SN/T 4675.11-2016
基本信息
标准号： SN/T 4675.11-2016
中文名称：出口葡萄酒中7种花色苷的测定超高效液相色谱法
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
SN/T 4675.11-2016.Determination of seven anthocyanins in wine for export-Ultra high performance liquid chromatography method.
1范围
SN/T 4675.11规定了葡萄酒中花翠素-3-O-葡萄糖苷、花青素-3-O-葡萄糖苷、甲基花翠素-3-O-葡萄糖苷、甲基花青素-3-O-葡萄糖苷、二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷、花翠素-3,5-O-双葡萄糖苷以及花青素-3,5-O-双葡萄糖苷等7种花色苷的超高效液相色谱测定方法。
SN/T 4675.11适用于红葡萄酒、桃红葡萄酒、带色起泡葡萄酒中花色苷的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
样品中的花色苷直接采用超高效液相色谱分离和测定。采用甲酸=水溶液和甲酸-乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱,在518 nm波长条件下进行检测，外标法定量。
4试剂和材料
除另有说明外,所用试剂均为色谱纯,水采用GB/T 6682规定的一级水。
4.1甲 酸(HCOOH)。
4.22%甲 酸-水溶液(体积比):2 mL甲酸溶解于100 mL水中。
4.3花色苷标准物质:纯度≥95%,基本信息参见附录A.
4.4花色苷标准储备溶液:分别称取花色苷标准品(4.5)10mg(精确至0.1mg),用甲醇(4.3)溶解、定容至10mL,配制成浓度为1mg/mL的标准储备液。溶液转移至棕色玻璃瓶中后,于-20°C冰箱内避光保存。
1范围
SN/T 4675.11规定了葡萄酒中花翠素-3-O-葡萄糖苷、花青素-3-O-葡萄糖苷、甲基花翠素-3-O-葡萄糖苷、甲基花青素-3-O-葡萄糖苷、二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷、花翠素-3,5-O-双葡萄糖苷以及花青素-3,5-O-双葡萄糖苷等7种花色苷的超高效液相色谱测定方法。
SN/T 4675.11适用于红葡萄酒、桃红葡萄酒、带色起泡葡萄酒中花色苷的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
样品中的花色苷直接采用超高效液相色谱分离和测定。采用甲酸=水溶液和甲酸-乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱,在518 nm波长条件下进行检测，外标法定量。
4试剂和材料
除另有说明外,所用试剂均为色谱纯,水采用GB/T 6682规定的一级水。
4.1甲 酸(HCOOH)。
4.22%甲 酸-水溶液(体积比):2 mL甲酸溶解于100 mL水中。
4.3花色苷标准物质:纯度≥95%,基本信息参见附录A.
4.4花色苷标准储备溶液:分别称取花色苷标准品(4.5)10mg(精确至0.1mg),用甲醇(4.3)溶解、定容至10mL,配制成浓度为1mg/mL的标准储备液。溶液转移至棕色玻璃瓶中后,于-20°C冰箱内避光保存。
标准图片预览
标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4675.11-2016
出口葡萄酒中7种花色苷的测定
超高效液相色谱法
Determination of seven anthocyanins in wine for export--Ultra high performanceliquidchromatographymethod
2016-12-12发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-07-01实施
SN/T4675《出口葡萄酒质量安全分析方法》共分为30个部分：SN/T4675.1
SN/T4675.2
SN/T4675.3
SN/T4675.4
SN/T4675.5
SN/T4675.6
SN/T4675.7
SN/T4675.8
