中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0684-2011 代替 SN/T 0684-1997 出口肉及肉制品中奥芬哒唑、芬苯哒唑、苯硫胍及奥芬哒唑砜残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of oxfendazole, fenbendazole, febantel and oxfendazole sulphoneresidues in meat and meat products for export-HPLC-MS/MS method 2011-09-09 发布，2012-04-01 实施 前言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 本标准代替 SN/T 0684-1997《出口肉及肉制品中奥芬哒唑残留量检验方法》。与 SN/T 0684-1997 相比主要修改如下： 对标准的名称进行了修改； 增加了检测项目，除奥芬哒唑外，还包括了芬苯哒唑、苯硫胍及奥芬哒唑砜；检测方法由液相色谱法改为液相色谱-质谱/质谱法；修改了奥芬哒唑检验结果的表述，奥芬哒唑、芬苯哒唑、苯硫胍的检验结果均以可能被氧化成奥芬哒唑砜的可萃取残留总量计。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本标准主要起草人：郭德华、邓晓军、韩丽、盛永刚、伊雄海、赵善贞。本标准于1997年首次发布，本次为第一次修订。 1 范围 本标准规定了出口肉及肉制品中奥芬哒唑、芬苯哒唑、苯硫胍和奥芬哒唑砜残留量的测定方法。本标准适用于牛肉、猪肝、午餐肉中奥芬哒唑、芬苯哒唑、苯硫胍和奥芬哒唑砜残留量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样以盐酸乙腈混合溶液提取、正己烷脱脂离心，吸取部分下层溶液并调节 pH 值到 8～9，再用乙酸乙酯提取，旋转蒸干后，用液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量。 4 试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 4.1 正己烷。 4.2 异丙醇。 4.3 甲醇：色谱纯。 4.4 乙腈：色谱纯。 4.5 乙酸乙酯：色谱纯。 4.6 25% 氨水。 4.7 N,N-二甲基甲酰胺：色谱纯。 4.8 N,N-二甲基甲酰胺-甲醇混合溶液：水-N,N-二甲基甲酰胺-甲醇溶液（7:2:1，体积比）。 4.9 浓盐酸：36%，密度为 1.18 g/L。 4.10 1 mol/L 盐酸：量取浓盐酸 83 mL，加水稀释至 1000 mL。 4.11 0.75 mol/L 盐酸乙腈溶液：乙腈-1 mol/L 盐酸溶液（1:3，体积比）。 4.12 标准品：奥芬哒唑（oxfendazole，CAS号53716-50-0）、芬苯哒唑（fenbendazole，CAS号43210-67-9）、奥芬哒唑砜（oxfendazole sulphone，CAS号54029-20-8）、苯硫胍（febantel，CAS号58306-30-2），纯度均大于 99%。 4.13 芬苯哒唑-d3 标准品：甲酯位的 3 个 H 被 D 取代，纯度大于 99%。 标准储备液：分别称取适量奥芬哒唑、芬苯哒唑、奥芬哒唑砜、苯硫胍、芬苯哒唑-d3，用 10 mL N,N-二甲基甲酰胺溶解后，再用甲醇定为 100 $\mu$g/mL，0℃~4℃ 保存，有效期 6 个月。 4.15 标准工作溶液：根据需要，用乙腈-水溶液（2:8，体积比）将奥芬哒唑、芬苯哒唑、奥芬哒唑砜、苯硫胍标准储备液配成供液相色谱-串联质谱测定用的浓度为 5 $\mu$g/L、10 $\mu$g/L、50 $\mu$g/L、100 $\mu$g/L、200 $\mu$g/L 的混合标准工作溶液。其中同位素内标芬苯哒唑-d3 浓度均为 10.0 $\mu$g/L，混合标准工作溶液使用前配制。 4.16 滤膜：0.2 $\mu$m，有机相。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾离子源。 5.2 均质器。 5.3 pH 计。 5.4 涡旋振荡器。 5.5 离心机：4000 r/min。 5.6 旋转蒸发仪。 5.7 超声波水浴。 5.8 分析天平：感量 0.1 mg，0.01 mg。 6 试样制备与保存 制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 代表性样品：可食部分约 500 g，用组织破碎机充分破碎均质，装入洁净容器中，密封，并标明标记，于 -18℃ 以下冷藏存放。 7 测定步骤 7.1 提取和净化