中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4401.1—2015 临床检验标本中毒品成分的定性及定量分析方法 第1部分：氯胺酮 Methods of qualitative and quantitative analysis for drug in clinical sample-Part 1: Ketamine 前言 SN/T4401《临床检验标本中毒品成分的定性及定量分析方法》分为4部分：第1部分：氯胺酮；第2部分：甲基苯丙胺类毒品；第3部分：吗啡类毒品；第4部分：大麻类毒品。本部分为SN/T4401的第1部分。 本部分按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国福建出入境检验检疫局。本部分主要起草人：高博、曹洁、张建明、蔡怡珊、黄恩炯、肖武。 1 范围 本部分规定了人体尿液和血清中氯胺酮的三种测定方法，即气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/MS）、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS）和气相色谱法（包括配氢火焰离子化检测器GC-FID，配氮磷检测器GC-NPD）。 本部分适用于人体尿液和血清中氯胺酮的定量测定；其中，气相色谱-质谱/质谱法、液相色谱-质谱/质谱法同时适用于人体尿液和血清中氯胺酮的定性确证。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/MS） 3.1 原理 试样在碱性条件下，用乙酸乙酯提取生物检材中的氯胺酮，采用多反应监测质谱扫描模式（MRM），用化合物的保留时间和质谱特征碎片离子丰度比定性，外标法定量。 3.2 试剂与材料 3.2.1 实验用水为GB/T 6682规定的二级水。 3.2.2 氢氧化钠：分析纯。 3.2.3 甲醇：色谱纯。 3.2.4 乙酸乙酯：分析纯。 3.2.5 氯胺酮标准品：CAS 6740-88-1，纯度>99.0%。 3.2.6 氯胺酮标准储备液：准确称取10mg（精确到0.1mg）盐酸氯胺酮标准品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/mL标准样品储备液。于-18℃以下冰箱中避光保存一年。试验中根据需要稀释使用。 3.2.7 氨气：纯度≥99.999%。 3.2.8 氮气：纯度≥99.999%。 3.3 仪器及器材 3.3.1 气相色谱-质谱/质谱（GC-MS/MS）仪：配有电子轰击电离离子源（EI）。 3.3.2 氮气吹干仪。 3.3.3 离心机：转速不低于4000r/min。 3.3.4 分析天平：感量0.1mg。 3.3.5 超声波水浴。 3.3.6 涡旋混合器。 3.3.7 实验室常用玻璃器材。 3.4 样品前处理 取尿液或血清1mL置于10mL具塞离心管中，用4mol/L氢氧化钠调pH至13，用2mL乙酸乙酯分别萃取两次，以10000r/min离心3min，有机层合并转移至另一试管中，于40℃下氮气吹干，残留物用200μL甲醇溶解，取1μL进GC-MS/MS分析。 3.5 气相色谱-质谱/质谱测定 3.5.1 仪器参考条件 a) 色谱柱：5%苯基甲基聚硅氧烷石英毛细管柱，30m×0.25mm（内径）×0.25μm，或相当者。 b) 流速：1.0mL/min。 c) 程序柱温：120℃保持1min，以20℃/min的速率升温至250℃，保持1min。 d) 进样口温度：250℃。 e) 接口温度：280℃。 f) 进样方式：分流。分流比：10:1。进样量：1μL。 g) 电离方式：电子轰击电离（EI）。电离能量：70eV。 h) 离子源温度：230℃。 i) 四极杆温度：150℃。 j) 碰撞气：氮气。 k) 扫描方式：多反应监测（MRM），定量离子m/z 180>116.1（最优碰撞能量25V），定性离子m/z 180>151（最优碰撞能量10V），m/z 180>145.1（最优碰撞能量10V）。 3.5.2 标准曲线的绘制 取空白样品按照3.4处理。用所得的样品溶液将氯胺酮标准储备液（3.2.6）逐级稀释得到的浓度为0.5μg/mL...