SN/T 4081-2014.Detection and identification of Pratylenchus vulnus Allen & Jesen.
1范围
SN/T 4081规定了进出境植物检疫中伤残短体线虫的检疫鉴定方法。
SN/T 4081适用于进出境植物及植物产品、土壤等传带的伤残短体线虫的检疫鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T 2757植 物线虫检测规范
3符号
下列符号适用于本文件。
n一测计的线虫样本数目;
L一虫体体长(μm或mm);
a一体长/最大体宽;
b一体长/虫体前端至食道与肠连接处的距离;
b'一体长/体前端至食道腺米端的距离;
c一体长/尾长;
c'一尾长/肛门处体宽;
gubernaculums一引带长度;
4方法原理
中文名称:伤残短体线虫
学名:Pratylenchus vulnus Allen &. Jesen,1951
异名:Anguillulina pratensis Thorne,1934
Pratylenchus musicola Condit &. Horne, 1938
Pratylenchus pratensis Allen, 1949 ; Serr& Day,1949
英文名:Walnut meadow nematode; W alnut root-lesion nematode
分类地位:线虫门(Nematoda)、侧尾腺纲(Secernentea)、垫刃目(Tylenchida)、短体科( Pratylenchi-dae)、短体亚科(Pratylenchinae)、 短体属(Pratylenchus)。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4081—2014
伤残短体线虫检疫鉴定方法
Detection and identification of Pratylenchus vulnus Allen &Jesen2014-11-19发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
展查真伙
2015-05-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T4081-2014
本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民共和国天津出境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国伊犁出人境检验检疫局。
本标准主要起草人：龙海、李一农、王金成、李芳荣、顾建峰、乾义柯。I
1范围
伤残短体线虫检疫鉴定方法
本标准规定了进出境植物检疫中伤残短体线虫的检疫鉴定方法。本标准适用于进出境植物及植物产品、土壤等传带的伤残短体线虫的检疫鉴定。2规范性引用文件
SN/T4081—2014
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用手本文件。SN/T2757植物线虫检测规范
3符号
下列符号适用于本文件。
测计的线虫样本数目；
虫体体长（μm或mm）；
体长/最大体宽；
体长/虫体前端至食道与肠连接
处的距离
体长/体前端至食道腺未端的距
体长/尾长；
尾长/肛门处体宽；
gubernaculums-
一引带长度
口针长度（μm）；
spicule——交合刺长度；
T—一泄殖腔开口至精巢末端的距离×100/体长V
虫体前端至阴门的距离×100/体长4方法原理
中文名称：伤残短体线虫
学名：PratylenchusvulnusAllen&Jesen，1951异名：AnguillulinapratensisThorne，1934PratylenchusmusicolaCondit&Horne,1938PratylenchuspratensisAllen,1949,Serr&.Day,1949英文名：Walnutmeadownematode；Walnutroot-lesionnematode分类地位：线虫门（Nematoda）、侧尾腺纲（Secernentea）、垫刃目（Tylenchida）、短体科（Pratylenchi-dae）、短体亚科（Pratylenchinae）、短体属（Pratylenchus）。伤残短体线虫是内寄生性线虫，通常破坏寄主植物根系的外层组织，随着线虫的取食，根系细胞大1
