SN/T4087—2014 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 狂犬病检疫技术规范 Quarantine protocol for rabies 2014-11-19发布 国家质量监督检验检疫总局 2015-05-01实施 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中国兽医药品监察所、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国广东出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：高志强、李宁、高峰、张伟、张鹤晓、吴晓薇、刘环、马贵平、朱事康、谷强、蒲静乔、彩霞、张利峰、汪琳、凌凤俊、尹羿。 1 范围 本标准规定了狂犬病病毒分离鉴定，血清学检测及核酸检测的技术方法。本标准适用于狂犬病的检验检疫。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 19489 实验室生物安全通用要求 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CNS：中枢神经系统（Central nervous system） cDNA：互补DNA（Complementary DNA） DEPC：焦碳酸二乙酯（Diethylpyrocarbonate） DMEM：杜氏改良培养基（Dulbecco's modified Eagle's medium） DMEM-5：含5%灭活胎牛血清的杜氏改良培养基（Dulbecco's modified Eagle's medium supplemented with 5% fetal bovine serum） DMEM-2：含2%灭活胎牛血清的杜氏改良培养基（Dulbecco's modified Eagle's medium supplemented with 2% fetal bovine serum） DMEM-10：含10%灭活胎牛血清的杜氏改良培养基（Dulbecco's modified Eagle's medium supplemented with 10% fetal bovine serum） dNTP：脱氧核苷三磷酸（Deoxyribonucleoside triphosphate） FAT：荧光抗体试验（Fluorescent antibody test） M-MLV：莫洛尼鼠类白血病病毒（Moloney murine leukemia virus） PBS：磷酸盐缓冲盐水（Phosphate buffered saline） RT-PCR：反转录-聚合酶链反应（Reverse transcription-polymerase chain reaction） SPF：无特定病原体（Specific pathogen free） VN：病毒中和试验（Virus neutralisation） Taq酶：Taq DNA聚合酶（Taq DNA polymerase） 4 临床诊断 4.1 流行病学 几乎所有的温血动物都对狂犬病病毒易感，但在自然界中，易感动物主要是犬科、猫科及鼬科动物。野生动物也是狂犬病病毒的自然贮存宿主。其中如狐狸、狼、豹类、熊、臭鼬、鼠、猫、鼬等多以健康带毒，动物感染狂犬病病毒后，均可成为传染源；猪、牛、马等家畜也可感染狂犬病病毒（多无临床症状，但血检呈阳性）。在发达国家，人的狂犬病主要来源于犬狂犬病，有80%～90%的人狂犬病是由疯犬咬伤所引起，而少数病例来自野生动物，野生动物在感染狂犬病病毒后多数动物发病后死亡，部分动物病后恢复转为病毒携带者。中国人兽狂犬病的传染源中，犬占85%～95%，猫占4%左右，狼与其他野生动物和家畜也可造成狂犬病的传播。 狂犬病病毒的传染主要通过破损皮肤和黏膜。在已感染动物的唾液腺中，病毒含量极高，唾液中的病毒通过动物啃咬和舔舐进入人机体，有些情况下，即使未发现的伤口也可成为病毒侵人的途径。人感染狂犬病最常见的方式是通过感染狂犬病的犬、猫、野生动物以及吸血蝠的咬伤、抓、舔皮肤或黏膜，从而使狂犬病病毒侵入人体，之后经神经末梢上行进入中枢神经系统。发病时，人首先感到不安，头晕、流涎、多泪、瞳孔放大，吞咽时痛，发热，侵入部位有刺痛感，继而出现神经兴奋性增强，脉速增加，咽喉肌肉发生痉挛，见水或其他轻微刺激可引起发作。最后转入麻痹、昏迷、呼吸及循环衰竭而死亡，病程大约5d～7d。此外，病毒还可以通过呼吸道传染或通过气溶胶传播。 4.2 临床症状 本病的潜伏期从数天、数月到数年不等。潜伏期的长度与咬伤位置、创伤严重性、病毒毒力以及宿主抵抗力相关，伤口在头部和神经丰富的部位，潜伏期通常较短。