中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4638—2016 尖头旋蜗牛检疫鉴定方法 Detection and identification of Cochlicella acuta (Miller, 1774) 2016-08-23 发布 国家质量监督检验检疫总局 2017-03-01 实施 前言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中华人民共和国厦门出入境检验检疫局、中华人民共和国中山出入境检验检疫局、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国张家港出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：王沛、周卫川、黄蓬英、王章根、徐浪、崔俊霞、陆军、林阳武。 1 范围 本标准规定了尖头旋蜗牛 Cochlicella acuta (Muller, 1774) 的检疫鉴定方法。本标准适用于尖头旋蜗牛的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注文件的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T 3067—2011 软体动物常规检疫规范 3 术语与定义 SN/T 3067 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 鞭状体 flagellum 蜗牛雄性生殖系统中的附器，一般在阴茎本体末端分枝形成鞭状体。注：鞭状体的有无和形态常用于分类。 3.2 阴茎鞘 penial sheath 阴茎外围一薄层，紧贴于阴茎。 3.3 购液囊 reservoir 受精囊的附属器，着生于受精囊与受精囊柄连接处，用于贮存外来精液。 3.4 缝合线 suture 蜗牛贝壳各螺层之间下陷的连接处。缝合线有深有浅，有简单的或锯齿形的，这些特征常用于分类鉴定。 3.5 螺轴 columella 蜗牛贝壳的旋转中轴即称螺轴。 3.6 轴唇 columellalip 贝壳壳口的边缘为口唇，按其在壳口中的位置不同可分为内唇、外唇、轴唇、基唇、上唇和下唇，靠近螺轴的部位。 注：有些种类的轴唇常外折导致脐孔部分或完全被覆盖。 4 基本信息 学名：Cochlicella acuta (Muller, 1774) 异名：Helix acuta Muller, 1774 英文名：Pointed snail, Conical snail 俗名：尖头蜗牛、圆锥蜗牛 分类地位：软体动物门 Mollusca，腹足纲 Gastropoda，柄眼目 Stylommatophora，旋蜗牛科 Cochlicellidae Schileyko, 1972，旋蜗牛属 Cochlicella Ferussac, 1821。尖头旋蜗牛同属的近似种有巴布拉旋蜗牛 C. barbara (Linnaeus, 1758)、圆锥旋蜗牛 C. conoidea (Draparnaud, 1801)。尖头旋蜗牛的其他信息参见附录A。 5 方法原理 尖头旋蜗牛主要通过运输工具、木质包装材料和污染的农副产品远距离传播，污染的谷物、油菜籽和柑橘类水果是其最重要的传播媒介。其传播特点是不需要特定的寄主，凡接触过地面的物品都有可能传播。传播方式和传播途径是确定现场检疫方式的依据。贝壳形态、解剖结构和分子生物学特征是实验室鉴定的主要依据。 6 器具和药品 6.1 仪器和用具 设备：体视显微镜、微型离心机、恒温金属浴、PCR仪、凝胶照相系统。 器具：放大镜、手电筒、塑料自封袋、广口标本瓶、4mm孔径土壤筛、小铁铲、游标卡尺、塘瓷盘、培养皿、镊子、剪刀、小剪刀、显微镊子、显微剪刀、微针（直径0.15mm）、解剖蜡盘、标签、1.5mL离心管、0.2mL PCR反应管、移液器。 6.2 药品和试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯。75%乙醇、无水乙醇、硫酸镁、DNA提取试剂盒、PCR Master Mix、ddH2O。 7 现场检疫 对来自疫区（参见附录A）的运输工具和货物实施重点查验。仔细检查运输工具、木质包装物、未经加工的植物性材料、大麦、小麦、油菜籽、水果、牧草等是否有蜗牛附着其上。尖头旋蜗牛叠伏夜出，尤其要注意阴暗蔽光处的检查，用手电筒仔细寻找蜗牛的行迹。蜗牛爬行过后，一般会留下银灰色的丝带状黏液痕迹，这是判定是否有蜗牛污染的重要依据。发现蜗牛，随时装入塑料自封袋或标本瓶带回实验室做进一步的检验鉴定。发现盆景等携带土壤或其他细碎衬垫材料时，需过筛检查是否有卵或幼螺。 8 实验室鉴定 8.1 测量、观察、解剖和饲养 用游标卡尺测量蜗牛贝壳的壳高和壳宽、壳口高和壳口宽、卵粒直径。用肉眼或放大镜或