SN/T4675.9
SN/T4675.10
SN/T4675.11
SN/T4675.12
SN/T4675.13
SN/T4675.14
SN/T4675.15
SN/T4675.16
SN/T4675.17
SN/T4675.18
SN/T4675.19
SN/T4675.20
SN/T4675.21
SN/T4675.22
SN/T4675.23
SN/T4675.24
SN/T4675.25
SN/T4675.26
SN/T4675.27
SN/T4675.28
出口葡萄酒中甘油的测定酶法；出口葡萄酒中2，3-丁二醇的测定气相色谱法；出口葡萄酒中乙醇稳定碳同位素比值的测定；出口葡萄酒中乳酸的测定酶法；出口葡萄酒中有机酸的测定离子色谱法；出口葡萄酒中葡萄糖、果糖和蔗糖的测定；出口葡萄酒中乙醛的测定气相色谱-质谱法；出口葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定液相色谱法；出口葡萄酒中二甘醇的测定气相色谱-质谱法；SN/T4675.11—2016
出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定液相色谱-质谱/质谱法；出口葡萄酒中7种花色苷的测定超高效液相色谱法；出口葡萄酒中溶菌酶的测定液相色谱法；出口葡萄酒中2，4，6-三氯甲苯醚残留量的测定气相色谱-质谱法；出口葡萄酒中纳他霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法；出口葡萄酒中水杨酸、脱氢乙酸和对氯苯甲酸的测定液相色谱法；出口葡萄酒
中富马酸的测定
出口葡萄酒
出口葡菊酒中
液相色谱-质谱/质谱法；
基锡含量的测定
气相色谱-质谱/质谱法；
二硫代氨基甲酸酯残留量的测定顶空气相色谱法；出口葡萄酒中钠、镁、钾、钙、铬、锰、铁、铜、锌、砷、硒、银、镉、铅的测定；出口葡萄酒中稀土元素的测定电感耦合等离子体质谱法；出口葡萄酒中可溶性无机盐的测定离子色谱法；出口葡萄酒中总二氧化硫的测定比色法；出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定连续流动分析仪法；出口葡萄酒福林-肖卡指数的测定分光光度计法；出口葡萄酒颜色的测定CIE1976（L*ab*）色空间法；出口葡萄酒浊度的测定散射光法；出口葡萄酒碱性灰分的测定；
出口葡萄酒细菌、霉菌及酵母的计数；SN/T4675.29
出口葡萄酒中酒香酵母检验实时荧光PCR法；出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验实时荧光PCR法。SN/T4675.30
本部分为SN/T4675的第11部分，本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国北京出人境检验检疫局、中华人民共和国广东出人境检验检疫局。
本部分主要起草人：刘萤、韩深、关丽军、王玥、梁娜娜、别玮、槐硕、刘青、李志勇。I
1范围
出口葡萄酒中7种花色苷的测定
超高效液相色谱法
SN/T4675.11—2016
SN/T4675的本部分规定了葡萄酒中花翠素-3-O-葡萄糖苷、花青素-3-O-葡萄糖苷、甲基花翠素-3-O-葡萄糖苷、甲基花青素-3-O-葡萄糖苷、二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷、花翠素-3,5-O-双葡萄糖苷以及花青素-3，5-0-双葡萄糖苷等7种花色苷的超高效液相色谱测定方法。本部分适用于红葡萄酒、桃红葡萄酒、带色起泡葡萄酒中花色苷的测定。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要
样品中的花色苷直接采用超高效液相色谱分离和测定。采用甲酸-水溶液和甲酸-乙睛溶液作为流动相进行梯度洗脱，在518nm波长条件下进行检测，外标法定量。4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为色谱纯，水采用GB/T6682规定的一级水4.1乙腈(CH,CN)。
甲酸（HCOOH）。
4.3甲醇(CHOH)。
4.42%甲酸-水溶液（体积比）：2mL甲酸溶解于100mL水中4.5花色苷标准物质：纯度95%，基本信息参见附录4.6花色苷标准储备溶液：分别称取花色苷标准品（4.5）10mg（精确至0.1mg），用甲醇（4.3）溶解、定容至10mL，配制成浓度为1mg/mL的标准储备液。溶液转移至棕色玻璃瓶中后，于一20℃冰箱内避光保存。
