.9所述内标储备液于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。
3.11饱和磷酸氢二钠溶液：称取22g磷酸氢二钠，溶于100mL水中。3.1215mL具塞离心管。
3.130.22μm滤膜（有机系）。
3.14水：为GB/T6682规定的一级水。4仪器和设备
液相色谱串联质谱仪：配有电喷雾离子源。1
SN/T4747.3—2017
2天平：感量分别为0.01g和0.0001g。4.2
4.3氮吹浓缩仪。
高速冷冻离心机（最高转速可达30000g）。5样品的采集与保存
5.1血样的采集
采集动物血样，待自然凝固后分离血清，分装于小管，加盖密封。5.2尿样的采集
采集动物尿样，于4℃，30000g离心10min后，上清分装于小管，加盖密封。5.3
试样的保存
将分装后的血清、尿样于-15℃～一20℃保存。测定步骤
6.1提取
6.1.1血清试样
称取约1g血清（精确至0.01g）于50mL离心管中，加人50μL内标工作溶液（3.10），再加人2mL叔丁基甲醚，振荡3min，4℃18750g离心5min，取叔丁基甲醚层置于15mL离心管中，用2mL叔丁基甲醚重复提取2次，合并提取液，40℃水浴氮吹至近干，以1.0mL甲醇-水定容液（3.5）复溶，过0.22um滤膜，待测。
6.1.2尿样
称取约1g尿样（精确至0.01g），加人1mL饱和磷酸氢二钠溶液用以调节pH≥7.加人50μL内标工作溶液（3.10），再加人2mL叔丁基甲醚，振荡3min，4℃18750g离心5min，取叔丁基甲醚层置于15mL离心管中，用叔丁基甲醚重复提取2次，合并提取液，40℃士1℃水浴氮吹至近干，以1.0mL定容液（3.5）复溶，过0.22μm滤膜，待测。6.2基质工作曲线的配制
取空白试样，不加内标工作溶液（3.10），按6.1.1或6.1.2进行提取，获得基质提取液。分别吸取2.5μL、5.0μL、10μL、20μL、50μL混合标准工作溶液（3.8），依次加入相应试剂瓶中，再分别加入50μL内标工作溶液（3.10），用基质提取液定容至1.0mL，获得2.5ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL和50ng/mL的系列基质标准混合溶液。6.3测定条件
液相色谱参考条件
色谱柱：ZorbaxSB-Cg，3.5μm，2.1×150mm，或相当者。6.3.1.1
6.3.1.2流速：0.3mL/min。
3柱温箱温度：25℃士1℃。
4进样量：20pL。
流动相：0.15%甲酸水溶液（A）和乙睛（B）。梯度洗脱条件见表1。
梯度洗脱条件
时间/min
质谱条件
离子源：电喷雾离子源。
扫描方式：正离子扫描。
检测方式：多反应监测。
电喷雾电压：5500V。
气帘气压力：172.37kPa(25psi)。流动相A/%
辅助气压力：GS1：40psi;GS2：45psi。离子源温度：600℃。
定性离子对、定量离子对、去电压、碰撞能量，见表2。SN/T4747.3-2017
流动相B/%
7种大环内酯类抗生素定性离子对、定量离子对、去族电压、碰撞能量表2
被测物名称
红霉素
螺旋霉素
泰乐菌素
替米考星
交沙霏素
吉他薇素
竹桃霉素
为定量离子对。
保留时间
离子对（m/=）
734.5/576.5
734.5/158.3
843.4/174.0
843.4/142.1
916.5/174.1
916.5/772.6
869.6/174.2
869.6/696.4
828.4/174.1
828.4/109.0
772.3/174.2
772.3/215.2
688.4/158.2wwW.bzxz.Net
688.4/544.3
去族电压/V
碰撞能量/V
非商业性声明：所列质谱参数是在API4000十质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，1
并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。3
SN/T4747.3—2017
3液相色谱-串联质谱测定
6.3.3.1定性测定
在相同试验条件下，样品溶液中的被测物的保留时间与基质标准工作溶液中被测物的保留时间比值，偏差在土2.5%之内。并且，待测样品溶液中，被测物中各定性离子相对丰度与浓度接近的基质标准工作溶液中被测物的各定性离子相对丰度的比值，若偏差不超过表3规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。
表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度
允许的最大偏差
6.3.3.2定量测定
>20~50
>10~20