SN/T4081—2014
量受损，从出现大面积病变的根系中可分离到线虫。受害植株须根减少，根系不发达，若有其他病原物将导致根系腐烂。伤残短体线虫危害80余种植物。根据寄主范围、传播途径、生物学和形态学特征进行该线虫的检疫鉴定。伤残短体线虫的寄主范围、地理分布和传播途径参见附录A。5仪器、用具和药品
仪器与用具
光学显微镜、体式显微镜、冰箱、加热板、打孔器、载玻片、盖玻片、标准套筛（60目500目）、烧杯（500mL、1000mL）、漏斗、漏斗架、乳胶管、止水夹、凹玻片、剪刀、挑针、浅盘、玻璃纤维丝、酒精灯、培养血、试管、纱布、干燥器、记号笔5.2药品
指甲油、4%甲醛、乳酚油（苯酚20mL、乳酸20mL、甘油40mL和蒸馏水20mL混合而成）、石蜡、冰乙酸。
6检疫与鉴定
现场检疫与取样
对植物及其产品的根、鳞球茎、块茎、根状茎等地下部分进行检查，是否有根腐症状。收集上述可疑植物材料及所附带的土壤，送实验室检验6.2实验室检验
对于抽取的样品，可用浅盘分离法或漏斗法分离线虫，具体操作过程见SN/T2757。对于少量的植物样品，直接在体视显微镜下用解剖针对样品进行解剖。将线虫分离液在体视显微镜下检查，挑取或吸取疑似线虫若干条，制成临时玻片在显微镜下镜检，观察线虫的形态。线虫临时玻片标本制作方法见SN/T2757。
7伤残短体线虫的形态学鉴定特征7.1
形态特征图
形态特征见附录B。
7.2形态特征描述
雌虫：虫体细长，温和热杀死后虫体直伸，头区高连续，唇区有3～4条环纹。口针发达，基部球圆形，有时前端呈杯状；中食道球椭圆形，较窄；排泄孔位于食道与肠交界处；食道腺从腹面以长叶状覆盖肠的前端。受精囊充满精子时呈长椭圆形，具长的和分化的后阴子宫囊，长度为阴门处体宽的2倍，侧区具4条侧线，外侧的侧线光滑或略呈锯齿状，中间2条侧线距离较近。尾圆锥形，尾尖细圆或亚锐尖、光滑，偶尔具1～2条环纹。
雄虫：常见，头区和食道的构造与雌虫相似。侧区在交合伞处终止，交合伞延伸到尾尖。交合刺弯曲，引带简单。
7.3测量值
7.3.1雌虫
SN/T4081—2014
L=0.46mm~0.91mm;a=26.6~39.5;b=5.3~7.7;c=14.2~27.7;V=78~84;St=16μm~18μm(Allen&Jensen,1951)。
n=14:L=0.47mm~0.72mma=27.8~37.6;b=5.7~7.7c=18.4~24.7;V=77~82;St=13μm~16μm（Loof,1960)。
n=10:L=0.62(0.46~0.80)mm;a=33(27~37);b=6.4(5.3~7.5);c=21(1428);c=2.7(2.3~3.0)；V=80(78~83);St=17(16~18)μm(Ryss,1988)。n=80:L=0.49(0.43~0.61)mm;a=30.5(24.9~37.3);b=5.5(4.7~7.0);b=4.1(3.2~5.2);c=20.2(16.2~25.1);c=2.4(2.0~3.0);V=80(77~84);St=15(14~16)μm(Doucet&.Lax,1997)。n=39:L=0.65(0.50~0.81)mm;a=26.7(20.8~30.7);b=6.84.8~9.0);b=4.7(3.4~7.1)c=21.0(17.5~30.4);V=80(73~83);St=16.7(15~18)μm(Gaoetal.,1999)。7.3.2雄虫
L=0.46mm~0.73mm;a=28.3~39.2;b=5.3~7.4;c=17.5~29.4;T=36~66;gubernaculums=4μm~6μm;spicule=14μm~20μm;St=15μm~18μm(Allen&Jensen,1951)。n=9:L=0.49mm~0.61mm;a=32.1~38.5;b=6.3~7.2;c=20.5~23.6;T=34~53St=13μm~15μm(Loof,1960)。