4.7混合标准中间溶液：取标准储备液适量（4.6），混合后用甲酸-水溶液（4.4)配制成500g/mL的混合标准中间溶液，4℃下避光保存，备用。4.8混合标准工作溶液：准确移取适量的花色苷混合标准中间液（4.7)于具塞容量瓶中，用甲酸-水溶液（4.4）定容至刻度稀释成1g/mL、2g/mL、5g/mL、10g/mL、25g/mL、50g/mL及100g/mL浓度水平的混合标准工作溶液，摇匀，使用前配制。5仪器和设备
5.1超高效液相色谱仪：配有紫外或二极管阵列检测器。1
SN/T4675.11—2016
5.2色谱柱：五氟苯基类表面多孔微粒色谱柱（poroshe11120PFPl>），柱长100mm，柱内径3mm，填料粒径2.7m：或同等性能的色谱柱。5.3分析天平：精度为0.1mg。
5.4具塞容量瓶：5mL，10mL。
5.5移液器：0.5μL10μL，20μL~200μL，100μL~1000μL。5.6
涡旋振荡器。
高速离心机：转速≥10000r/min。5.7
5.8玻璃烧杯：250mL。
具塞塑料离心管：2mL。
测定步骤
样品处理
将葡萄酒样品摇匀。倒取约20mL样品于洁净的玻璃烧杯（5.8）中.再用移液器量取2mL样品至具塞塑料离心管（5.9)中，于12000r/min离心120S。取出后，用微量取液器吸取清液约1mL于进样小瓶中，待液相色谱分析。
起泡葡萄酒需预先脱气。将100mL试样倒人带排气塞的瓶中，在室温下使用水平振荡器或超声波水浴脱气，直至无气泡逸出。测定
色谱条件
流动相：A液，2%甲酸-水溶液（体积比）；B液，2%甲酸-乙睛溶液（体积比）。梯度洗脱：参见表1。
流动相流速：0.4mL/min。
柱温：40℃。
进样体积：5μL。
检测波长：518nm。
表1梯度洗脱条件
时间/min
色谱分析
流动相A/%
流动相B/%
根据设定的色谱条件（6.2.1)，取花色苷系列混合标准工作溶液（4.8)及样品（6.1)等体积进样测定，并绘制峰面积对应浓度含量的标准曲线。样品中待测物应在标准曲线范围之内，如果含量超出标准曲线范围，应对样品用2%甲酸-水溶液进行适当稀释后测定。花色苷的超高效液相色谱图参见附录B中图B.1，参考保留时间参见附录B中表B.1。在相同试验条件下，样品与标准品工作溶液中待测物质的1）给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可，如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。
色谱峰相对保留时间的相对偏差在土2.5%以内。6.2.3空白试验
用水代替样品，按6.1步骤做空白试验。应确认不含有干扰被测组分的物质。结果计算和表述
SN/T4675.11—2016
样品中花色苷含量按式（1)计算获得，计算结果应扣除空白值，并保留两位有效数字。X=c×f×1000
式中：
-样品中待测物的含量，单位为毫克每升（mg/L)；由外标法标准曲线得到的样品中待测物的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）)；-样品的稀释倍数。
结果保留3位有效数字。
8方法的定量限、精密度和回收率8.1
定量限
...（1)
花翠素一3,5-O-双葡萄糖苷的定量限为5mg/L，花青素-3，5-O-双葡萄糖苷、花翠素-3-O-葡萄糖苷、花青素-3-O-葡萄糖苷、甲基花翠素-3-O-葡萄糖苷、甲基花青素-3-O-葡萄糖苷、二甲花翠素-3-O-葡萄糖昔等6种花色苷的定量限为1mg/L。8.2精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对值不得超过算术平均值的10%。8.3回收率
红葡萄酒、桃红葡萄酒和带色起泡葡萄酒中7种花色苷的添加水平及回收率数据见表2。表2
红葡萄酒、桃红葡萄酒和带色起泡葡萄酒中7种花色苷的添加水平及回收率数据表回收率范围及精密度
化合物
花翠素-3,5-0
双葡萄糖苷
花青素-3,5-0-
双葡萄糖苷
添加水平
红葡萄酒
回收率
90.4~95.8
84.7~87.7
88.3~93.7
97.7~99.6
桃红葡萄酒
回收率
90.3~94.8
85.0~87.9
87.0~89.8
86.8~94.5
96.3~99.5
80.5~86.0