在相同的仪器工作条件下，用基质标准工作溶液分别进样，以各标准溶液中被测组分峰面积与内标物峰面积的比值为纵坐标，以各标准溶液被测组分浓度（ng/mL）与内标物浓度的比值为横坐标，绘制标准工作曲线。用基质标准工作曲线对样品进行定量，应使样品溶液中大环内酯类药物的响应值在仪器测定的线性范围内。在上述色谱和质谱条件下，大环内酯类药物的参考保留时间见表2。典型的提取离子色谱图参见附录B。
6.4空白试验
除不加试样和内标溶液外，均按上述操作步骤进行。7结果计算
各大环内酯类药物的含量用色谱数据处理软件内标法计算或按式（1)计算：1000
X=c××**m
式中：
X一试样中大环内酯类药物残留量，单位为微克每千克（ug/kg）；C
基质标准工作溶液中被测物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）：A
试样溶液中被测物的色谱峰面积；A
基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积；试样溶液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）：基质标准工作溶液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；A
基质标准工作液中内标物的色谱峰面积：A试样溶液中内标物的色谱峰面积；V一样液最终定容体积，单位为毫升（mL)；m
最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。计算结果应扣除空白值。
检测限和定量限、回收率和精密度8
检测限和定量限
SN/T4747.3—2017
本方法对血清和尿样中红霉素、螺旋霉素、泰勒菌素、交沙霉素、吉他霉素、替米考星、竹桃霉素的检测限为1.5g/kg，定量限为5μg/kg。2回收率和精密度
牛、猪、羊、鸡血清和牛、猪、羊尿液中7种大环内酯类药物的添加回收率和精密度参见附录C。5
SN/T4747.3—2017
附录A
（规范性附录）
标准物质的基本信息
7种大环内类标准物质的基本信息见表A.1。表A.17种大环内酯类标准物质的基本信息序号
化合物中英文名称
红霉素ABC混合物）
Erythromycin(mixtureA,B,C)
螺旋霉素
spiramycin
泰乐蘭素酒石酸盐
Tylosin tartrate
替米考星
tilmicosin
交沙霉素
josamycin
竹桃霉素磷酸盐
Oleandomycin phosphate
吉他霉素-水化合物
Kitasamycin hydrate
CAS编号
114-07-8
8025-81-8
74610-55-2
108050-54-0
16846-24-5
7060-74-4
1392-21-8
分子式
CoHsNOa
CaHuN,O
CueHnNO
CasHoN,Ou
CuHeNOis
CHnNO2
CoHeNOi
附录B
（资料性附录）
7种大环内酯类药物标准物质的多反应监测色谱图7种大环内酯类药物标准物质的多反应监测色谱图，见图B.1~图B.7。XICof +MRM(22pairs):869.6/174. 2 Da ID:Tilml-1 fnd
ample2(std)ofsN_test.wif.m
Time/min
红霉素标准物质的提取离子色谱图XICcf+MRM(22pairs):734.5/158.3DID:Eryth-2fromSamsa
XICof+MRM(22
aS:916.5/174DaID
e2 (std)af SNtest wi
Time/min
螺旋需素标准物质的提取离子色谱图JolSNtes
Timelmin
泰乐菌素标准物质的提取离子色谱图10.0
SN/T4747.3—2017
Max.1.5e4.cps.
Max.2.9eb.cps.
Max.9.6e4 cps
SN/T4747.3—2017
XICct+MRM(22pains).843.4/142.1DaID:Spir-2fromSample2(std)afsNtest.wi.
新##流家有盛按车#
替米考星标准物质的提取离子色谱图XICdf +MRM(22 pairs)828. 4/174.1 Da ID: Josa1from Sample2 (std)of SN_test.wif.L.8e
lime/min
交沙霉素标准物质的提取离子色谱图XICot+MRM(22pain):772.3/109.0DsD:Kita-1fromSample2(std)ofSN_testwfm5.26
5.000.0吨
Time/min
吉他霉素标准物质的提取离子色谱图FMRM(22pairs).688.4/158.1DaID:Olean-1frome
(std)afSN_test
Time/min
竹桃霉素标准物质的提取离子色谱图10.0
Max.3168.8.cps.
Max.1.8e5cps
Max.5.5e4cps
Max.1.6e5cps.