n=7:L=0.57（0.46~0.71)mm;a=33(28~35);b=6.0(5.3~7.2);c=21(18~26)；c=2.7(2.1~3.1)；St=16(15~18)μm;spicules=17(14~20)μm;gubernaculum=5(4~6)μm(Ryss,1988)。n=80:L=0.46(0.41~0.53)mm;a=31.0(27.6~37.4);b=5.3(4.6~6.0);6=4.1(3.5~4.6);c=20.4(15.9~23.8)；c=2.0(1.9~2.4);St=14.5（13~16)μm;spicules=18(15~21)μm;gubernaculum=6.5（5.07.0)μm(Doucet&.Lax，1997)。n=20:L=0.53(0.43~0.61)mm;a=30.7(21.7~38.4)；b=6.2(5.2~.72)；b=4.4(3.7~5.7);c=19.8(17.9~25.8)T=43(31~55);St=15(14.5~17)μm(Gaoetal.,1999)。7.3.3与近似种的区别
与近似种的形态区别见表1。
表1五种短体线虫的形态区别
短体线虫种
伤残短体线虫
穿刺短体线虫
P.penetrans
咖啡短体线虫
P.coffeae
唇环数
口针长度/μm
侧区刻线
4（少数
4~6)条
受精囊形状
长椭圆形
近圆形
长卵圆形
雌虫尾形
锥形、尾尖细圆、
偶尔具1~2条环纹
锥形、末端钝圆、
无环纹
亚圆柱形、
末端无环纹
后阴子宫囊
长度/μm
1倍1.5倍
阴门处体宽
SN/T4081—2014
短体线虫种
卢斯短体线虫
草地短体线虫
P.pralensis
结果判定
唇环数
口针长度/μm
表1（续）
侧区刻线
4（少数
5~6)条
受精囊形状
长卵形
长椭圆形
虫尾形
锥形、尾端无环
纹、钝尖
锥形、尾端具
后阴子宫囊
长度/μm
以雌虫和雄虫的形态学作为该线虫的鉴定依据，符合第7章形态特征和测量值的可鉴定为伤残短体线虫。
9样本保存和复核
样品保存
样品登记后，经手人签字，妥善保伤残短体线虫，该样品至少在4℃保存3个月，以备复验、谈判和仲裁。保存期满后，发现伤残短体线虫的样品需做销毁处理。9.2
线虫标本的保存
若鉴定为伤残短体线虫，则将剩余的线虫杀死、固定制成永久玻片保存；也可以固定后放入含4%甲醛溶液的指形管中长期保存。线虫永久玻片标本制作方法见SN/T2757。A.1地理分布
附录A
（资料性附录）
伤残短体线虫的分布、寄主范围和传播途径SN/T4081-2014
美国、加拿大、墨西哥、阿根廷、巴西、乌拉圭、肯尼亚、南非、比利时、保加利亚、丹麦、英格兰、芬兰法国、德国、挪威、希腊、意大利、俄罗斯、西班牙、中国、伊朗、以色列、日本、韩国、巴基斯坦、斯里兰卡、澳大利亚。
A.2寄主植物
可寄生80余种植物，大多数为木本植物、落叶果树、坚果类植物等，比较重要的经济作物和农作物有苹果（Maluspumila）、葡萄（Vitisvinifera）、杏（Prunusarmeniaca）、桃（Prunuspersica）、樱桃（Cerasus pseudocerasus）、黑莓（Rubus corchorifolius）、覆盆子（FructusRubi）、草莓（Fragariaananassa）、酸橙（Citrusaurantium）、芒果（Mangiferaindica）、红薯（Dioscoreaesculenta）、玫瑰（Rosarugosa）、烟草（Nicotianatabacum）、棉花（Gossypiumhirsutum）、橄榄（Canaviumalbum）、核桃（Juglansregia）、大豆（Glycinemar）、芭蕉（Musabasjoo）、红杉（Larirpotanini）、黄杨木（BurusSinica）等。A.3
3传播途径
自然界线虫的传播除线虫本身的运动外，主要靠农事操作、病苗、病土的转移、搬运和流水传带，远距离传播由病苗或病砧木调运引起。5
SN/T4081—2014
说明：
—整个雌虫；
整个雄虫：wwW.bzxz.Net
注：采自Corbett1974。
附录B
（规范性附录）
伤残短体线虫主要形态鉴定特征图0
雌虫横切面；
雄虫唇区：
伤残短体线虫主要形态鉴定特征图E
雌虫唇区；
雌虫尾。
图B.2雌虫侧区（100×）
雌中尾部（100×）
图B.3雌虫前体部（100×）
雄虫交合伞（100×）
雌虫阴门（100×）
SN/T4081—2014
图B.4雄虫前体部（100×）
雌虫受精囊（100×）
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