带色起泡葡萄
酒回收率
93.0~95.3
85.0~87.7
87.8~89.7
85.9~94.1
96.4~98.9
80.2~86.8
SN/T4675.11—2016
化合物
花翠素-3-0-
葡萄糖苷
花青素-3-0-
葡萄糖苷
甲基花翠素-3-0-
葡萄糖苷
甲基花青素-3-0-
葡萄糖苷
二甲花翠素-3-0-
葡萄糖苷
添加水平
表2（续）
红葡萄酒
回收率
88.3~94.9
96.2~99.9
83.8~96.0
89.1~94.7
96.3~97.7
90.1~95.6
回收率范围及精密度
桃红葡萄酒
回收率
87.2~91.3
97.2~99.7
85.9~92.7
98.1~99.6
89.1~94.2
82.1~86.4
85.7~90.3
96.2~98.6
85.0~87.6
87.1~89.9
带色起泡葡萄
酒回收率
85.6~93.1
96.2~99.7
81.1~87.8
85.9~89.7
97.8~99.8
81.0~85.8
87.3~93.4
85.3~93.5
80.4~87.5
90.0~95.5
85.9~87.8
87.3~89.5
标准物质的基本信息表见表A.1。附录A
（资料性附录）
标准物质的基本信息表
表A.1标准物质的基本信息表
中文名称
花翠素-3-O-氯化葡萄糖苷
花青素-3-O-氯化葡萄糖苷
甲基花翠素-3-O-氯化葡萄糖苷
甲基花青素-3-O-氯化葡萄糖苷
二甲花翠素-3-0-氯化葡萄糖苷
花翠素-3,5-O-氯化双葡萄糖苷
花青素-3,5-0-氯化双葡萄糖
英文名称
Delphinidin-3-O-glucoside chlorideCyanidin-3-O-glucosidechloridePetunidin-3-O-glucoside chloridePeonidin-3-O-glueosidechlorideMalvidin-3-O-glucoside chlorideDelphinidin-35-O-diglucoside chlorideCyanidin-3,5-O-diglucoside chlorideS
CAS号
6906-38-3
7084-24-4
6988-81-4
6906-39-4
7228-78-6
17670-06-3
2611-67-8
SN/T4675.11—2016
分子式
C21H21O12CI
Ce2H2s O12Cl
C22H2sOCI
CzaH2sO12Cl
C,Ha,O1Cl
C2HaOeCl
分子量
SN/T4675.11—2016
附录B
（资料性附录）
起高效液相色谱图及花色苷保留时间花色苷标准品色谱图见图B.1。
花色苷色谱参考保留时间见表B.1。表B.1
化合物
花翠素-3,5-0-双葡葡糖苷
花青索-3,5-0-双葡萄糖苷
花翠素-3-O-葡萄糖苷
花青素-3-0-葡萄糖苷
甲基花翠素-3-O-葡萄糖苷
二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷
甲基花青素-3-O-葡萄糖苷
花色苷标准品色谱图
花色苷色谱参考保留时间
保留时间/min
SN/T4675.11-2016
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
出口葡萄酒中7种花色苷的测定
超高效液相色谱法
SN/T4675.11—2016
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：(010)68533533
网址spc.net.cn免费标准bzxz.net
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*
开本880×12301/16
印张0.75字数16千字
2017年12月第一版
2017年12月第-次印刷
印数1-500
2定价16.00元
书号：155066·2-32302
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出口葡萄酒中7种花色苷的测定
超高效液相色谱法
Determination of seven anthocyanins in wine for export--Ultra high performanceliquidchromatographymethod