（资料性附录）
7种大环内酯类药物的添加浓度及平均回收率SN/T4747.3—2017
本方法中7种大环内酯类药物的添加浓度及平均回收率的实验数据，见表C.1~表C.4，表c.1
螺旋霉素
替米考星
吉他霉素
泰乐茵素
交沙霉素
竹桃霉素
红霉素
螺旋薇素
牛血清和尿样中7种大环内酯类药物的添加回收率和精密度添加浓度/
(μg/kg)
回收率
牛尿液
72%~102%
70.6%~98.5%
80%~95.5%
76%~108%
73%~105%
70.5%~101%
76%~109%
75.7%~106%
81%~101%
70.4%~97.2%
75.3%~106%
70.5%~97%
82%~106%
78%~97%
71%~93%
80%~99.8%
78.9%~100%
82%~98.5%
78%~99.4%
84.9%~94.8%
88%~107%
牛血清
回收率
87.4%~108.4%
75.4%~106%
86%~106%
80.2%~106%
83.1%~113%
84%~107%
86.6%~106.8%
89.2%~102%
84.5%~103.5%
87.2%~103.2%
86.3%~105%
79%~105%
73.2%~104.2%
82.3%~105%
84%~106%
78.4%~107.2%
83.5%~104%
81%~106.5%
80.8%~103.4%
85%~101%
87%~110%
猪血清和尿样中7种大环内酯类药物的添加回收率和精密度添加浓度/
(μg/kg)
回收率
猪尿液
74.8%~108.6%
74.8%~106%
77%~108%
84.2%~107.2%
73.9%~108%
85.5%~106%
回收率
猪血清
71%~106.2%
78.6%~109%
76.5%~108%
70.8%~106.4%
72.1%~104%
71%~110%
SN/T4747.3—2017
替米考星
吉他霉素
泰乐菌素
交沙霉素
竹桃霉素
添加浓度/
(μg/kg）
红霉素
螺旋莓素
替米考星
吉他霉素
泰乐菌素
交沙霉素
表C.2（续）
猪尿液
回收率
74.2%~104.4%
76.8%~103%
78%~101.5%
70.8%~91.6%
77%~98.5%
77%~97%
71.4%~104.2%
71%~99.8%
85.5%~103%
75%~99.8%
76.7%~94.6%
78.5%~98%
78.4%~107%
78%~109%
74%~106.5%
猪血清
回收率
72.6%~104.8%
74.8%~99.8%
76%~102.5%
72.2%~92%
71%~98.2%
71.5%~92.5%
70.4%~107.6%
87.7%~106%
70.5%~104%
71.6%~105.2%
84.6%~101%
84%~97%
81.6%~109.4%
76.7%~109%
74.5%~110%
羊血清和尿样中7种大环内酯类药物的添加回收率和精密度添加浓度/
(μg/kg）
羊尿液
回收率
87.4%~107.8%
89%~105%
85.5%~107.5%
78.2%~108.6%
79%~107%
89.7%~101%
79.2%~106%
85.4%~101%
88%~106.5%
86.2%~103%
87.3%~101%
85.5%~97.5%
86.6%~103.2%
77.6%~102%
82.2%~109%
75.4%~106.2%
85.1%~101%
82.5%~105.5%
羊血清
回收率
79.4%~106.8%
77.1%~102%
72.8%~106.8%
81.2%~108%
72%~105.5%
80.6%~110%
86.1%~111%
82%~107.5%
77%~107%
82.3%~107%
85.5%~103%
78.8%~101.6%
83.9%~108%
88%~109.5%
84.8%~108.6%
88.4%~107%
87%~105%
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进出口食用动物大环内酯类药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of macrolide residues of live animals for import and export-LC-MS/MS
2017-05-12发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-12-01实施
本部分为SN/T4747系列标准的第3部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本部分主要起草人：宓捷波、李淑静、黄晨、王飞、张敏、许泓。SN/T4747.3—2017
1范围
进出口食用动物大环内酯类药物残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
SN/T4747.3—2017
