SN/T 4677-2016.Determination of azodicarbonamide in foods for export-HPLC method.
1范围
SN/T 4677规定了出口面粉中偶氮甲酰胺的高效液相色谱测定方法。
SN/T 4677适用于面粉中偶氮甲酰胺的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法:
3方法提要
样品经丙酮超声提取后,脱脂,高效液相色谱-二极管阵列检测器检测,基质匹配标准工作曲线外标法定量。
4试剂材料
除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1 丙酮:色谱纯。
4.2正己烷:色谱纯。
4.3磷酸。
4.4磷酸氢二钾。
4.50.02% 磷酸氢二钾溶液:准确称取0.2g磷酸氢二钾,加水溶解并定容至1L,用磷酸(4.3)调节pH至2.4。
4.60.5% 磷酸氢二钾溶液:准确称取0.5 g磷酸氢二钾,加水溶解并定容至100 mL。
4.7偶氮甲酰胺标准储备溶液:准确称取适量偶氮甲酰胺标准物质,用温水(60°C~70°C)超声溶解并稀释成浓度为100mg/L的标准储备溶液。
4.8偶氮甲酰胺标准工作溶液:根据需要用水稀释成适当浓度的标准工作溶液。
4.9微孔滤 膜:0.45 μm,水相。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4677—2016
出口食品中偶氮甲酰胺的测定方法高效液相色谱法
Determination of azodicarbonamide in foods for export-HPLC method2016-12-12发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-07-01实施
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
出口食品中偶氮甲酰胺的测定方法高效液相色谱法
SN/T4677—2016
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029)北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：(010)68533533
网址spc.net.cn
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*
开本880×1230
2017年11月第一版
印张0.5
字数8千字
2017年11月第一次印刷
印数1-500
书号：155066·2-32204
定价14.00
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草，本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T4677—2016
本标准起草单位：中华人民共和国重庆出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：王俊苏、彭涛、刘念源、关天横、王国民、唐伯彬、郑晓玲。1范围
出口食品中偶氮甲酰胺的测定方法高效液相色谱法
本标准规定了出口面粉中偶氮甲酰胺的高效液相色谱测定方法。本标准适用于面粉中偶氮甲酰胺的测定。2
规范性引用文件
SN/T4677—2016
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。2分析实验室用水规格和试验方法GB/T6682
3方法提要
样品经丙酮超声提取后，脱脂，高效液相色谱-二极管阵列检测器检测，基质匹配标准工作曲线外标法定量。
试剂材料
除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1丙酮：色谱纯。
正已烷：色谱纯。
磷酸。
磷酸氢二钾。
0.02%磷酸氢二钾溶液：准确称取0.2g磷酸氢二钾，加水溶解并定容至1L，用磷酸（4.3)调节pH至2.4。
0.5%磷酸氢二钾溶液：准确称取0.5g磷酸氢二钾，加水溶解并定容至100mL。偶氮甲酰胺标准物质：CAS号123-77-3，分子式C,H,N,O2，相对分子质量116.1。4.7
偶氮甲酰胺标准储备溶液：准确称取适量偶氮甲酰胺标准物质，用温水（60℃～70℃）超声溶解并4.8
稀释成浓度为100mg/L的标准储备溶液偶氮甲酰胺标准工作溶液：根据需要用水稀释成适当浓度的标准工作溶液。4.9
微孔滤膜：0.45μm，水相。
仪器与设备
5.1高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器。5.2电子天平：感量为0.0001g和0.01g。5.3离心机：转速不低于7500r/min。1
SN/T4677—2016
5.4旋转蒸发仪。
5.5振荡器。
5.6涡旋混合器。
离心管聚丙烯，具塞，50mL。
分析步骤
6.1提取
称取2.00g试样（精确至0.01g）于50mL离心管（5.7)中，加10mL丙酮（4.1)，振荡提取15min，以7500r/min的转速离心5min，将丙酮层小心取出到100mL旋蒸瓶中。残留物再用10mL丙酮重复提取一次。合并提取液于上述旋蒸瓶中，40℃下旋转蒸发至干，用5mL0.5%磷酸氢二钾溶液（4.6）溶液溶解，再加人5mL正已烷（4.2）涡旋1min脱脂，静置分层后，取下层溶液过0.45μm滤膜（4.10），备用。
6.2高效液相色谱条件
高效液相色谱条件如下：
色谱柱：C1s色谱柱（150mm×4.6mm，5μm），或相当者。a）Www.bzxZ.net
流动相：0.02%磷酸氢二钾溶液（4.5）。c)
流速：0.5mL/min。
检测波长：245nm。
柱温：30℃。
进样量：50μL。
6.3空白试验
除不加试样外，均按上述步骤进行6.4基质匹配标准工作曲线绘制
分别准确称取空白面粉2.00g（精确至0.01g）于50mL具塞离心管中，分别添加0.4mg/L，2mg/L，4mg/L，8mg/L，18mg/L，36mg/L偶氮甲酰胺标准工作溶液（4.9），按照6.1进行分析，得到基质匹配标准工作溶液。基质匹配标准工作溶液和试样中偶氮甲酰胺的响应值均应在仪器线性范围内。将系列基质匹配标准工作溶液依次按上述色谱条件测定，记录色谱峰面积。以色谱峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线6.5测定
根据保留时间定性，外标法定量。偶氮甲酰胺标准品的高效液相色谱图参见附录A中图A.1。在上述色谱条件下，偶氮甲酰胺的保留时间约为3.9min。试样溶液的分析应在4h内完成。结果计算与表达
结果用色谱数据处理机或按式（1)计算试样中偶氮甲酰胺的含量：AXCxV
式中：
试样中偶氮甲酰胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；样液中偶氮甲酰胺的峰面积；
SN/T4677—2016
基质匹配标准工作溶液中偶氮甲酰胺的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；基质匹配标准工作溶液中偶氮甲酰胺的峰面积；最终样液代表的试样量，单位为克（g）。注：计算结果需扣除空白值。
定量限和回收率
定量限
本方法偶氮甲酰胺的定量限为1.0mg/kg。回收率
样品的添加浓度及回收率的实验数据见表1。表1
添加浓度及回收率的实验数据
样品名称
添加水平
回收率范围
76.0~101.0
86.2103.8
91.7~103.0
86.9~96.1
SN/T4677—2016
SN/T4677-2016
附录A
（资料性附录）
偶氮甲酰胺标准品的高效液相色谱图ADC,Rt=3.9min
偶氮甲酰胺标准品的高效液相色谱图（20mg/L）min
书号：155066·2-32204
定价：
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