2016-12-12发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-07-01实施
SN/T4675《出口葡萄酒质量安全分析方法》共分为30个部分：SN/T4675.1
SN/T4675.2
SN/T4675.3
SN/T4675.4
SN/T4675.5
SN/T4675.6
SN/T4675.7
SN/T4675.8
SN/T4675.9
SN/T4675.10
SN/T4675.11
SN/T4675.12
SN/T4675.13
SN/T4675.14
SN/T4675.15
SN/T4675.16
SN/T4675.17
SN/T4675.18
SN/T4675.19
SN/T4675.20
SN/T4675.21
SN/T4675.22
SN/T4675.23
SN/T4675.24
SN/T4675.25
SN/T4675.26
SN/T4675.27
SN/T4675.28
出口葡萄酒中甘油的测定酶法；出口葡萄酒中2，3-丁二醇的测定气相色谱法；出口葡萄酒中乙醇稳定碳同位素比值的测定；出口葡萄酒中乳酸的测定酶法；出口葡萄酒中有机酸的测定离子色谱法；出口葡萄酒中葡萄糖、果糖和蔗糖的测定；出口葡萄酒中乙醛的测定气相色谱-质谱法；出口葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定液相色谱法；出口葡萄酒中二甘醇的测定气相色谱-质谱法；SN/T4675.11—2016
出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定液相色谱-质谱/质谱法；出口葡萄酒中7种花色苷的测定超高效液相色谱法；出口葡萄酒中溶菌酶的测定液相色谱法；出口葡萄酒中2，4，6-三氯甲苯醚残留量的测定气相色谱-质谱法；出口葡萄酒中纳他霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法；出口葡萄酒中水杨酸、脱氢乙酸和对氯苯甲酸的测定液相色谱法；出口葡萄酒
中富马酸的测定
出口葡萄酒
出口葡菊酒中
液相色谱-质谱/质谱法；
基锡含量的测定
气相色谱-质谱/质谱法；
二硫代氨基甲酸酯残留量的测定顶空气相色谱法；出口葡萄酒中钠、镁、钾、钙、铬、锰、铁、铜、锌、砷、硒、银、镉、铅的测定；出口葡萄酒中稀土元素的测定电感耦合等离子体质谱法；出口葡萄酒中可溶性无机盐的测定离子色谱法；出口葡萄酒中总二氧化硫的测定比色法；出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定连续流动分析仪法；出口葡萄酒福林-肖卡指数的测定分光光度计法；出口葡萄酒颜色的测定CIE1976（L*ab*）色空间法；出口葡萄酒浊度的测定散射光法；出口葡萄酒碱性灰分的测定；
出口葡萄酒细菌、霉菌及酵母的计数；SN/T4675.29
出口葡萄酒中酒香酵母检验实时荧光PCR法；出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验实时荧光PCR法。SN/T4675.30
本部分为SN/T4675的第11部分，本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国北京出人境检验检疫局、中华人民共和国广东出人境检验检疫局。
本部分主要起草人：刘萤、韩深、关丽军、王玥、梁娜娜、别玮、槐硕、刘青、李志勇。I
1范围
出口葡萄酒中7种花色苷的测定
超高效液相色谱法
SN/T4675.11—2016
SN/T4675的本部分规定了葡萄酒中花翠素-3-O-葡萄糖苷、花青素-3-O-葡萄糖苷、甲基花翠素-3-O-葡萄糖苷、甲基花青素-3-O-葡萄糖苷、二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷、花翠素-3,5-O-双葡萄糖苷以及花青素-3，5-0-双葡萄糖苷等7种花色苷的超高效液相色谱测定方法。本部分适用于红葡萄酒、桃红葡萄酒、带色起泡葡萄酒中花色苷的测定。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要
样品中的花色苷直接采用超高效液相色谱分离和测定。采用甲酸-水溶液和甲酸-乙睛溶液作为流动相进行梯度洗脱，在518nm波长条件下进行检测，外标法定量。4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为色谱纯，水采用GB/T6682规定的一级水4.1乙腈(CH,CN)。