SN/T4747的本部分规定了进出口食用动物中红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他莓素、竹桃霉素的检测方法本部分适用于出人境检验检疫工作中牛、羊、猪、鸡血清和牛、猪、羊尿液中红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素的检测。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3试剂和材料
甲醇：色谱纯。
乙：色谱纯。
叔丁基甲醚：分析纯。
磷酸氢二钠：分析纯。
甲醇-水（1+1）定容溶液：量取50mL甲醇（3.1)）和50mL水混合均匀。3.5
标准物质：红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素和内标物质罗红霉素（见附录A），纯度≥95%。3.7标准储备液：0.1mg/mL。称取3.6所述各标准物质，用甲醇分别配成0.1mg/mL的标准储备溶液，-15℃～20℃保存。
3.8混合标准工作溶液：1.0μg/mL。吸取3.7所述各标准储备溶液1mL于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，2℃~8℃保存。
3.9内标储备溶液：0.1mg/mL。称取1.0mg罗红霉素于10mL容量瓶中，用甲醇溶解定容至刻度，混匀。—15℃～-20℃保存。
3.10内标工作溶液：1.0pg/mL。吸取1mL3.9所述内标储备液于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。
3.11饱和磷酸氢二钠溶液：称取22g磷酸氢二钠，溶于100mL水中。3.1215mL具塞离心管。
3.130.22μm滤膜（有机系）。
3.14水：为GB/T6682规定的一级水。4仪器和设备
液相色谱串联质谱仪：配有电喷雾离子源。1
SN/T4747.3—2017
2天平：感量分别为0.01g和0.0001g。4.2
4.3氮吹浓缩仪。
高速冷冻离心机（最高转速可达30000g）。5样品的采集与保存
5.1血样的采集
采集动物血样，待自然凝固后分离血清，分装于小管，加盖密封。5.2尿样的采集
采集动物尿样，于4℃，30000g离心10min后，上清分装于小管，加盖密封。5.3
试样的保存
将分装后的血清、尿样于-15℃～一20℃保存。测定步骤
6.1提取
6.1.1血清试样
称取约1g血清（精确至0.01g）于50mL离心管中，加人50μL内标工作溶液（3.10），再加人2mL叔丁基甲醚，振荡3min，4℃18750g离心5min，取叔丁基甲醚层置于15mL离心管中，用2mL叔丁基甲醚重复提取2次，合并提取液，40℃水浴氮吹至近干，以1.0mL甲醇-水定容液（3.5）复溶，过0.22um滤膜，待测。
6.1.2尿样
称取约1g尿样（精确至0.01g），加人1mL饱和磷酸氢二钠溶液用以调节pH≥7.加人50μL内标工作溶液（3.10），再加人2mL叔丁基甲醚，振荡3min，4℃18750g离心5min，取叔丁基甲醚层置于15mL离心管中，用叔丁基甲醚重复提取2次，合并提取液，40℃士1℃水浴氮吹至近干，以1.0mL定容液（3.5）复溶，过0.22μm滤膜，待测。6.2基质工作曲线的配制
取空白试样，不加内标工作溶液（3.10），按6.1.1或6.1.2进行提取，获得基质提取液。分别吸取2.5μL、5.0μL、10μL、20μL、50μL混合标准工作溶液（3.8），依次加入相应试剂瓶中，再分别加入50μL内标工作溶液（3.10），用基质提取液定容至1.0mL，获得2.5ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL和50ng/mL的系列基质标准混合溶液。6.3测定条件
液相色谱参考条件
色谱柱：ZorbaxSB-Cg，3.5μm，2.1×150mm，或相当者。6.3.1.1
6.3.1.2流速：0.3mL/min。
3柱温箱温度：25℃士1℃。
4进样量：20pL。
流动相：0.15%甲酸水溶液（A）和乙睛（B）。梯度洗脱条件见表1。
梯度洗脱条件
时间/min
质谱条件
离子源：电喷雾离子源。
扫描方式：正离子扫描。
检测方式：多反应监测。
电喷雾电压：5500V。
气帘气压力：172.37kPa(25psi)。流动相A/%
辅助气压力：GS1：40psi;GS2：45psi。离子源温度：600℃。
定性离子对、定量离子对、去电压、碰撞能量，见表2。SN/T4747.3-2017
流动相B/%
7种大环内酯类抗生素定性离子对、定量离子对、去族电压、碰撞能量表2
被测物名称
红霉素
螺旋霉素
泰乐菌素
替米考星
交沙霏素
吉他薇素
竹桃霉素
为定量离子对。
保留时间
离子对（m/=）
734.5/576.5
734.5/158.3
843.4/174.0
843.4/142.1
916.5/174.1
916.5/772.6
869.6/174.2
869.6/696.4
828.4/174.1
828.4/109.0
772.3/174.2
772.3/215.2
688.4/158.2wwW.bzxz.Net
