SN/T 4321-2015.Food contact materials-Polymer-Determination of bis (2 ,6-diisopropylphenyl) carbodiimide in food simulants-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry.
1范围
SN/T 4321规定了食品模拟物中N,N'-二(2,6-二异丙基苯基)碳二亚胺的液相色谱-质谱/质谱测定方法。
SN/T 4321适用于3%(质量浓度)乙酸、10%(体积分数)乙醇溶液20%(体积分数)乙醇溶液、50%(体积分数)乙醇溶液和橄榄油五种食品模拟物中N,N'-二(2,6-二异丙基苯基)碳二亚胺含量的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 23296.1食品接触材料塑料中受限物质塑料中物质向食品及食 品模拟物特定迁移试验和含量测定方法以及食品模拟物暴露条件选择的指南
3方法提要
样品经食品模拟物浸泡后，取一定量食品模拟物试液(其中橄榄油试液需进行超声辅助液液萃取)，在弱酸性条件下N,N'-二(2,6-异丙基苯基)碳二亚胺与水反应生成相应的脲衍生物，通过采用液相色谱-质谱/质谱仪测定脲衍生物的含量来间接测定N ,N'-二(2,6-二异丙基苯基)碳二亚胺的含量,外标法定量。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4321—2015
食品接触材料
高分子材料
食品模拟物中N,N'-二
（2.6-二异丙基苯基）碳二亚胺的测定液相色谱-质谱/质谱法
Food contact materialsPolymer-Determination of bis(2,6-disopropylphenyl)carbodiimidein food simulants-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry2015-09-02发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2016-04-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局，本标准主要起草人：韩伟、于艳军、熊中强、胡新功、张颖、杜宇。SN/T4321-2015
1范围
食品接触材料高分子材料
食品模拟物中N,N'-二
（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺的测定液相色谱-质谱/质谱法
SN/T4321—2015
本标准规定了食品模拟物中N，N-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺的液相色谱-质谱/质谱测定方法。
本标准适用于3%（质量浓度）乙酸、10%（体积分数）乙醇溶液20%（体积分数）乙醇溶液、50%（体积分数）乙醇溶液和橄榄油五种食品模拟物中N.N-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺含量的测定。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T23296.1食品接触材料
塑料中受限物
暴露条件选择的指南
验和含量测定方法以及食品模拟物3方法提要
塑料中物质向食品及食品模拟物特定迁移试样品经食品模拟物浸泡后，取一定量食品模拟物试液（其中橄榄油试液需进行超声辅助液液萃取），在弱酸性条件下N，N-二（2，6-二异丙基碳二亚胺与水反应生成相应的脲衍生物，通过采用液相色谱-质谱/质谱仪测定脲衍生物的含量来间接测定N，N'-二（2.6-标法定量。
4试剂和材料
异丙基苯基）碳二亚胺的含量，外除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。4.1N，N'-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺［bis（2，6-disopropylphenyl）carbodimide］标准品，CAS号：[2162-74-5]，纯度≥98.0%。4.2
冰乙酸。
4.3无水乙醇。
乙腈：色谱纯。
甲醇：色谱纯。
甲酸：色谱纯。
食品模拟物，根据要求从以下模拟物中选择若干种进行迁移试验：a）3%（质量-体积浓度）乙酸溶液：称取30.0g（精确到0.1g）冰乙酸（4.2），用水稀释并转移到1L1
SN/T4321—2015
容量瓶中，水定容至刻度。
b）10%（体积分数）乙醇溶液：量取100mL无水乙醇（4.3）于1L容量瓶中，水定容至刻度。20%（体积分数）乙醇溶液：量取200mL无水乙醇（4.3）于1L容量瓶中，水定容至刻度。c)
50%（体积分数）乙醇溶液：量取500mL无水乙醇（4.3）于1L容量瓶中，水定容至刻度。d)
精制橄榄油。