甲酸（HCOOH）。
4.3甲醇(CHOH)。
4.42%甲酸-水溶液（体积比）：2mL甲酸溶解于100mL水中4.5花色苷标准物质：纯度95%，基本信息参见附录4.6花色苷标准储备溶液：分别称取花色苷标准品（4.5）10mg（精确至0.1mg），用甲醇（4.3）溶解、定容至10mL，配制成浓度为1mg/mL的标准储备液。溶液转移至棕色玻璃瓶中后，于一20℃冰箱内避光保存。
4.7混合标准中间溶液：取标准储备液适量（4.6），混合后用甲酸-水溶液（4.4)配制成500g/mL的混合标准中间溶液，4℃下避光保存，备用。4.8混合标准工作溶液：准确移取适量的花色苷混合标准中间液（4.7)于具塞容量瓶中，用甲酸-水溶液（4.4）定容至刻度稀释成1g/mL、2g/mL、5g/mL、10g/mL、25g/mL、50g/mL及100g/mL浓度水平的混合标准工作溶液，摇匀，使用前配制。5仪器和设备
5.1超高效液相色谱仪：配有紫外或二极管阵列检测器。1
SN/T4675.11—2016
5.2色谱柱：五氟苯基类表面多孔微粒色谱柱（poroshe11120PFPl>），柱长100mm，柱内径3mm，填料粒径2.7m：或同等性能的色谱柱。5.3分析天平：精度为0.1mg。
5.4具塞容量瓶：5mL，10mL。
5.5移液器：0.5μL10μL，20μL~200μL，100μL~1000μL。5.6
涡旋振荡器。
高速离心机：转速≥10000r/min。5.7
5.8玻璃烧杯：250mL。
具塞塑料离心管：2mL。
测定步骤
样品处理
将葡萄酒样品摇匀。倒取约20mL样品于洁净的玻璃烧杯（5.8）中.再用移液器量取2mL样品至具塞塑料离心管（5.9)中，于12000r/min离心120S。取出后，用微量取液器吸取清液约1mL于进样小瓶中，待液相色谱分析。
起泡葡萄酒需预先脱气。将100mL试样倒人带排气塞的瓶中，在室温下使用水平振荡器或超声波水浴脱气，直至无气泡逸出。测定
色谱条件
流动相：A液，2%甲酸-水溶液（体积比）；B液，2%甲酸-乙睛溶液（体积比）。梯度洗脱：参见表1。
流动相流速：0.4mL/min。
柱温：40℃。
进样体积：5μL。
检测波长：518nm。
表1梯度洗脱条件
时间/min
色谱分析
流动相A/%
流动相B/%
根据设定的色谱条件（6.2.1)，取花色苷系列混合标准工作溶液（4.8)及样品（6.1)等体积进样测定，并绘制峰面积对应浓度含量的标准曲线。样品中待测物应在标准曲线范围之内，如果含量超出标准曲线范围，应对样品用2%甲酸-水溶液进行适当稀释后测定。花色苷的超高效液相色谱图参见附录B中图B.1，参考保留时间参见附录B中表B.1。在相同试验条件下，样品与标准品工作溶液中待测物质的1）给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可，如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。
色谱峰相对保留时间的相对偏差在土2.5%以内。6.2.3空白试验
用水代替样品，按6.1步骤做空白试验。应确认不含有干扰被测组分的物质。结果计算和表述
SN/T4675.11—2016
样品中花色苷含量按式（1)计算获得，计算结果应扣除空白值，并保留两位有效数字。X=c×f×1000
式中：
-样品中待测物的含量，单位为毫克每升（mg/L)；由外标法标准曲线得到的样品中待测物的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）)；-样品的稀释倍数。
结果保留3位有效数字。
8方法的定量限、精密度和回收率8.1
定量限
...（1)
花翠素一3,5-O-双葡萄糖苷的定量限为5mg/L，花青素-3，5-O-双葡萄糖苷、花翠素-3-O-葡萄糖苷、花青素-3-O-葡萄糖苷、甲基花翠素-3-O-葡萄糖苷、甲基花青素-3-O-葡萄糖苷、二甲花翠素-3-O-葡萄糖昔等6种花色苷的定量限为1mg/L。8.2精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对值不得超过算术平均值的10%。8.3回收率
红葡萄酒、桃红葡萄酒和带色起泡葡萄酒中7种花色苷的添加水平及回收率数据见表2。表2
红葡萄酒、桃红葡萄酒和带色起泡葡萄酒中7种花色苷的添加水平及回收率数据表回收率范围及精密度