688.4/544.3
去族电压/V
碰撞能量/V
非商业性声明：所列质谱参数是在API4000十质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，1
并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。3
SN/T4747.3—2017
3液相色谱-串联质谱测定
6.3.3.1定性测定
在相同试验条件下，样品溶液中的被测物的保留时间与基质标准工作溶液中被测物的保留时间比值，偏差在土2.5%之内。并且，待测样品溶液中，被测物中各定性离子相对丰度与浓度接近的基质标准工作溶液中被测物的各定性离子相对丰度的比值，若偏差不超过表3规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。
表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度
允许的最大偏差
6.3.3.2定量测定
>20~50
>10~20
在相同的仪器工作条件下，用基质标准工作溶液分别进样，以各标准溶液中被测组分峰面积与内标物峰面积的比值为纵坐标，以各标准溶液被测组分浓度（ng/mL）与内标物浓度的比值为横坐标，绘制标准工作曲线。用基质标准工作曲线对样品进行定量，应使样品溶液中大环内酯类药物的响应值在仪器测定的线性范围内。在上述色谱和质谱条件下，大环内酯类药物的参考保留时间见表2。典型的提取离子色谱图参见附录B。
6.4空白试验
除不加试样和内标溶液外，均按上述操作步骤进行。7结果计算
各大环内酯类药物的含量用色谱数据处理软件内标法计算或按式（1)计算：1000
X=c××**m
式中：
X一试样中大环内酯类药物残留量，单位为微克每千克（ug/kg）；C
基质标准工作溶液中被测物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）：A
试样溶液中被测物的色谱峰面积；A
基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积；试样溶液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）：基质标准工作溶液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；A
基质标准工作液中内标物的色谱峰面积：A试样溶液中内标物的色谱峰面积；V一样液最终定容体积，单位为毫升（mL)；m
最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。计算结果应扣除空白值。
检测限和定量限、回收率和精密度8
检测限和定量限
SN/T4747.3—2017
本方法对血清和尿样中红霉素、螺旋霉素、泰勒菌素、交沙霉素、吉他霉素、替米考星、竹桃霉素的检测限为1.5g/kg，定量限为5μg/kg。2回收率和精密度
牛、猪、羊、鸡血清和牛、猪、羊尿液中7种大环内酯类药物的添加回收率和精密度参见附录C。5
SN/T4747.3—2017
附录A
（规范性附录）
标准物质的基本信息
7种大环内类标准物质的基本信息见表A.1。表A.17种大环内酯类标准物质的基本信息序号
化合物中英文名称
红霉素ABC混合物）
Erythromycin(mixtureA,B,C)
螺旋霉素
spiramycin
泰乐蘭素酒石酸盐
Tylosin tartrate
替米考星
tilmicosin
交沙霉素
josamycin
竹桃霉素磷酸盐
Oleandomycin phosphate
吉他霉素-水化合物
Kitasamycin hydrate
CAS编号
114-07-8
8025-81-8
74610-55-2
108050-54-0
16846-24-5
7060-74-4
1392-21-8
分子式
CoHsNOa
CaHuN,O
CueHnNO
CasHoN,Ou
CuHeNOis
CHnNO2
CoHeNOi
附录B
（资料性附录）
7种大环内酯类药物标准物质的多反应监测色谱图7种大环内酯类药物标准物质的多反应监测色谱图，见图B.1~图B.7。XICof +MRM(22pairs):869.6/174. 2 Da ID:Tilml-1 fnd
ample2(std)ofsN_test.wif.m
Time/min
红霉素标准物质的提取离子色谱图XICcf+MRM(22pairs):734.5/158.3DID:Eryth-2fromSamsa
XICof+MRM(22
aS:916.5/174DaID
e2 (std)af SNtest wi
Time/min
螺旋需素标准物质的提取离子色谱图JolSNtes
Timelmin
泰乐菌素标准物质的提取离子色谱图10.0
SN/T4747.3—2017
Max.1.5e4.cps.
Max.2.9eb.cps.
Max.9.6e4 cps
SN/T4747.3—2017
XICct+MRM(22pains).843.4/142.1DaID:Spir-2fromSample2(std)afsNtest.wi.