4.8甲醇-水混合液（1+1，体积比）：量取100mL甲醇（4.5）和100mL二级水，混匀。4.9N,N'-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺标准储备液：准确称取N,N'-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺0.05g（精确至0.1mg），使用甲醇溶解并转移至500mL棕色容量瓶中后用甲醇（4.5）定容至刻度充分混匀，得到浓度为100mg/L的标准储备液，4℃下保存，备用。4.10N,N-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺标准中间液：移取N,N-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺标准储备液（4.9)10mL于100mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.5）定容至刻度，得到浓度为10mg/L的标准中间液，4℃下保存，备用。
4.11微孔滤膜：孔径0.2μm。
5仪器和设备
液相色谱串联四级杆质谱仪（LC-MS/MS）：配有电喷雾离子源（ESI源）。5.2
超声波萃取仪。
具塞试管：10mL。
注射器：2mL。
微量注射器：10μL，100μL，1000μL。分析天平：感量0.1mg和0.01g。6试液的制备
标准工作溶液的制备
6.1.1水基食品模拟物标准工作溶液用微量注射器分别准确量取10μL、20μL、50μL、100μL、500μL、1000μL的NN-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺标准中间液（4.10)于6个10mL容量瓶中，分别在每个容量瓶中加人0.1mL的甲酸（4.6），再分别用迁移试验中选用的水基食品模拟物定容，摇匀后室温下静置24h，得到相应介质中N,N-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物的浓度分别为0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.10mg/L、0.50mg/L、1.0mg/L的标准工作溶液。6.1.2橄榄油标准工作溶液
分别准确称取2g（精确至0.01g)橄榄油至6个具塞试管中，用微量注射器分别移取2μL、4μL、10μL、20μL、40μL、100μL的N,N-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺标准中间液（4.10）于试管中，得到浓度分别为0.01mg/kg、0.02mg/kg、0.05mg/kg、0.10mg/kg、0.20mg/kg、0.50mg/kg的标准工作溶液。分别在每个试管中加人4mL甲醇-水混合液（4.8）和40μL的甲酸（4.6），40℃超声提取30min后，静置分层，用注射器吸取下层水溶液，得到不同浓度的脲衍生物标准工作溶液，经0.2μm滤膜过滤后，供液相色谱-质谱/质谱测定。2
6.2食品模拟物试液的制备
6.2.1试样预处理
清洁剂洗净试样，用自来水冲洗干净，再用超纯水冲洗三遍后晾干，备用。6.2.2迁移实验
SN/T4321—2015
根据待测样品的预期用途和使用条件，按GB/T23296.1的迁移试验方法及试验条件，用适当的模拟物（4.7)进行N,N-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺的迁移试验。6.2.3食品模拟物试液的处理
对于水基食品模拟物试液，根据模拟液实际体积加人适量甲酸（4.6），使其浓度为1%，然后摇勾静置24h。取适量模拟液经0.2μm滤膜过滤后，供液相色谱质谱仪检测。对于橄榄油试液，称取2.0g（精确至0.01g）橄榄油试液于10mL具塞玻璃试管中，加人4mL甲醇-水混合液（4.8）和40μL的甲酸（4.6），在40℃超声提取30min后，静置分层，用注射器吸取下层水溶液，经0.2μm滤膜过滤后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。
空白试液的制备
按照6.2的操作处理未与食品接触材料接触的食品模拟物。7定量测定
仪器参考条件
由于测试结果取决于所使用仪器，因此不可能给出液相色谱-质谱/质谱分析的通用参数。设定的参数应保证色谱测定时被测组分与其他组分能够得到有效的分离，下列给出的参数证明是可行的：a）
色谱柱：Cls柱，柱长50mm，内径2.1mm，填料粒径1.9μm或相当者。b)
流动相：水（0.1甲酸）+乙腈（30+70，体积比）。c)
流速：0.2mL/min。
柱温：25℃。
进样量：5uL。
离子源：电喷雾离子源（ESI）。离子模式：正离子模式。
检测方式：多反应监测（MRM）。定性离子对：380.99→296.71。定量离子对：380.99-254.85。
其他质谱参数参见附录A。
2绘制标准工作曲线
按照7.1所列测定条件，对标准工作溶液（6.1）进行检测。以食品模拟物标准工作液中N，N-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物浓度为横坐标，单位以毫克每千克或毫克每升（mg/kg或者mg/L)表示，以对应的峰面积平均值为纵坐标，绘制标准工作曲线。食品模拟物中N,N-二（2，6-二异内基苯基）碳二亚胺脲衍生物的总离子流图参见附录B。3