化合物
花翠素-3,5-0
双葡萄糖苷
花青素-3,5-0-
双葡萄糖苷
添加水平
红葡萄酒
回收率
90.4~95.8
84.7~87.7
88.3~93.7
97.7~99.6
桃红葡萄酒
回收率
90.3~94.8
85.0~87.9
87.0~89.8
86.8~94.5
96.3~99.5
80.5~86.0
带色起泡葡萄
酒回收率
93.0~95.3
85.0~87.7
87.8~89.7
85.9~94.1
96.4~98.9
80.2~86.8
SN/T4675.11—2016
化合物
花翠素-3-0-
葡萄糖苷
花青素-3-0-
葡萄糖苷
甲基花翠素-3-0-
葡萄糖苷
甲基花青素-3-0-
葡萄糖苷
二甲花翠素-3-0-
葡萄糖苷
添加水平
表2（续）
红葡萄酒
回收率
88.3~94.9
96.2~99.9
83.8~96.0
89.1~94.7
96.3~97.7
90.1~95.6
回收率范围及精密度
桃红葡萄酒
回收率
87.2~91.3
97.2~99.7
85.9~92.7
98.1~99.6
89.1~94.2
82.1~86.4
85.7~90.3
96.2~98.6
85.0~87.6
87.1~89.9
带色起泡葡萄
酒回收率
85.6~93.1
96.2~99.7
81.1~87.8
85.9~89.7
97.8~99.8
81.0~85.8
87.3~93.4
85.3~93.5
80.4~87.5
90.0~95.5
85.9~87.8
87.3~89.5
标准物质的基本信息表见表A.1。附录A
（资料性附录）
标准物质的基本信息表
表A.1标准物质的基本信息表
中文名称
花翠素-3-O-氯化葡萄糖苷
花青素-3-O-氯化葡萄糖苷
甲基花翠素-3-O-氯化葡萄糖苷
甲基花青素-3-O-氯化葡萄糖苷
二甲花翠素-3-0-氯化葡萄糖苷
花翠素-3,5-O-氯化双葡萄糖苷
花青素-3,5-0-氯化双葡萄糖
英文名称
Delphinidin-3-O-glucoside chlorideCyanidin-3-O-glucosidechloridePetunidin-3-O-glucoside chloridePeonidin-3-O-glueosidechlorideMalvidin-3-O-glucoside chlorideDelphinidin-35-O-diglucoside chlorideCyanidin-3,5-O-diglucoside chlorideS
CAS号
6906-38-3
7084-24-4
6988-81-4
6906-39-4
7228-78-6
17670-06-3
2611-67-8
SN/T4675.11—2016
分子式
C21H21O12CI
Ce2H2s O12Cl
C22H2sOCI
CzaH2sO12Cl
C,Ha,O1Cl
C2HaOeCl
分子量
SN/T4675.11—2016
附录B
（资料性附录）
起高效液相色谱图及花色苷保留时间花色苷标准品色谱图见图B.1。
花色苷色谱参考保留时间见表B.1。表B.1
化合物
花翠素-3,5-0-双葡葡糖苷
花青索-3,5-0-双葡萄糖苷
花翠素-3-O-葡萄糖苷
花青素-3-0-葡萄糖苷
甲基花翠素-3-O-葡萄糖苷
二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷
甲基花青素-3-O-葡萄糖苷
花色苷标准品色谱图
花色苷色谱参考保留时间
保留时间/min
SN/T4675.11-2016
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
出口葡萄酒中7种花色苷的测定
超高效液相色谱法
SN/T4675.11—2016
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：(010)68533533
网址spc.net.cn免费标准bzxz.net
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*
开本880×12301/16
印张0.75字数16千字
2017年12月第一版
2017年12月第-次印刷
印数1-500
2定价16.00元
书号：155066·2-32302
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