新##流家有盛按车#
替米考星标准物质的提取离子色谱图XICdf +MRM(22 pairs)828. 4/174.1 Da ID: Josa1from Sample2 (std)of SN_test.wif.L.8e
lime/min
交沙霉素标准物质的提取离子色谱图XICot+MRM(22pain):772.3/109.0DsD:Kita-1fromSample2(std)ofSN_testwfm5.26
5.000.0吨
Time/min
吉他霉素标准物质的提取离子色谱图FMRM(22pairs).688.4/158.1DaID:Olean-1frome
(std)afSN_test
Time/min
竹桃霉素标准物质的提取离子色谱图10.0
Max.3168.8.cps.
Max.1.8e5cps
Max.5.5e4cps
Max.1.6e5cps.
（资料性附录）
7种大环内酯类药物的添加浓度及平均回收率SN/T4747.3—2017
本方法中7种大环内酯类药物的添加浓度及平均回收率的实验数据，见表C.1~表C.4，表c.1
螺旋霉素
替米考星
吉他霉素
泰乐茵素
交沙霉素
竹桃霉素
红霉素
螺旋薇素
牛血清和尿样中7种大环内酯类药物的添加回收率和精密度添加浓度/
(μg/kg)
回收率
牛尿液
72%~102%
70.6%~98.5%
80%~95.5%
76%~108%
73%~105%
70.5%~101%
76%~109%
75.7%~106%
81%~101%
70.4%~97.2%
75.3%~106%
70.5%~97%
82%~106%
78%~97%
71%~93%
80%~99.8%
78.9%~100%
82%~98.5%
78%~99.4%
84.9%~94.8%
88%~107%
牛血清
回收率
87.4%~108.4%
75.4%~106%
86%~106%
80.2%~106%
83.1%~113%
84%~107%
86.6%~106.8%
89.2%~102%
84.5%~103.5%
87.2%~103.2%
86.3%~105%
79%~105%
73.2%~104.2%
82.3%~105%
84%~106%
78.4%~107.2%
83.5%~104%
81%~106.5%
80.8%~103.4%
85%~101%
87%~110%
猪血清和尿样中7种大环内酯类药物的添加回收率和精密度添加浓度/
(μg/kg)
回收率
猪尿液
74.8%~108.6%
74.8%~106%
77%~108%
84.2%~107.2%
73.9%~108%
85.5%~106%
回收率
猪血清
71%~106.2%
78.6%~109%
76.5%~108%
70.8%~106.4%
72.1%~104%
71%~110%
SN/T4747.3—2017
替米考星
吉他霉素
泰乐菌素
交沙霉素
竹桃霉素
添加浓度/
(μg/kg）
红霉素
螺旋莓素
替米考星
吉他霉素
泰乐菌素
交沙霉素
表C.2（续）
猪尿液
回收率
74.2%~104.4%
76.8%~103%
78%~101.5%
70.8%~91.6%
77%~98.5%
77%~97%
71.4%~104.2%
71%~99.8%
85.5%~103%
75%~99.8%
76.7%~94.6%
78.5%~98%
78.4%~107%
78%~109%
74%~106.5%
猪血清
回收率
72.6%~104.8%
74.8%~99.8%
76%~102.5%
72.2%~92%
71%~98.2%
71.5%~92.5%
70.4%~107.6%
87.7%~106%
70.5%~104%
71.6%~105.2%
84.6%~101%
84%~97%
81.6%~109.4%
76.7%~109%
74.5%~110%
羊血清和尿样中7种大环内酯类药物的添加回收率和精密度添加浓度/
(μg/kg）
羊尿液
回收率
87.4%~107.8%
89%~105%
85.5%~107.5%
78.2%~108.6%
79%~107%
89.7%~101%
79.2%~106%
85.4%~101%
88%~106.5%
86.2%~103%
87.3%~101%
85.5%~97.5%
86.6%~103.2%
77.6%~102%
82.2%~109%
75.4%~106.2%
85.1%~101%
82.5%~105.5%
羊血清
回收率
79.4%~106.8%
77.1%~102%
72.8%~106.8%
81.2%~108%
72%~105.5%
80.6%~110%
86.1%~111%
82%~107.5%
77%~107%
82.3%~107%
85.5%~103%
78.8%~101.6%
83.9%~108%
88%~109.5%
84.8%~108.6%
88.4%~107%
87%~105%
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