SN/T4321—2015
7.3液相色谱质谱分析及阳性结果确证按照上述液相色谱-质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液，如果样品的质量色谱峰保留时间与标准品一致，所有选择离子均应出现，则根据定性选择离子对的种类及其相对丰度比，对其进行阳性确证。定性时，其相对丰度允许偏差不超过表1规定的范围，则可判定样品中存在对应的被测物。表1#
定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%
允许的相对偏差/%
>20~50
对标准样品和食品模拟物试液依次进样，得到N.N-二（2，6->10~20
异丙基苯基)碳二亚胺衍生物色
谱峰面积，每个溶液平行进样两次，计算峰面积平均值。在检测标准样品与测试样品的整个过程中确保操作条件一致。采用外标法定量7.4试液测定
对空白试液（6.3）和食品模拟物试液（6.2)按照8结果计算
水基食品模拟物中N.N-二（26-
水基食品模拟物中N，N'-二（2，可由式(1)计算：
式中：
食品模拟物中NN
试液中N,N'-二（2，
2～7.3的步骤等体积进样进行测定。异内基苯基）碳二亚胺浓度的计算异丙基苯基）碳二亚胺的含量可由计算机工作站直接计算，也X
（2.6-二异丙基苯基）碳
二异丙基苯基）碳
亚胺的含量，单位为毫克每升（mg/L）；亚胺腺衍生物的峰面积；
-二异丙基米基）碳二亚胺脲衍生物的峰面积；空白液中N,N-二（2.6-
标准工作溶液中N.N
丙基苯基）础
胺脲衍生物的峰面积；
标准工作溶液中N，N'-二（26-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物的浓度，单位为毫克每升(mg/L)。
橄榄油食品模拟物中N,N-二（2,6-二异丙基苯基）碳二亚胺浓度的计算橄榄食品模拟物中N，N'-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺的含量可由计算机工作站直接计算，也可由式（2)计算：
式中：
X_(A-A)×c×m2
...(2)
食品模拟物中N，N-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；试液中N,N-二（26-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物的峰面积；空白液中N，N-二（2.6-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物的峰面积：9
SN/T4321—2015
—标准工作溶液中N，N'-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物的峰面积；A.
标准工作溶液中N，N'-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物的浓度，单位为毫克每千克（mg/kg）：
称取待验样品橄榄油食品模拟物的质量，单位为克（g）；配制橄榄油标准工作溶液时称取橄榄油食品模拟物的质量，单位为克（g）。计算结果以平行测定值的算术平均值表示，保留三位有效数字。测定低限
不同模拟物中N，N-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺的测定低限如表2所示。
水基食品模拟物和橄榄油中N.N-二（2.6-二异丙基苯基）碳二亚胺的测定低限表2
食品模拟物种类
测定低限
重复性
10%（体积分数）
3%（质量浓度）
20%（体积分数）
0.008mg/L
50%（体积分数）
0.003mg/L
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。S
橄榄油
0.03mg/kg
SN/T4321—2015
喷雾电压：4000V。bZxz.net
鞘气气流：30psi。
辅气气流：45L/min。
（资料性附录）
ThermoTSQQuantumAccess质谱条件）离子传输杆温度：350℃。
碰撞能量（380.99→296.71)：21V。碰撞能量（380.99→254.85）：26V。1）非商业性声明：附录A所列参数是在ThermoTSQQuantumAccess质谱仪上完成的，此处列出的试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。6
说明：
附录B
(资料性附录）
SN/T4321—2015
食品模拟物中N，N-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物的总离子流图RT:0.00-4.99
1.491.601.77
0.120.360.590.820.94
2.933.073.193.543.87
4.324.604.72
时间/min
-N,N'-二(2,6-二异丙基苯基)碳二亚胺脲衍生物。3.0
图B.1食品模拟物中N，N'-二（2，6-二异丙基苯基）碳二亚胺脲衍生物的总离子流图
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